一种用扩张床吸附技术从乳清中提纯乳铁蛋白的方法技术

本发明专利技术提供了一种用扩张床吸附技术从乳清中提纯乳铁蛋白的方法。包括以下步骤：1）甜乳清粉加水溶解制成乳清溶液或采用市售液态乳清液,用NaOH调节pH；2）扩张床内装填阳离子交换层析介质，用磷酸盐缓冲液从下向上通过床层，平衡扩张床；3）通入步骤1）的溶液进行吸附，再用含NaCl的缓冲液进行洗脱，收集洗脱液；4）最后用NaOH清洗，并用缓冲液再生介质。本发明专利技术以扩张床吸附为核心分离方法，一步分离得到乳铁蛋白的纯度能达到88～93%之间，回收率在47%～86%之间，工艺简便高效，设备投资低，适合工业化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及。
技术介绍
牛奶分离出酪蛋白制备奶酪后，剩余溶液即为乳清液。乳清液作为副产物，其水含量高，运输不便，经常通过喷雾干燥等方法制成乳清粉。乳清粉中的主要成分为乳糖和乳清蛋白。乳清蛋白中主要有乳球蛋白(β-Lg)、α-乳白蛋白(α-La)、牛血清白蛋白(BSA)、免疫球蛋白(IgG)，以及乳铁蛋白(Lf)、乳过氧化酶、生长因子和许多生物活性因子及酶，这些物质均具有一定的生物活性，尤其是乳铁蛋白因其特有的功能备受关注。乳铁蛋白等电点为8. O,分子质量8 O kDa，在乳清中含量约为O. 5 g/L。乳铁蛋白 具有抗菌、抗病毒、免疫调节等多种生物活性功能。中国专利CN 1486989 A公开了一种从牛初乳中分离纯化乳铁蛋白的方法，首先对牛初乳进行脱脂处理，并除去酪蛋白和球蛋白，将清液透析6小时后，采用肝素-琼脂糖树脂进行亲和层析，提纯乳铁蛋白。中国专利CN 101362792 A中也是采用亲和层析分离乳铁蛋白。由于亲和层析介质成本较高以及洗脱比较困难，不太适宜工业化大规模应用。中国专利CN 101724013 A和美国专利US 5，149，647均利用阳离子交换树脂提纯乳铁本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用扩张床吸附技术从乳清中提纯乳铁蛋白的方法，其特征在于包括以下步骤：1）甜乳清粉加水溶解制成质量百分比浓度为20～80？g/L的乳清溶液或采用市售液态乳清液,用NaOH调节pH至7.0？～8.0；2）扩张床内装填阳离子交换层析介质，阳离子交换介质为Streamline？SP，Streamline？SP？XL或Fastline？SP；用pH7.0？～8.0的磷酸盐缓冲液从下向上通过床层，平衡扩张床，床层稳定膨胀时，膨胀率介于1.8～2.6；3）通入步骤1）的溶液进行吸附，然后通入步骤2）所用的缓冲液冲洗直至没有蛋白洗出，再用含0.1～1？M？NaCl的pH7.0～10.0的磷酸盐缓冲液或者碳...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：姚善泾，杜巧燕，林东强，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：