一种从鸡蛋清中提取卵转铁蛋白的方法技术

本发明专利技术公开了一种从鸡蛋清中提取卵转铁蛋白的方法，是将蛋清稀释液与铁饱和后，采用乙醇沉淀与QSepharoseFF阴离子交换层析相结合实现的。本发明专利技术通过对鸡蛋清中卵转铁蛋白进行铁饱和，提高了卵转铁蛋白的稳定性，使其能够在一定浓度的乙醇溶液中保持天然结构，从而可用乙醇提取。本方法工艺流程简单，提取周期短，得到的卵转铁蛋白产品纯度高，回收率好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及蛋白质的提取方法，具体涉及。
技术介绍
鸡蛋清中的卵转铁蛋白和哺乳动物母乳中的乳铁蛋白类似，在生物体内发挥着提高免疫功能、抵御细菌和病毒感染，维持机体正常生长发育的重要作用。尤其与铁离子的高度亲和性，使其在生物体内担当转运铁的重要任务，对哺乳动物铁吸收起至关重要的作用。目前已有多种方法分离制备卵转铁蛋白，但均存在一些缺点。早期主要采用盐析法或有机溶剂沉淀法，获得的卵转铁蛋白纯度不高，且经过高盐和有机溶剂处理后，蛋白的天然结构和活性已遭到破坏。目前，主要采用液相层析法获得卵转铁蛋白，但是目前的层析 法产品纯度和得率不高，而且一般需采用离子交换层析与凝胶过滤层析或亲和层析相结合的方法，多步层析法在各步层析之间往往需要更换缓冲液或对溶液进行浓缩，操作复杂，提取工艺耗时漫长，可达3飞天，此外，凝胶过滤层析处理量很小，而亲和层析填料成本昂贵，这些问题严重制约着卵转铁蛋白的提取。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供，本专利技术针对现有技术中存在的不足，采用乙醇沉淀法与Q Sepharose FF阴离子交换层析相结合的技术方案，并确定了合适的工艺参数，克服了现有技术中操作复杂、处理量本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从鸡蛋清中提取卵转铁蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）蛋清预处理：向蛋清稀释液中，加入NaHCO3和NaCl，使浓度分别为10~50mmol/L和20~100mmol/L，然后加入浓度为0.01mol/L、体积为蛋清稀释液2%的FeCl3溶液，充分搅拌，得到饱和铁的蛋清稀释液；（2）提取卵转铁蛋白：向饱和铁的蛋清稀释液中加入乙醇，使乙醇的体积浓度达到35？45%，离心分离上清液，冻干，得卵转铁蛋白粗品；（3）分离纯化：将卵转铁蛋白粗品溶解于pH为8？8.5的Tris？HCl缓冲液中，用Q？Sepharose？FF色谱柱分离，用含有0、0.06~0.12、0.25~0.5和2？mo...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：马美湖，任国栋，耿放，袁小军，邱宁，单媛媛，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：