本发明专利技术涉及靶向半胱氨酸-白三烯受体CysLT1的药物在制备用于预防或治疗自身免疫性疾病的药物中的用途。经研究发现，与健康野生型小鼠相比，在EAE小鼠中，CysLT1在免疫组织及脊髓中表达上调，在血和脑脊液中，半胱氨酸-白三烯水平明显增加。CysLT1的两个拮抗剂，扎鲁司特和孟鲁司特，给药EAE小鼠后，EAE小鼠发病时间推迟，发病症状减轻，发病率降低，CNS炎症细胞浸润减少。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药领域，具体而言，涉及靶向半胱氨酸-白三烯受体CysLTl的药物在制备用于预防或治疗自身免疫性疾病的药物中的用途。
技术介绍
多发性硬化(Multiple sclerosis, MS)是人类常见的中枢神经系统(CentralNervous System, CNS)自身免疫性炎症，病理表现为免疫炎症致中枢神经系统脱髓鞘及神经退行性病变。实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental AutoimmuneEncephalomyelitis, EAE)是⑶4+T细胞介导的脱髓鞘疾病，病理特征与MS相似，是研究 MS的发病机理、治疗和预防的理想动物模型(1-2)。完全弗氏佐剂与髓磷蛋白、蛋白脂质蛋白(Proteolipid Protein)和髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(Myelin OligodendrocyteGlycoprotein, M0G)乳化后免疫相关易感鼠，或将自激活T细胞继承转移至正常受体鼠即可诱导产生EAE (5-8)。在EAE动物模型中，血脑屏障的完整性受到破坏，外周⑶4+T细胞浸润进CNS，导致巨噬细胞和树突状细胞在CNS的浸润和聚集，激活小胶质细胞，最终导致神经脱髓鞘，轴突受损，影响神经冲动传递并可致瘫痪(3-5)。目前引起EAE和MS发病的介质并不是很清楚。白三烯(Ieukotrienes)作为一重要的炎症介质，与多种炎症疾病(如哮喘、过敏性鼻炎及心血管疾病、炎性肠病等)有关(6-10)。在各种致病因子刺激作用下，磷酸甘油被磷酸酯酶A2 (Phospholipase A2,PLA2)水解生成游离的花生四烯酸(Arachidonic Acid)。花生四烯酸由5-脂氧合酶(5-lipoxygenase, 5-L0)催化生成白三烯A4 (LeukotrieneA4, LTA4)并由 LTA4 水解酶(leukotriene A4 hydrolase, LTA4H)水解生成白三烯B4 (Leukotriene B4, LTB4),或在白三烯 C4 合成酶(Leukotriene C4 synthase, LTC4S)催化下，生成半胱氨酸-白三烯C4(Leukotriene C4, LTC4)并直至生成半胱氨酸-白三烯D4(Leukotriene D4, LTD4)及半胱氨酸-白三烯 E4 (Leukotriene E4, LTE4) (11)。LTB4 的生物活性是通过两个G蛋白偶联受体(GPCR)白三烯B4受体I和2 (Leukotriene B4receptorI 和 2,BLT1 和 BLT2) (12)来实现的;半胱氨酸 _ 白三烯(Cysteinyl leukotriene, CysLTs)也是通过两个GPCR，即半胱氨酸-白三烯受体I和2 (CysLTl和CysLT2)来介导生物活性的(13)。白三烯信号通路的调节剂包括5-L0抑制剂(例如，齐留通(zileuton))和CysLTl拮抗剂(例如，孟鲁司特(montelukast)、扎鲁司特(zafirlukast)和普仑司特(pranlukast))，其位列3类最广泛用于治疗哮喘药物之中，并为唯一的口服药(14-17)。微阵列分析显示，作为合成白三烯的关键酶，5-L0在MS病灶部位及EAE动物的CNS中是表达上调的(18)。Zileuton抑制5-L0后，EAE发病推迟，严重程度减轻(19)。一些研究也显示基因或药物阻断BLTl信号能抑制炎症细胞被招募入CNS从而抑制EAE的诱导(12，20)。但半胱氨酸-白三烯和他们的受体是否参与EAE的发病从未见报道。
技术实现思路
针对现有技术中的不足，专利技术人致力于研究EAE发病的介质和机理，半胱氨酸-白三烯及其受体在EAE发病中的作用，以及半胱氨酸-白三烯受体能否作为自身免疫病的治疗靶点，并且完成了本专利技术。在本专利技术的研究中，专利技术人发现在EAE动物模型中，白三烯合成关键酶5-L0及半胱氨酸-白三烯受体CysLTl表达水平明显上调，半胱氨酸-白三烯水平也升高。孟鲁司特和扎鲁司特阻断CysLTl后能减少CNS的炎症细胞浸润，减轻EAE的临床症状。本专利技术的研究表明，半胱氨酸-白三烯及其受体在EAE发病中扮演了重要角色，主要通过增加MOG特异性T细胞的白介素- 17a(IL-17a)的分泌，调节血脑屏障的通透性及诱导致敏T细胞的趋化，引起EAE发病。同时，炎症细胞的过度激活及对组织的浸润是许多自身免疫病(包括多发性硬化、类风湿关节炎、红斑狼疮、炎症性肠病等)的共同特征。因此，本专利技术的一个目的是提供靶向半胱氨酸-白三烯受体CysLTl的药物在制备用于预防或治疗自身免疫性疾病的药物中的用途。本专利技术中，优选地，所述靶向半胱氨酸-白三烯受体CysLTl的药物包括CysLTl拮抗剂，更优选地，所述CysLTl拮抗剂包括孟鲁司特(montelukast)、扎鲁司特(zafirIukast)和普仑司特(pranlukast)。本专利技术中，优选地，所述自身免疫性疾病包括多发性硬化、类风湿关节炎、红斑狼疮、炎症性肠病(inflammatory bowel disease)。经研究发现，在EAE小鼠中，CysLTl在免疫组织及脊髓中表达上调，在血和脑脊液中，CysLTs水平明显增加。CysLTl的两个拮抗剂(扎鲁司特和孟鲁司特)给药EAE小鼠后，EAE小鼠发病时间推迟，发病症状减轻，发病率降低，CNS炎症细胞浸润减少。近一步研究发现，CysLTl信号并不影响致敏T细胞的分化，很可能是通过增加MOG特异性T细胞分泌IL-17a，血脑屏障的通透性和诱导T细胞的趋化导致EAE的发病，而给予CysLTl拮抗剂后，可以阻断T细胞的趋化及降低血脑屏障的通透性。也就是说，抗哮喘的CysLTl拮抗剂可以用于临床治疗多发性硬化等疾病，本专利技术不仅揭示了 MS发病的部分机制，同时也为疾病的临床干预提供了新的治疗靶点。附图说明图I为显示EAE发病过程中CysLT受体及合成酶的基因表达变化的图。分别提取免疫后第5天、第9天、第12天、第15天、第18天、第21天EAE小鼠及对照小鼠的脾、淋巴结、脑及脊髓的mRNA，采用实时定量PCR分析基因表达。将同一组织样品中特定基因表达与β _actin(P -肌动蛋白)表达的比值再与对照相比。其中，A-D:在脾(A),淋巴结(B),脑(C)和脊髓(D)中CysLTl和CysLT2基因表达变化;E_H :在脾(E)，淋巴结(F)，脑(G)和脊髓(H)中5-L0、LTA4H和LTC4S基因表达变化；1 :竞争性酶免疫法检测脑、脊髓、血清、脑脊液中CysLTs浓度(免疫后第10天)。数据表示为mean土SEM(每组有6只小鼠)，结果为两次独立实验中一次代表性数据，与对照比较Zp < O. 05广P < O. 01和< O. 001，(SttudentJ s t-test)。图2为显示CysLTl受体拮抗剂减轻EAE的病情的图。M0G35_55免疫雌性C57/B6小鼠诱导EAE，从免疫后第3天(A和B)、第10天(C)或第14天(D)起每天一次腹腔给药(孟鲁司特(10mg/kg)、孟鲁司特(30mg/kg)、扎鲁司特(30mg/kg))至实验结束,记录临床评分，对照给予本文档来自技高网...
【技术保护点】
靶向半胱氨酸？白三烯受体CysLT1的药物在制备用于预防或治疗自身免疫性疾病的药物中的用途。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：谢欣，杜昌升，王烈峰，吕婕，魏巍，
申请(专利权)人：中国科学院上海药物研究所，
类型：发明
国别省市：
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