诱导保护性抗HIV-1抗体的产生的方法技术

本发明专利技术大体上涉及用于HIV接种疫苗的免疫原，更具体地涉及通过使用HIV包膜和非HIV免疫原的组合物靶向B细胞生殖系和克隆中间体来诱导预防性抗HIV抗体的产生的方法。本发明专利技术还涉及适合用于这样的方法中的组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术大体上涉及用于HIV-I接种疫苗的免疫原，具体地涉及通过使用非HIV-I免疫原和HIV-I免疫原的组合来靶向B细胞生殖系和克隆中间体以诱导保护性抗HIV-I抗体的产生的方法。本专利技术还涉及适用于这种方法的组合物。
技术介绍
对传输/首建(transmitted/founder)HIV-I包膜的初次抗体应答是非中和的,其革巴向Env gp41,并发生在血衆病毒血症出现后的平均13天(Tomaras等人，J. Virology 82:12449-63(2008))。虽然与初次抗体应答同时发生的对HIV-I的初次T细胞应答驱动了在HIV-I的T细胞表位内的突变，但是对HIV-I的初次gp41抗体应答则不是这样。相反，它是自体同源的中和抗体应答，其被延迟到传输之后的大约3个月，这是与抗体逃避突变体有关的初次中和抗体应答(McMichael 等人，Nature Rev. Tmmunol. 10 :11-23 (2010))。结合至罕见的广泛反应性中和抗体的HIV-I包膜上的四个表位是⑶4连接位点(CD4BS) (mab (单克隆抗体)IgGlbl2) (Zwick 等人，J. Virol. 77 (10) :5863-5876 (2003))、由Amab 2F5和4E10定义的近膜端外部区(MPER)表位(Armbruster等人，J. Antimicrob.Chemother. 54 :915-920(2004) ；Stiegler 和 Katinger, J.Antimicrob. Chemother. 51 757-759(2003) ；Zwick 等人，Journal of Virology 79:1252-1261(2005) ；Purtscher等人，AIDS 10 :587(1996)),以及由人mab 2G12定义的甘露聚糖表位(Scanlan等人，Adv. Exper. Med. Biol. 535 :205-218 (2003))。这四个罕见的人mab都是与众不同的两个是IgG3 (2F5和4E10)，一个具有独特的Ig 二聚体结构(2G12)，一个具有非常疏水的CDR3 (2F5) (Ofek 等人，J. Virol. 198 :10724 (2004))，并且在这四个中，CDR3 非常长(Burton等人，Nature Immunol. 5 (3) :233-236(2004) ;Kunert 等人，AIDS Res. Hum. Retroviruses20(7) :755-762(2004) ；Zwick 等人，J. Virol. 78(6) :3155-3161(2004) ；Cardoso 等人，Immunity 22 :163-172 (2005))。其中，2F5和4E10样人mab是非常罕见的。急性HIV-1患者不会对MPER或2G12表位产生抗体，MPER可定义为HIV包膜的氨基酸652-683 (Cardoso等人，Immunity 22 163-173 (2005))(例如见 QQEKNEQELLELDKWASLWNWFDITNWLWYIK)。CD4 结合位点(BS)抗体一般在HIV-I感染的早期形成，但是这些抗体通常不具有由mab IgGlbl2显不的广谱中和(Burton 等人，Nat. Immunol. 5(3) :233-236 (2004))。为了理解对HIV-I包膜(Env)的无效初次抗体应答的致病机理，已实施PCR来扩增源于单血细胞或骨髓浆细胞的重链和轻链(V1^PVJ基因的免疫球蛋白可变区，所述细胞取自HIV-I传输之后17-30天的5个急性感染的主体。已经测定由HIV-I感染所诱导的浆细胞应答的特异性。已经使用由所传输的HIV-I诱导的单人浆细胞的Vh和\基因的PCR扩增来对HIV-I的初始浆细胞/浆母细胞应答进行了研究。已经发现，对HIV-I的初次抗体应答被诱导至HIV-I Env gp41，而该gp41在已预先存在的记忆B细胞克隆中诱导抗体应答，产生与众多宿主和细菌分子、尤其是人类肠道菌群交叉反应的低亲和性、多反应性的抗Env抗体。本专利技术至少部分地源于针对鉴定初次抗HIV-I Env gp41抗体和罕见的广泛中和抗体的来源而设计的研究。本专利技术还源于在大多数温血脊椎动物中表达的细胞蛋白的鉴定，所述细胞蛋白在结构上与HIV-I gp41 MPER的表位2F5相似，也可能与4E10相似。本专利技术提供了一种HIV-I疫苗，其设计用来靶向可被驱使产生针对HIV-I的广泛中和抗体的初始B细胞池
技术实现思路
·本专利技术大体上涉及用于HIV-I接种疫苗的免疫原。本专利技术更具体地涉及通过使用非HIV-I免疫原和HIV-I免疫原的组合来靶向B细胞生殖系和克隆中间体以诱导保护性抗HIV-I抗体的产生的方法。本专利技术还涉及适用于这种方法的组合物。从以下的说明中可以清楚本专利技术的目的和优点。附图说明图I :针对Hl所罗门群岛血凝素的典型流行性感冒抗体克隆；图2 :在HIV-I传输 20天后患者684_6中的浆细胞抗体谱系；图3 :所推断的中间体克隆抗体的产生；图4 :检测所推断的生殖系和克隆成员中间体与支系B gp41、自体同源的gpl40和M组共有序列gpl40的反应性，以便测定在克隆发展中在何处获得与gp41的反应。图5 :在第二中间体前体抗体处获得的克隆684-6B的反应性(也见于图4)；图6:以mg的量生产并用于分析与gp41结合的抗体的解离常数(Kd)的其他所推断的中间体抗体克隆；图7 :在患者684-6克隆684-6B生殖系和所推断的中间体抗体中的gp41反应性的获得；图8 6846克隆52生殖系和所推断的中间体gp41抗体的多反应性；图9 :需氧肠道菌群与克隆684-6B抗体的反应性；图IOA和IOB :肠道提取物相对Mojo抗体的蓝色非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(BN-PAGE)和蛋白质印迹的图；图IOA是考马斯蓝图，图IOB是蛋白质印迹图；图11 :肠道提取物相对Mojo抗体一非还原性相对HV00276的蛋白质印迹图；图12 :肠道提取物相对Mojo抗体一还原性对HV00276的蛋白质印迹图；图13A和13B : Ib12生殖系抗体结合至脂质(PC: CL脂质体)；图13A为结合至HIV89. 6 gpl20，图13B为结合至脂质(PC:心磷脂);图14 :表达4E10 Vh的B细胞的一大片段在4E10 Vh敲入小鼠的骨髓中在前B至未成熟B细胞阶段中缺失；图15 :诱导广泛中和抗体的两个障碍。第一个障碍是，目前设计用于刺激可产生罕见的广泛中和抗体的B细胞的疫苗不与需要对免疫原应答的初始B细胞的生殖系B细胞受体反应。虽然对HIV-I Env的初次B细胞应答发生在感染后的初期，但是存在gp41与宿主或预先存在的外来分子之间的交叉反应性，使得产生初次gp41抗体应答的B细胞抗体克隆由预先存在的多反应性天然B细胞克隆衍生而来，所述多反应性天然B细胞克隆的生殖系也不与gp41反应，而其与gP41的反应性之后在克隆抗体发展中获得，这是因为与gp41的交叉反应性通过宿主或外来抗原驱动的克隆扩增来获得。一旦获得gp41反应性，gp41就驱使克隆扩增。对疫苗发展的第二本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：巴顿·F·海恩斯，H·X·廖，乔治娅·托马瑞斯，托马斯·B·开普勒，K·K·黄，S·穆内尔·阿拉姆，Y·刘，T·麦特·霍尔，G·杨，加内特·凯尔索，马蒂亚·邦西尼奥里，
申请(专利权)人：杜克大学，
类型：
国别省市：