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一种毛细管电泳检测蛋白多肽相互作用的方法技术

技术编号:8240925 阅读:320 留言:0更新日期:2013-01-24 21:18
本发明专利技术涉及一种毛细管电泳检测蛋白多肽相互作用的方法,属于生物分析领域。首先将DQ2与凝血酶混合,切除DQ2上的αI多肽(LQPFPQPELPY)。将外源多肽荧光标记后与DQ2混合,然后进行毛细管电泳检测,同时检测蛋白多肽复合物和荧光多肽的出峰时间及荧光强度。该方法还可以同时检测两种外源多肽与蛋白相互作用的竞争过程。实验证明,该方法操作简单,检测灵敏度高,所需时间短。该方法是对传统蛋白多肽相互作用检测技术进行改进,结合多波长荧光检测灵敏度高等优点,建立的一种新的高灵敏蛋白多肽相互作用检测技术。?

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物分析领域,特别涉及。
技术介绍
主要组织相容性复合体蛋白(MHC)由主要组织相容性复合体编码,广泛存在于脊椎动物细胞表面的一个糖蛋白分子大家族。MHC表面有一沟,可与外来抗原的肽链结合,将其提呈给T细胞引起免疫反应。因此研究MHC与蛋白的相互作用对于研究一些疾病的致病机制非常重要。人类白细胞抗原DQ2蛋白(DQ2)是MHC很重要的一种蛋白。生物分析技术在揭示MHC蛋白和多肽的相互作用中起到了至关重要的作用。目 前研究MHC蛋白与多肽相互作用的方法主要有高效凝胶过滤色谱法(HPSEC) (B. J.McFarland, J. F. Katz, A. J. Sant, et al. J. Mol. Biol. 2005, 350, 170-183),突光偏振法(S. L. De Wall, C. Painter, J. D. Stone, et al. Nat. Chem. Biol. 2006,2,197-201),核磁共振法(L. Schmitt, J. J. Boniface, Μ. M. Davis, et al. J. Mol.Biol. 1999,286,本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种毛细管电泳检测蛋白多肽相互作用的方法,其特征在于包括以下步骤:先将DQ2与凝血酶混合,切除DQ2上的αI多肽;再与经荧光标记的外源多肽混合得混合物,然后对混合物进行毛细管电泳荧光检测,同时检测混合物中DQ2?多肽复合物和外源多肽的出峰时间及荧光强度,得出DQ2与外源多肽结合的曲线。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:王建浩邱琳蒋鹏举王车礼夏江
申请(专利权)人:常州大学
类型:发明
国别省市:

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