甘蔗中性/碱性转化酶基因及其编码的蛋白质序列制造技术

本发明专利技术公开了一种甘蔗中性/碱性转化酶基因及其编码的蛋白质序列，是在对所有植物中性/碱性转化酶基因全长序列进行进化分析的基础上，以同一家族的中性/碱性转化酶基因序列的保守区设计引物，从甘蔗幼嫩叶片提取总RNA，并经反转录，用常规PCR法扩增，结合RACE技术克隆到中性/碱性转化酶基因的全长cDNA序列，经VectorNTI软件分析，得到序列的ORF为1812bp，编码603个氨基酸。本发明专利技术不仅为研究中性/碱性转化酶的转录和表达机制，进一步探讨蔗糖的积累机理奠定基础，而且通过氨基酸序列可以获得具有生物活性的纯化蛋白，为研究中性/碱性转化酶的生物学功能提供基础。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程
，涉及一种甘蔗中性/碱性转化酶基因及其编码的蛋白质序列。
技术介绍
高等植物组织中存在着多种转化酶的同工酶形式。根据最适pH可以分为两大类酸性转化酶和中性/碱性转化酶。中性/碱性转化酶(Alkaline/Neutral Invertase)是一种胞质酶，最适PH值在7. 0-8. O左右。该酶只以蔗糖为底物，能不可逆的把蔗糖分解为葡萄糖和果糖，用于能量代谢。在酸性转化酶和蔗糖合酶活性较低的植物组织中，中性/碱性转化酶能分解蔗糖，为三羧酸循环提供底物，因此它也被视为“维持酶”。目前，已经在小麦、玉米、水稻、木薯、小果等植物中克隆得到该类酶的基因。由于其特殊的PH活性条件，酶活性极不稳定，在提取过程中容易丧失活力，导致纯化该类酶难度很大。己经纯化出来的中性或碱性转化酶主要以两种形式存在八聚体和四聚体。中性或碱性转化酶N-端无信号肽、无糖基化，C-端富含半胱氨酸，且与酸性转化酶的同源性很低。研究发现重金属离子对中性/碱性转化酶没有抑制作用，而对酸性转化酶有抑制作用。因此，认为中性/碱性转化酶与酸性转化酶之间催化位点有明显差异。研究发现，在胡萝卜不同发育期的各本文档来自技高网...

【技术保护点】
甘蔗中性/碱性转化酶基因及其编码的蛋白质序列，其特征在于：具有序列表中SEQIDNO.1所示的DNA序列，且它的编码区从第287位核苷酸到2098位核苷酸，编码603个氨基酸残基组成的多肽。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王爱勤，牛俊奇，何龙飞，杨丽涛，李杨瑞，
申请(专利权)人：广西大学，
类型：发明
国别省市：