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一种百合ANS基因及其克隆方法技术

技术编号:8188121 阅读:443 留言:0更新日期:2013-01-09 23:48
一种百合ANS基因克隆方法,提取以及纯化百合花瓣RNA,合成cDNA第一链,应用一对引物通过聚合酶链式反应对百合cDNA第一链进行扩增,应用3′RACE引物对聚合酶链式反应产物进行3′RACE克隆,应用5′RACE引物对聚合酶链式反应产物进行5′RACE克隆,用Seqman软件将所得到的保守序列、3’端序列和5’端序列进行拼接,得到A基因的cDNA全长序列,共1356个碱基,PCR扩增反应后进行切胶回收、连接转化、蓝白斑筛选、菌落PCR。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及ー种基因及其克隆方法,尤其是百合ANS基因及其克隆方法
技术介绍
花色是花卉最重要的性状之一,它主要由类黄酮、类胡萝卜素、生物碱三大类色素决定。类黄酮是大多数花色形成的决定性色素群,它存在于花瓣表皮细胞液中,其中花青素属红色系,其他均属黄色系;类胡萝卜素主要呈现黄色、橙色或红色,它广泛存在于植物的花、叶、果皮和根等部位;生物碱则參与花瓣黄色、橙色及红色的形成。这三大类色素的合成都有众多的结构基因及调控基因參与,包含了多个代谢步骤,作用机理较复杂。传统的花色育种费时费力,而且有很大的局限,研究花色基因,对于通过分子育种手段来人工修饰改变花卉顔色具有非常重要的意义,如可通过直接导入外源结构基因或调节基因、利用反义技术和共抑制原理等等方法来达到改变花色的目的。另外,由于花色直观可见,因此它也是研究基因表达调控和基因互作的热点和基础方向。目前对属于类黄酮的花青素的合成代谢和參与其中的基因研究得较为深入,而对类胡萝卜素等其它色素的研究相对较少。花青素最常见的是矢车菊色素(cyanidin)、飞燕草色素(delphinidin)和天竺葵色素(pelargonidin),它们主本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种百合ANS基因,其核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:张克中崔金腾王瑜张睿鹂
申请(专利权)人:北京农学院
类型:发明
国别省市:

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