方法技术

在一个方面，本文提供一种精制植物油的方法，所述方法包括使所述油与酶接触的步骤，所述酶能够水解叶绿素或叶绿素衍生物，其中所述酶在存在至少0.1重量％磷脂的情况下与所述油接触。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及对植物性食品和饲料产品、尤其是植物油的工业加工。本专利技术可用于减少或消除由叶绿素和叶绿素衍生物产生的污染。
技术介绍
叶绿素是在整个植物界广泛存在的一种绿色色素。叶绿素是光合作用所必需的，并且是地球上发现的最丰富的有机金属化合物之一。因而许多来自植物的产品(包括食物和饲料)含有相当多的叶绿素。例如，来自含油种子(例如大豆、棕榈种子或油菜籽(卡诺拉油菜)、棉籽)的植物 油和花生油通常含有一些叶绿素。然而，通常不期望植物油中存在高含量的叶绿素色素。这是因为叶绿素使油带上难看的绿色，并且在储存期间可引起油的氧化，从而导致油的变质。已采用各种以除去植物油中的叶绿素。在产油过程的多个阶段，包括种子破碎、油萃取、脱胶、碱处理和漂白步骤，都可除去叶绿素。然而，漂白步骤通常对于将叶绿素残留量降至可接受含量是最为有效的。在漂白期间，加热油并使其通过吸附剂以除去叶绿素和影响成品油外观和/或稳定性的其他有色化合物。用于漂白步骤的吸附剂通常为粘土。在可食用油加工行业中，采用上述步骤通常会将加工油中的叶绿素含量降至介于0.02至0.05 111之间。然而，漂白步骤由于漂白粘土的夹带作用会增加加工成本和降低油产量。粘土的使用可能会将许多有用的化合物(例如类胡萝卜素和生育酚)也从油中除去。另外粘土的使用也很昂贵，这尤其是因为用过的粘土(即废料)的处理困难、危险(易于自燃)，因而处理成本高。因而已进行了用其他办法从油中除去叶绿素的尝试，例如使用叶绿素酶。在植物中，叶绿素酶(chlorophyllase或chlase)被认为参与叶绿素降解，并催化叶绿素中酯键的水解而生成脱植基叶绿素和叶绿醇。W02006009676描述了可降低组合物中叶绿素污染的一种工业，例如用叶绿素酶处理植物油。此中产生的水溶性脱植基叶绿素也是绿色，但是可通过水萃取法或二氧化硅处理除去。叶绿素通常在用于产油的种子中以及从种子提取油的过程中部分降解。一种常见的修饰为卟啉(二氢卟酚)环失去镁离子形成称为脱镁叶绿素的衍生物(参见图I)。卟啉环上高极性镁离子的丢失导致脱镁叶绿素与叶绿素相比在理化性质上显著不同。通常在加工过程中，油中的脱镁叶绿素比叶绿素含量更丰富。脱镁叶绿素呈淡绿色，可通过与用于叶绿素类似的从油中除去，例如WO 2006009676中所述通过由具有脱镁叶绿素酶活性的酶催化的酯酶反应。在某些条件下，一些叶绿素酶能够水解脱镁叶绿素以及叶绿素，因此适于除去这两种污染物。脱镁叶绿素水解的产物为红色/褐色的脱镁叶绿酸和叶绿醇。脱镁叶绿酸也可由脱植基叶绿素(即叶绿素水解之后)失去镁离子生成(参见图I)。WO2006009676教导了通过与脱植基叶绿素类似的(例如通过水萃取法或二氧化硅吸附)除去脱镁叶绿酸。脱镁叶绿素还可通过含油种子收获和储存期间植物酶的活性或者通过精制油期间的加工条件(即热)进一步降解为焦脱镁叶绿素(参见“Behaviour of ChlorophyllDerivatives in Canola Oil Processing，，，JAOCS, Vol, no. 9 (Sept. 1993) pages837-841 ( “卡诺拉油加工过程中叶绿素衍生物的行为”，《美国油脂化学协会杂志》，第9卷，1993年9月，第837-841页))。一种可能的机制是脱镁叶绿素碳环上甲酯键的酶水解，然后不稳定中间体向焦脱镁叶绿素的非酶转化。据报道来自藜(Chenopodium album)的名为脱镁叶绿酸酶的28-29kDa酶能够催化脱镁叶绿酸上类似的反应，以产生不含叶绿醇的焦脱镁叶绿素衍生物，称为焦脱镁叶绿酸(参见图26)。焦脱镁叶绿酸比脱镁叶绿酸极性低，导致焦脱镁叶绿酸与脱镁叶绿酸相比具有降低了的水溶解度和增加了的油溶解度。根椐加工条件，在加工期间植物油中焦脱镁叶绿素可比脱镁叶绿素和叶绿素含量更为丰富(参见 Table 9in volume 2· 2. ofBailey’ s Industrial Oil and FatProducts (2005), 6th edition,Ed. by Fereidoon Shahidi, John Wiley&Sons (由 Fereidoon Shahidi编辑、约翰威立父子出版公司于2005年出版的《贝雷工业油脂产品》，第6版，第2.2.卷的表9))。这部分地是由于在植物材料的收获和储存期间叶绿素中镁的丢失。如果使用90°C或更高温度下的延长热处理，油中焦脱镁叶绿素的量可能会增加并且可高于脱镁叶绿素的量。也可通过在压榨和萃取之前加热含油种子以及精制过程中油脱胶和碱处理降低叶绿素含量。还观察到油中的磷脂可与镁络合，从而降低叶绿素的量。因而在许多植物油中与焦脱镁叶绿素(和脱镁叶绿素)相比，叶绿素为相对微量的污染物。因此仍然需要改进以从植物油中除去叶绿素和叶绿素衍生物(诸如脱镁叶绿素和焦脱镁叶绿素)。尤其需要一种可提高除去叶绿素和叶绿素衍生物的效率同时降低油中其他所需化合物的损失的。
技术实现思路
在一个方面，本专利技术提供了一种精制植物油的，该包括使油与能够水解叶绿素或叶绿素衍生物的酶相接触的步骤，其中酶在存在至少O. I重量％磷脂的情况下与油接触。在一些实施例中，按油的总重量计，在存在低于O. 2重量％溶血磷脂(例如低于O.15重量％、低于O. I重量％或低于O. 05重量％ )的情况下，使酶与油接触。在一个实施例中，酶在油脱胶之前与油接触。在另一个实施例中，酶在油脱胶的步骤期间与油接触。脱胶步骤可包括，例如水化脱胶、酸法脱胶、酶法脱胶和/或全脱胶/中和(例如向油中加酸，然后用碱中和)。在一些特定的实施例中，对于酶在脱胶前与油接触的情况，酶法脱胶步骤可包括使油与磷脂酶(例如磷脂酶Al、磷脂酶A2或磷脂酶C)或酰基转移酶接触。酰基转移酶可包含，例如SEQ ID NO 23的氨基酸序列或与其具有至少80%序列同一性的序列。在另一个实施例中，该包括使油与该酶和在单个步骤中不产生溶血磷脂的磷脂酶(例如磷脂酶C)接触。例如，该酶可在使用磷脂酶C的酶法脱胶步骤期间与油接触，即同时使用该酶和磷脂酶C。在另一些实施例中，该酶在存在至少O. 5重量％、至少I重量％、至少I. 5重量％或至少2重量％磷脂的情况下与油接触。在另一些实施例中，该酶在低于80°C、优选地低于70°C、优选地55°C至65°C、优选地58°C至62°C (例如约60°C )的温度下与油接触。优选地，该酶在存在I至5重量％水(例如约1%或约2重量％水)的情况下与油接触。在一个实施例中，该酶在pH为6. O至6.8(例如6. 3至6. 5)时与油接触。优选地，该不包括粘土处理步骤。该优选地还包括进行脱臭步骤以产生脱臭油和馏出液(例如含水馏出液或含氮馏出液)。通常，该与包括粘土处理步骤的相比在精制(脱臭或非脱臭)油和/或馏出夜中产生的类胡萝卜素和/或生育酚水平提闻。 在一个实施例中，该酶包括叶绿素酶、脱镁叶绿素酶、焦脱镁叶绿素酶或脱镁叶绿素脱镁叶绿酸水解酶。例如，该酶可包含SEQ ID NO :1、2、4、6或8至15的任何之一中所定义的多肽序列，或其功能片段或变体。优选地，该酶包含与SEQ ID N0:l、2、4、6或8至15的任何之一在例如至少50本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2010.03.12 EP 10156412.8;2010.03.12 US 61/3131941.精制植物油的方法，所述方法包括使所述油接触酶的步骤，所述酶能够水解叶绿素或叶绿素衍生物，其中所述酶在存在至少O. I重量％磷脂的情况下与所述油接触。2.根据权利要求I所述的方法，其中所述酶在存在少于O.2重量％溶血磷脂的情况下与所述油接触。3.根据权利要求I或权利要求2所述的方法，其中所述酶在所述油脱胶步骤之前或期间与所述油接触。4.根据权利要求3所述的方法，其中所述方法包括(a)使所述酶与所述油接触，然后，(b)使用磷脂酶或酰基转移酶使所述油脱胶。5.根据权利要求3所述的方法，其中所述方法包括使所述油与所述酶和磷脂酶C在单个步骤中接触。6.根据前述任一项权利要求所述的方法，其中所述酶在存在至少I重量％磷脂的情况下与所述油接触。7.根据前述任一项权利要求所述的方法，其中所述酶在低于70°C的温度下与所述油接触。8.根据前述任一项权利要求所述的方法，其中所述酶在存在I至5重量％水的情况下与所述油接触。9.根据权利要求3至8中任一项所述的方法，其中所述脱胶步骤包括水化脱胶。10.根据权利要求3至9中任一项所述的方法，其中所述脱胶步骤包括向所述油中加入酸，然后用碱中和。11.根据前述任一项权利要求所述的方法，其中所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：R米科森，T乔根森，JB索伊，
申请(专利权)人：杜邦营养生物科学有限公司，
类型：
国别省市：