本发明专利技术提供分离的单克隆抗体，特别是人抗体，它与IP-10高亲和力地结合，抑制IP-10与其受体的结合，抑制IP-10诱导的钙流，并且抑制IP-10诱导的细胞迁移。也提供了编码本发明专利技术抗体的核酸分子，用于表达本发明专利技术抗体的表达载体、宿主细胞和方法。还提供了包含本发明专利技术抗体的免疫偶联物、双特异性分子和药物组合物。本发明专利技术还提供应用本发明专利技术的抗体抑制IP-10活性的方法，包括用于治疗各种炎症和自身免疫病的方法。
【技术实现步骤摘要】
IP-10抗体及其用途本申请是申请日2004年12月10日、申请号200480036843. I、专利技术名称为“IP-10抗体及其用途 ”的专利技术专利申请的分案申请。相关串请本申请要求2003年12月10日提交的美国临时专利申请60/529，180号的优先权。上述申请的全部内容在此引用作为参考。_4]
技术介绍
干扰素Y诱导蛋白IO(IP-IO)(也称为CXCL10)是一种IOkDa的趋化因子，最早是根据IP-10基因在干扰素Y (IFN-Y)处理的细胞中表达而鉴定的(Luster，A.D.等(1985)Nature 315 :672-676)。IP-10显示与具有趋化活性的蛋白质如血小板因子4和β-血小板球蛋白以及与具有有丝分裂原活性的蛋白质如结缔组织活化肽III具有同源性(Luster，A. D.等(1987) Proc. Natl. Acad. Sci. USA84 :2868-2871) 多种细胞，包括内皮细胞、单核细胞、成纤维细胞和角质形成细胞，响应IFN-Y分泌IP-10 (Luster，A. D.和Ravetch，J. V. (1987) J. Exp. Med. 166 :1084-1097)。也已经证明在人皮肤的迟发型超敏反应性(DTH)应答中，IP-10存在于真皮巨噬细胞和内皮细胞中(Kaplan, G.等(1987) J. Exp. Med. 166 1098-1108)。尽管最初是根据其被IFN-Y诱导而鉴定的，但是IP-10也可以被IFN-α诱导，例如在树突细胞中(Padovan, Ε.等(2002) J. Leukoc. Biol. 71 :669-676)。IP-10 表达也可以在中枢神经系统的细胞如星形胶质细胞和小胶质细胞中由刺激物如IFN-Y、病毒和脂多糖诱导(Vanguri, R.和 Farber, J. M. (1994) J. Immunol. 152 :1411-1418 ；Ren, L. Q.等(1998)Brain Res. Mol. Brain Res. 59 :256-263)。IP-10 的免疫生物学在 Neville，L. F 等(1997) Cytokine Growth Factor Rev. 8 :207-219 中综述。IP-10的受体已经确定为CXCR3，它是一种七跨膜的受体(Loetscher，M.等(1996)J Exp. Med. 184 =963-969)。CXCR3已经证明在活化的T淋巴细胞上表达，但是在静息T淋巴细胞上不表达，在B淋巴细胞、单核细胞或粒细胞上也不表达(Loetscher，M.等，同上)。已经显示，通过用TGF-β I刺激，NK细胞上的CXCR3表达增量调节(Inngjerdingen，Μ.等(2001)Blood97 :367-375)。也鉴定了 CXCR3 的另外两种配体MIG(Loetseher，Μ·等，同上)和 ITAC (Cole, K. E.等(1998) J. Exp. Med. 187 :2009-2021)。已经证明，IP-10与CXCR3的结合介导活化T细胞中的钙动员和趋化性(Loetscher，M.等，同上)。IP-10与活化NK细胞上的CXCR3结合也诱导趋化性和细胞内钙动员(Maghazachi，Α·Α·等(1997)FASEB J. 11 :765-774)。在胸腺内，ΙΡ-10是TCRa β+CD8+T细胞、TCRy δ+T细胞和NK型细胞的化学引诱物(Romagnani，P.等(2001)Blood 97:601-607)。ΙΡ-10或其受体CXCR3已经在多种不同的炎性和自身免疫性疾病中得到鉴定，这些疾病包括多发性硬化症(参见，例如，Sorensen, T. L.等(1999) J. Clin. Invest. 103 807-815)，类风湿性关节炎(参见，例如，Patel，D. D.等(2001)Clin. Immunol. 98 :39-45),溃瘍性结肠炎(参见，例如，Uguccioni, M.等(1999)Am. J. Pathol. 155 :331-336),肝炎(参见，例如，Narumi, S.等(1997) J. Immunol. 158 :5536-5544)，脊髓损伤(参见，例如，McTigue, D. Μ·等(1998) J. Neurosci. Res. 53 :368-376 ;Gonzalez 等 2003. Exp.Neurol. 184 :456-463),系统性红斑狼疮(参见，例如，Narumi, S.等(2000)Cytokine 12 1561-1565)，移植排斥(参见，例如，Zhang，Z.等(2002) J. Immunol. 168 :3205-3212)，舍格伦综合征(参见，例如，0gawa，N.等(2002)Arthritis Rheum. 46 :2730-2741)。因此，抑制该活性的治疗剂，特别是适合人用的治疗剂，是所需要的。专利技术概沭本专利技术提供与IP-10结合并且表现出许多所需性质的分离的单克隆抗体，特别是人单克隆抗体。这些性质包括与人IP-10高亲和力结合，以及与恒河猴IP-10的交叉反应性，但是缺乏与人MIG、人ITAC或小鼠IP- ο的实质交叉反应性。而且，该抗体抑制IP-10与其受体CXCR3的结合，抑制IP-10在受体表达细胞中诱导的钙流(calcium flux)，并且抑 制IP-10诱导的细胞迁移(趋化性)。而且，本专利技术的抗体显示在诊断为多发性硬化症的病人的脑切片中与ip- ο结合。在本专利技术优选的实施方案中，人IP- ο包含具有如SEQ ID NO :121所示氨基酸序列[Genbank登录号NP_001556]的多肽；CXCR3包含具有如SEQ ID NO :122所示氨基酸序列[Genbank登录号NP_001495]的多肽；恒河猴IP-10包含具有如SEQ ID NO :123所示氨基酸序列[Genbank登录号AAK95955]的多肽；小鼠IP-10包含具有如SEQ ID NO :124所示氨基酸序列[Genbank登录号NP_067249]的多肽；人MIG包含具有如SEQ ID NO :125所示氨基酸序列[Genbank登录号NP_002407]的多肽；和/或人ITAC包含具有如SEQ ID NO:126所示氨基酸序列[Genbank登录号NP_005400]的多肽。在一个实施方案中，本专利技术提供一种分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中该抗体与IP-10特异性结合，并且包含是选自下组的人Vh种系基因的产物或源自该基因的重链可变区人Vh 3-33基因、人Vh 3-30. 3基因、人Vh 5_51基因和AVh 4_61基因。在另一实施方案中，本专利技术提供一种分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中该抗体与ip- ο特异性结合，并且包含是选自下组的人Vk种系基因的产物或源自该基因的轻链可变区人Vk A27基因、人Vk L15基因、人Vk L6基因和人Vk L18基因。在另一实施方案中，本专利技术提供一种分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其中该抗体与ip- ο特异性结合，并且包含(a)选自下组的人系基本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其包含：(a)由氨基酸序列SEQ？ID？NO：5组成的重链可变区CDR1；(b)由氨基酸序列SEQ？ID？NO：17组成的重链可变区CDR2；(c)由氨基酸序列SEQ？ID？NO：28组成的重链可变区CDR3；(d)由氨基酸序列SEQ？ID？NO：55组成的轻链可变区CDR1；(e)由氨基酸序列SEQ？ID？NO：66组成的轻链可变区CDR2；和(f)由氨基酸序列SEQ？ID？NO：77组成的轻链可变区CDR3。
【技术特征摘要】
2003.12.10 US 60/529,1801.一种分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其包含 (a)由氨基酸序列SEQID NO 5组成的重链可变区⑶Rl ； (b)由氨基酸序列SEQID NO 17组成的重链可变区⑶R2 ； (c)由氨基酸序列SEQID NO 28组成的重链可变区⑶R3 ； (d)由氨基酸序列SEQID NO 55组成的轻链可变区⑶Rl ； (e)由氨基酸序列SEQID NO 66组成的轻链可变区⑶R2 ;和 (f)由氨基酸序列SEQID N0:77组成的轻链可变区⑶R3。2.一种分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其包含 (a)由SEQID NO :39的氨基酸序列组成的重链可变区；和 (b)由SEQID NO :88的氨基酸序列组成的轻链可变区。3.权利要求I或2的抗体或其抗原结合部分，其中所述抗体显示至少一种如下性质 (a)抑制IP-IO与CXCR3的结合； (b)抑制IP-10诱导的钙流； (c)抑制IP-10诱导的细胞迁移； (d)与恒河猴IP-10交叉反应； (e)不与小鼠IP-10交叉反应； (f)不与人MIG交叉反应； (g)不与人ITAC交叉反应。4.权利要求1-3任一项的抗体或其抗原结合部分，其中所述抗体为人抗体。5.前述权利要求中任一项的抗体或其抗...
【专利技术属性】
技术研发人员：施里坎特·德施潘德，黄海纯，莫汉·斯里尼瓦桑，约瑟芬·M·卡达雷尔利，王长玉，戴维·帕斯莫尔，范吉普拉姆·S·兰甘，托马斯·E·莱恩，汉斯·S·基尔斯特德，迈克尔·T·利厄，
申请(专利权)人：米德列斯公司，
类型：发明
国别省市：
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