皮肤康洗液在制备抑制HT-29细胞增殖药物中的应用制造技术

技术编号:8125551 阅读:137 留言:0更新日期:2012-12-26 18:39
本发明专利技术公开了皮肤康洗液在制备抑制HT-29细胞增殖药物中的应用,皮肤康洗液主要成分金银花、蒲公英、马齿苋、土茯苓、大黄、赤芍、蛇床子等药,具有清热解毒,凉血除湿,杀虫止痒,主治湿热阻于皮肤所致湿疮,见有瘙痒、红斑、丘疹、水泡、渗出、糜烂等或湿热下注所致阴痒、白带量多等症,急性湿疹或阴道炎见有上述证候者,现发现其能抑制HT-29细胞增殖。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种中成药的新用途,尤其涉及皮肤康洗液在制备抑制HT-29细胞增殖药物中的应用
技术介绍
结肠腺癌是结肠腺上皮来源的常见消化道恶性肿瘤,属于结肠癌多种病理类型中的一种,其病因尚未明确,但本病的发生与多脂肪少纤维的饮食有关,腺瘤状息肉、结肠血吸虫、非特异性溃疡性结肠炎、结肠腺癌细菌性痢疾、阿米巴肠病等亦与本病发生密切相关。约40%的结肠癌分布于直肠及直肠乙状结肠曲,其余分布于乙状结肠、盲肠、升结肠、降结肠、横结肠及肝、脾曲等处。结肠腺癌是结肠癌中类型最常见的一种,其余分类有粘液腺癌及未分化癌,大体形态可呈息肉状、溃疡型等。临床表现为结肠癌起病隐匿,早期仅见粪便隐血阳性,逐步为血便、痢疾样脓血便,里急后重,有时呈顽固性便秘,大便形状变细,或糊状大便,或腹泻与便秘交替,这些改变成为结肠癌的突出表现。病人常有不同程度的腹痛,常有糜烂、坏死和继发性感染,如发生在右侧则会产生右腹部钝痛,有时出现餐后腹痛。左侧结肠癌常并发肠梗阻,时有腹部绞痛,伴有腹胀、肠鸣音亢进等。腹部肿块多见于右腹部,是右侧结肠癌的表现之一,提示已到中晚期,肿块表面可有结节感,一般可以推动,但到肿瘤晚期时则固定,合并感染时可有压痛。结肠癌的患者可出现进行性贫血,低热,进行性消瘦,恶液质,肝肿大、浮肿、结肠腺癌黄疸和腹水等。化学治疗在结肠腺癌的治疗中占有重要地位,一般可于术后进行。手术后的病人化疗一般一年 一年半内可使用2 3个疗程,常用药物主要是5-氟脲嘧啶(5-FU),也可联合应用丝裂霉素、环磷酰胺等,5-FU每个疗程总量可用7 10克。可口服或静脉给药,最好加入葡萄糖液中滴注.每次250毫克,每日或隔日一次。结肠腺癌如果反应较大如恶心、食欲减退、无力、白细胞和血小板计数下降等,可减少每次用量,或加大间隔期。骨髓抑制明显时可及时停药。口服法胃肠道反应比静脉给药大,但骨髓抑制反应轻。用药期间必须注意支持治疗,并用减少副作用的药物。癌肿未能切除的病人行化疗,有一定减轻症状控制肿瘤生长的作用,但效果较差,维持时间短,如病人一般情况差时,副作用显着,反而加重病情,不宜应用。皮肤康洗液是北京华洋奎龙药业公司的独家产品,目前还没有其抑制结肠腺癌(HT-29)细胞增殖的文献报道。
技术实现思路
专利技术目的本专利技术的目的在于提供皮肤康洗液在制备抑制HT-29细胞增殖药物中的应用。技术方案皮肤康洗液在制备抑制HT-29细胞增殖药物中的应用。皮肤康洗液主要成分金银花、蒲公英、马齿苋、土茯苓、大黄、赤芍、蛇床子等药,每瓶装50ml,具有清热解毒,凉血除湿,杀虫止痒,主治湿热阻于皮肤所致湿疮,见有瘙痒、红斑、丘疹、水泡、渗出、糜烂等或湿热下注所致阴痒、白带量多等症,急性湿疹或阴道炎见有上述证候者,现发现其能抑制HT-29细胞增殖。有益效果皮肤康洗液抑制HT-29细胞增殖,效果良好。具体实施例方式皮肤康洗液抑制HT-29细胞增殖的实验研究资料I实验材料 I. I实验用细胞株结肠腺癌(HT-29),来自本公司实验室细胞库,DMEM+10% FBS常规培养。I. 2实验药物研究药物皮肤康洗液,北京华洋奎龙药业公司,批号20110321药液储液称取IOOmg皮肤康洗液,溶于5ml无水乙醇中,O. 2μηι滤器过滤,500μ Idoff管分装,-20°C存储,同时O. 2 μ m滤器过滤无水乙醇以备对照组之用。I. 3实验试剂DMEM(GIBC0 公司 Cat. No. 12100-061 Lot. No. 758137);胎牛血清(浙江天杭生物科技有限公司Lot. No. 100419);NaHC03 (上海久亿化学试剂有限公司Cat. No. 11810_033Lot.No. 1088387);Trypsin(AMRESC0 公司批号:2010/04);EDTA(AMRESC0 公司批号2009/10);Penicillin G Sodium Salt (AMRESC0 公司批号2010242) ;Streptomycin Sulfate(AMRESC0公司批号2010382);无水乙醇(南京化学试剂有限公司批号080310182);MTT (Biosharp 批号0793) ;PBS (实验室自配);I. 4实验器材莱卡倒置显微镜(德国Leica型号DM1L);可见-紫外光微孔板检测仪(美国MD公司型号SPECTRAMAX 190) ;C02培养箱(FORMA型号3111);超净台(苏净集团安泰公司制造型号SW-CJ-ZFD);纯水仪(美国Spring公司型号S/N 020579);精密移液器(法国吉尔森公司型号P2);电子天平(德国赛多利斯有限公司型号BT323S);全自动高压灭菌锅(日本SANK)公司型号MLS-3020);台式电热鼓风干燥箱(上海精密实验设备公司型号DHG9123A);冰箱(西门子公司型号KG18V21TI);液氮罐(CBS型号2001);低速离心机(上海安亭科学仪器厂型号ΚΑ-1000) ;0. 2μπι滤器(MILLIP0RE型号SLGP033RB) ;IOcm培养皿(NEST公司)、96孔培养板(NEST公司);细胞计数板;离心管、移液管、Tips若干。2实验方法 I) HT-29 细胞用 DMEM+10% FBS 于 37 °C、5% C02 进行常规培养(IOcm 培养皿),当细胞生长至对数期时,收集细胞,弃去培养液,PBS轻洗3遍,加入3ml 0. 25%胰蛋白酶-0. 049ffiDTA,37°C消化2min后,向其中加入5ml完全培养基中和反应,吹打细胞后将其转入离心管中,IOOOrpm离心5min,调整细胞悬液浓度3X 104个/ml。2)将细胞种入96孔培养板中,每孔加入细胞悬液180 μ 1,培养板放入细胞培养箱中(37 °C,5% C02 )常规培养。3)根据细胞生长情况,一般长至50%_70%,加入皮肤康洗液溶液,继续培养24h。4) 24h 后加入 20 μ I MTT 溶液(5mg/ml,即 0. 5%MTT),继续培养 4h。5) 4h后扣板法倒去上清,用吸水纸轻轻拍干,每孔加入200 μ I 二甲基亚砜,置摇床上低速振荡lOmin,使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪490nm处测量各孔的吸光值。6)同时设置本底(不加细胞,只加培养液),对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜),每组设定6个复孔。7)结果以药物对细胞的抑制率表示细胞增值抑制率(%)=(对照孔OD值-给药孔OD值)/对照孔OD值X 100%。实验重复3次。3统计处理采用Microsoft Excel 2003软件中的相关分析和Studentt检验,数据以mean+ S. D.表不。4实验结果MTT法实验后统计结果显示,与对照组比较,当剂量达到5mg/ml时,对HT-29细胞增殖抑制有差异(p〈0. 05),剂量在10mg/ml时该差异具有显著性(P〈0. 01),当剂量达到15-20mg/ml时有极显著性差异(Ρ〈0· 001)。表I皮肤康洗液对ΗΤ-29细胞增殖抑制影响研疋(X土SD)本文档来自技高网
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【技术保护点】
皮肤康洗液在制备抑制HT?29细胞增殖药物中的应用。

【技术特征摘要】
1. 皮肤康洗液在制备抑制H...

【专利技术属性】
技术研发人员:不公告发明人
申请(专利权)人:南京正亮医药科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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