草酸相关疾病治疗方法和组合物技术

本发明专利技术一方面是关于一种草酸降解组合物，其中包括至少一种草酸降解酶。该组合物包括一种浓缩的不可溶真菌生物样品组分，并且该组合物能够在pH值1.9及以上环境中有效地降解草酸。该组合物免受蛋白酶如胃蛋白酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶降解。该组合物能够耐受对象胃、小肠和/或大肠环境。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】草酸相关疾病治疗方法和组合物相关申请的交叉参考本申请根据美国联邦法典第35篇第119条(35USC 119)要求2009年11月25日提交的美国临时申请系列号61/281，907和2010年5月20日提交的美国临时申请系列号 61/395,929的优先权。联邦政府资助研发声明本专利技术得到政府支持，授予单位为美国全国卫生研究所(NIH)补充替代全国补药和选择性药物中心(NCCAM)，授权号码1R43AT006065-01。政府对本专利技术有一定权利。
技术介绍
每年大约有3百万人因肾结石前往就医。在这3百万患者当中，在美国超过一百五十万人患有肾结石相关疾病。肾结石是一种极为常见且令人痛苦的尿路疾病。最常见的类型为与草酸或者磷酸结合形式的钙结石，其中大约有70%为草酸钙。(Tsujihata， Μ. (2008)草酸 钙肾结石形成和肾小管细胞损伤的机制，《国际泌尿系统杂志》15，115-120; Daudon, Μ.，Dore, J. C.，Jungers, P.,和 Lacour, B. (2004)结石成分随患者年龄和性别变化一种多变量流行病学方法，《泌尿科杂志》32，241-247。)多种疾病状态与体内草酸过量有关，包括原发性高草酸尿、继发性高草酸尿、自闭症、外阴疼痛、终末期肾病相关草酸沉积、心脏传导障碍、克罗恩病、炎症性肠病、结肠炎、尿石症、终末期肾病相关草酸沉积、结节病、哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、纤维肌痛、脑-肝-肾综合征、减肥手术和其它肠道疾病。草酸通常形成于植物中，且主要集中在叶子、坚果、水果和皮中。在食物中，草酸特别在以下植物性食物中含量较高蔬菜、谷物、坚果、豆类和饮料。一般草酸每日摄入量在 80-120mg之间，但是可能从44-350mg/天不等。膳食中草酸可以在食物中形成钠、钾或钙盐。草酸可以通过整个胃肠道(GI)吸收，包括胃、小肠和大肠。因此，从这些器官中清除膳食中草酸可以有效地阻止草酸吸收。尿路中分泌的草酸有10-70%来源于膳食中草酸的吸收，因此膳食吸收极有可能是尿路中草酸钙过度饱和的主要原因。(Holmes，R. P.， Goodman, H. O.和Assimos, D. G. (2001)膳食草酸对泌尿草酸排泄的贡献，《国际肾脏期刊》 59,270-276。)据认为，草酸钙过度饱和是草酸钙结石形成过程中起决定性作用的推动力。 因此，通过减少草酸钙过度饱和，结石形成风险也可能会显著降低。已知的治疗方法几乎没有通过减少或阻止系统膳食草酸吸收来显著降低结石形成的风险。限制膳食草酸吸收的方法之一是口服给予草酸降解酶，与胃、小肠和大肠接触。 提供此类治疗的一大难点在于胃内强酸环境，使得酶很难在低PH值和高胃蛋白酶活性环境下持续存在并发挥功能。小肠和大肠内由于胰蛋白酶和糜蛋白酶活性较高，也为酶的持续存在造成了环境困难因素。胃中PH值受多种因素的影响，包括个体胃健康相关条件、膳食量和膳食内容等。所有这些因素使得胃内PH值可能在1.9-5.5这一大范围内变动。人的胃内由于存在酸袋，使得PH值具有不均一性。因此，关键在于找到一种在该酸性pH值范围内稳定和强效的草酸降解酶，作为有效的人体治疗药物。此外，这种草酸降解酶还必须能够在5. 5-8. O的pH范围内保持稳定，才能经受住肠道内环境。这种草酸降解酶必须免受胃中蛋白酶的消化，以及小肠和大肠中胰蛋白酶和糜蛋白酶的消化。概述本专利技术提供了一个实施例，一种草酸降解组合物，其中包括至少一种草酸降解酶。 该组合物包括一种浓缩的不可溶真菌生物样品组分，能够在PH值I. 9及以上环境中有效地降解草酸。名词“生物样品”在本文中是指大量来自相关物种的细胞或含有细胞的组织。在典型的实施例中，生物样品为匀浆或经其它方式碎裂，从而使生物样品中细胞破裂或溶解。 草酸脱羧酶(OxDC)和草酸氧化酶(OxOx)在不可溶细胞组分中均有发现，即细胞中蛋白质和其它非水溶性结构(细胞壁/膜)。生物样品中的不可溶组分可以通过去除非水溶性组分中至少一部分水和水溶性细胞组分进行浓缩。不可溶组分的浓缩可以通过行业传统方法实现，例如过滤、离心、冷冻干燥和/或简单地干燥。在另一个实施例中，提供了一种减少对象体内草酸含量的方法。该方法包括给予对象有效治疗剂量的一种组合物，其中包括至少一种草酸降解酶。至少一种草酸降解酶包括一种酶，在PH为I. 9-6. 3下具有活性，能够降解对象消化道内可溶性草酸。在另一个实施例中，提供了一种预防/治疗对象草酸相关临床状况的方法。该方法包括给予需要对象有效治疗剂量的一种含有至少一种草酸降解酶的组合物。草酸相关临床状况包括以下中的一种原发性高草酸尿、自闭症、继发性高草酸尿、克罗恩病、炎症性肠病、 结肠炎、心脏传导障碍、尿石症、外阴疼痛、减肥手术、结节病、哮喘、慢性阻塞性肺病 (COPD)、纤维肌痛、脑-肝-肾综合征、终末期肾病相关草酸沉积和其它肠道疾病。另一个实施例提供了一种产品，其中包括封装材料和有效剂量的草酸降解酶。封装材料包括以下中至少一种丸剂、糖丸、袋装、片剂、散装、棒和/或食物添加剂。另一个实施例提供了一种治疗草酸相关临床状况的治疗方法。该方法包括联合给予需要该治疗对象有效剂量的第一种组合物和第二种组合物，前者组合物在对象胃内释放酶，后者在对象肠道内释放酶。该方法揭示了当酶释放时，第一种组合物在胃中降解草酸， 而第二种组合物在肠道内降解草酸。另一个实施例提供了一种衍生自一种真菌源的草酸降解组合物。该组合物包括至少第一种组合物和第二种组合物。第一种组合物包括至少一种草酸降解酶，其中第一种组合物在pH值I. 9-6. 3范围内pH值下释放至少一种草酸降解酶。第二种组合物包括至少一种草酸降解酶，其中所述第二种组合物在PH值5. 5-8. O范围内pH值下释放至少一种草酸降解酶。另一个实施例提供了一种产品，其中包括封装材料和有效剂量的草酸降解酶。该产品包括一种第一种组合物，其中第一种组合物在第一个PH值范围内pH值下能够发挥作用。该产品还包括一种第二种组合物，其中第二种组合物在第二个PH值范围内pH值下能够发挥作用。该产品包括至少一种第一种草酸降解酶和一种第二种草酸降解酶。附图说明图I是显示pH值I. 9-6. 3来自三种真菌种类的OxDC的pH活性特征图。图2显示来自三种真菌种类的OxDc的热稳定性。图3 是显不 pH 值 5. 0-8. 5 来自 Bougainvillea buganvilla 的 OxOx 的 pH 活性特征的图。图4显不来自牛肝菌(Boletus flaviporus)、鸡腿燕(Coprinus cometus)的 OxDC 和来自鸡腿菇的配方OxDC的pH活性。图5显示在pH值为2. 4、3. 4和5. 2的3种食物混合样品中来自柱状田头菇 (Agrocybe aegerita)的OxDC对可溶性草酸的降解。专利技术详述本专利技术基于专利技术者研发一种在对象体内降解草酸的新组合物。对OxDC活性在本专利技术继承的超过一百二十种不同蘑菇种类中进行了评估，详见实施例2。它们中间很多是可使用或医用蘑菇。很多来自这些蘑菇真菌的OxDC活性在pH值I. 9-2. 5,2. 5-3. 0,3. 0-3. 5、3.5-4. 0,4. 0-4. 5,4本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.11.25 US 61/281,907;2010.05.20 US 61/395,9291.草酸降解组合物，该组合物包括至少一种草酸降解酶，所述组合物包括一种浓缩的不可溶真菌生物样品组分，其中所述组和物能够在pH值I. 9及以上环境中有效地降解草酸。2.根据权利要求I的组合物，其中所述至少有一种草酸降解酶包括一种在I.9-6. 3pH 值范围内pH值下具有活性的第一种酶，和/或在5. 0-8. OpH值范围内pH值下具有活性的第二种酶，或者第一种和第二种酶的组合。3.根据权利要求I的组合物，其中所述至少一种草酸降解酶包括草酸氧化酶(OxOx)和 /或草酸脱羧酶(OxDC)中至少一种。4.权利要求I的组合物，其中所述至少一种草酸降解酶来源于以下中的一种美味齿菌(Dentinum reparandum)、绿 (Russula virescens)、发光假蜜环菌(Armillaria tabescens)、 红鸡油菌(Cantharellur cinnabarinur)、Boletur rubellus var fraternus、堆金钱菌(Collybia acervata)、软靴耳(Crepidotus mollis)、亚抚柄牛肝菌(Boletur subglabripes)、网柄牛肝菌(Boletus ornatipes)、黄多孔菌(Polyporus elegans)、灰光柄燕(Pluteus cervinus)、禮黄硬皮马勃(Sderoderma citrinum)、 平燕(Pleurotus ostreatus)、长根 (Xerula radicata)、Telephoro vlalis、猪肚 ^ (Clitocybe)、Cortinarius cedretorun、蓝绿乳 (Lactarius indigo)、密糟紅燕(Russula densifolia)、Amani ta rhopalopus、Clitocybe hydrograma、黄盖我鸟嘗菌(Amanita gemmata)、Cortinarius lewisii、白腐菌(Pleurotus eryngii)、裂丝盖伞 (Inocybe rimosa)、Lactarius atrorividus、花盖红 (Russula cyanoxhanth)、多根硬皮马勃(Sderoderma polyrhizum)、香燕(Len tinula edodes)、真姬燕(Hypsizygus tessellates)、金针 (Flammulina velutipes)、Leucangia carthusiana、Tuber oregonese、灰树花菌(Grifola frondosa)、Boletus rubricitrinus、兄弟牛月干菌 (Boletus fraternus)、Gyroporus subalbellus、Leucoagaricus americanus、发光类胳燕(Omphalotus olearius)、假鬼伞(Coprinus disseminates)、黑褐我鸟膏菌(Amanita brunnescens)、叶绿红 (Russula helerophylla)、Mycorrhaphium adustum、假密环菌 (Armillaria tabescense)、Boletus flaviporus、Russula pectintoides、Lentinula boryana、Amanita mutabilis、Gyroporus subalbellus 2nd、靴状金钱菌(Collybia peronata)、皱盖乳 (Lactarius corrugis)、平红盖 (Rhodocybe)、Macrocybe titaus、 金钱菌(Collybia)、变形菌(Pluteus)、Lactarius yazooensis、山杨抚柄牛肝菌(Leccinum insigne)、鸡腿燕(Coprinus comatus)、块莖形多孔菌(Polyporus tuberaster)、柱状田头燕(Agrocybe aegerita)、变色栓菌(Trametes versicolor)、灵芝(Ganoderma Iucidum)、 偷燕(Hypsizygus ulmarius)、暖季型香燕(Lentinula edodes (warm))、冷剂型香燕 (Lentinula edodes (cold))、宽范围型香燕(Lentinula edodes (wide range))、Russula amoenolens、Lactarius tomentosu 和 / 或姬松驾(Agaricus blazei)。5.根据权利要求4的组合物，其中所述至少一种草酸降解酶获得自以下中的两种或以上金针燕(Flammulina velutipes)、柱状田头燕(Agrocybe aegerita)和鸡腿燕 (Coprinus comatus)，或其任意组合，其中所述酶在pH值范围I. 9-6. 3内pH值下具有活性。6.—种降低对象体内草酸含量的方法，包括给予所述对象有效治疗剂量的一种组合物，其中包括至少一种草酸降解酶，所述至少一种草酸降解酶包括一种在pH值范围I. 9-6. 3内pH值下具有活性的酶，其中所述酶降解所述对象消化道内可溶性草酸。7.根据权利要求6的方法，其中所述有效治疗剂量的所述组合物经口服给予所述对象。8.根据权利要求6的方法，其中所述至少一种草酸降解酶包括草酸氧化酶(OxOx)和/ 或草酸脱羧酶(OxDC)中至少一种。9.根据权利要求6的方法，其中所述酶为草酸氧化酶。10.根据权利要求9的方法，其中所述酶从真菌分离。11.权利要求6的方法，其中所述酶为草酸脱羧酶。12.根据权利要求11的方法，其中所述酶从一种真菌或细菌分离。1...

【专利技术属性】
技术研发人员：李青山，艾如·B·考利，
申请(专利权)人：凯普托杰姆有限责任公司，
类型：发明
国别省市：