本发明专利技术公开了一种从橄榄叶中提取羟基酪醇的方法，属于植物活性成分提取技术领域。本发明专利技术所述方法是以橄榄叶为原料，用pH=11～14的碱液于80～100℃条件下保温提取，所得提取液浓缩，过大孔吸附树脂柱，用甲醇或乙醇洗柱，薄层层析跟踪检测，收集醇洗脱液；将醇洗脱液浓缩，用萃取剂萃取，收集萃取相，浓缩，干燥，得到羟基酪醇。与现有技术相比，本发明专利技术所述方法将橄榄叶用pH=11～14的碱液于80～100℃条件下保温提取，提取和水解步骤同时进行，不仅提取率高而且水解反应完全；另一方面，由于提取和水解可以同步进行，中间无需过度步骤，因此简化了工序，节约了人力和物力，降低了生产成本，易于实现工业化生产。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物中活性成分的提取方法，具体涉及。
技术介绍
轻基酪醇(Hydroxytyrosol)化学名为3，4_ 二轻基苯乙醇,是一种多酹类物质,分子式C8HltlO3,相对分子量154。羟基酪醇有着安全卓越的抗氧化能力以及抗菌、抗癌、抗炎等多种生物和药理活性，可以促进骨骼发育，还可以预防心脑血管疾病。在抗氧化方面能促进新陈代谢，促进伤口愈合，消除体内自由基，恢复人体脏腑器官的健康状态，防止脑衰，延缓衰老，保持青春活力；还可以保护人体视网膜上皮细胞，防治和治疗视网膜黄斑病，保护视力。在促进骨骼发 育方面有助于人体对矿物质的吸收，无需补钙，自然吸收，保持骨密度，减少骨骼疏松和促进骨骼发育。在抗菌方面发现羟基酪醇对革兰氏阴性菌显出很强的抑菌性，主要是通过穿透革兰氏阴性菌的细胞黏膜，分解细菌的黏肽，或者引发细菌黏膜的破损。在心脑血管疾病和抗炎方面，能抑制血小板聚集和血栓素的产生，降低动脉粥样硬化疾病的发生；还能够抑制白血细胞的增殖，并诱导其凋亡，从而达到抗炎的效果。羟基酪醇最初来源于油橄榄中，是橄榄中的一种次生代谢物，游离的羟基酪醇很少，在橄榄中主要以橄榄苦甙的形式存在，可由橄榄苦甙分解而得到。橄榄中各个部位都含有橄榄苦甙，在干燥的橄榄叶中可达到2% 10%。目前羟基酪醇主要是从橄榄果、叶以及在制备橄榄油过程中产生的残渣和废水中分离得到；而羟基酪醇的纯化主要采用柱色谱分尚的方法，如娃胶柱、尚子交换树脂。如公开号为CN101631758的专利技术专利，公开了一种煮沸水解制备羟基酪醇的方法，首先用水或有机溶剂对原料的提取部位进行煎煮、冷浸、回流、渗漉或超声提取，水或有机溶剂的质量为原料提取部位的6 10倍，提取I 3次，每次30 90min，合并提取液，浓缩至相对密度为I. 0 I. 3，得到植物提取液；调节植物提取液的pH为I 3，然后常压下煮沸水解I 4h ;放凉后调节其pH为6. 8 7. 2，过滤，取上清液上样于大孔吸附树脂，吸附完成之后先用水冲洗除杂，然后用体积分数10 90%的甲醇或乙醇进行洗脱，收集洗脱液；浓缩回收甲醇或乙醇，得到羟基酪醇提取物。该专利技术所述方法克服了使用酸液上柱、酸液洗脱，会对树脂设备产生腐蚀的不足，但该方法中提取和水解步骤分开进行，且提取之后需要调节提取液的pH为I 3后再进行水解，工艺较为繁索；此外，该方法所得产品的纯度不高。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种工艺简单、提取和水解同步进行且所得产品纯度高的。为解决上述技术问题，本专利技术采用以下技术方案，它是以橄榄叶为原料，用pH=ll 14的碱液于80 100°C条件下保温提取，所得提取液浓缩，过大孔吸附树脂柱，用甲醇或乙醇洗柱，薄层层析跟踪检测，收集含目标成分的醇洗脱液；将醇洗脱液浓缩，用萃取剂萃取，收集萃取相，浓缩，干燥，得到羟基酪醇。为了减少提取液对树脂设备的腐蚀，最好是先将提取液的pH值调至6 7后再浓缩，由于浓缩后的浓缩液中会有一定量的固形物产生，为了减少树脂被堵塞的机率，浓缩后最好先进行过滤或离心，所得滤液或上清液再过大孔树脂柱；因此，更为优选的，包括以下步骤I)以橄榄叶为原料，用pH=ll 14的碱液于80 100°C条件下保温提取I 3次，每次3 8h，过滤，合并滤液，得到提取液；2)用酸调节提取液的pH值至6 7，浓缩，过滤或离心，滤液或上清液过大孔吸附树脂柱，先用水洗柱，再用甲醇或乙醇洗柱，薄层层析跟踪检测，收集含目标成分的醇洗脱液， 3)将所得醇洗脱液浓缩，用萃取剂萃取，收集萃取相，浓缩，干燥，得到羟基酪醇。上述方法中步骤I)中，优选是用pH=ll 12的碱液对橄榄叶进行提取。该步骤中，进行浸提前，最好是将橄榄叶进行粉碎以提高后序浸提工序中的提取率，粉碎的粒度通常为10 30目。本申请中所述的橄榄叶为木犀科木犀榄属油橄榄树(Olea europaea L)的叶子。步骤I)中，所述的碱液可以是氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、碳酸钠或碳酸氢钠的水溶液；每次提取时碱液的用量通常为原料重量的3 10倍。步骤2)中，调节提取液pH值的酸可以是盐酸、硫酸或醋酸等其它有机酸或无机酸。提取液调节PH值后先浓缩至I 3波美，然后再过滤或离心。步骤2)中，所述大孔树脂的型号为LSA-21、XDA-7、HPD-100、D-101或D-102。步骤2)中，先用水洗树脂柱直至流出液清澈，然后再用甲醇或乙醇洗柱；所述甲醇或乙醇的体积浓度为10 50%，优选的浓度为20 40%。步骤3)中，将醇洗脱液浓缩至浸膏(通常为20 25波美)时再进行萃取步骤；所述的萃取剂可以是乙酸乙酯或正丁醇等；所述萃取的次数一般为I 3次，每次萃取时萃取剂的用量通常为浸膏重量的3 6倍。与现有技术相比，本专利技术所述方法将橄榄叶用pH=ll 14的碱液于80 100°C条件下保温提取，提取和水解步骤同时进行，由于加热情况下有利于橄榄苦甙等目标物质的溶出，溶出的这些物质在热的碱液催化下马上水解从而得到羟基酪醇，促使反应一直向右进行；又由于提取液中的橄榄苦甙等目标物质一直水解而消耗，橄榄叶中的橄榄苦甙等目标物质就会不断的溶出，可以使提取更加完全，因此，本专利技术所述方法提取率高而且水解反应完全；另一方面，由于提取和水解可以同步进行，中间无需过度步骤，因此简化了工序，节约了人力和物力，降低了生产成本，易于实现工业化生产；而且由本专利技术所述方法制得的产品纯度高。具体实施例方式下面以具体实施例对本专利技术作进一步说明，但本专利技术并不局限于这些实施例。实施例II)将干燥的橄榄叶粉碎至10目，称取50kg置于提取罐中，加入原料重量8倍的PH=Il的氢氧化钠水溶液，于80°C条件保温提取8h，过滤，滤渣再加入原料重量8倍的PH=Il的氢氧化钠水溶液，于80°C条件下保温提取8h，过滤，合并滤液，得到提取液；2)用盐酸调节提取液的pH值至6，浓缩至2波美，离心，上清液过HPD-100大孔吸附树脂柱，先用水洗树脂柱直至流出液清澈，再用体积浓度为30%的乙醇洗柱，薄层层析跟踪检测，收集含目标成分的醇洗脱液，3)将所得醇洗脱液浓缩至浸膏(22波美)，所得浸膏用乙酸乙酯萃取2次，每次萃取时乙酸乙酯的用量为浸膏重量的3倍 ，合并萃取相，浓缩至浸膏，真空干燥至含水量(5%，得到无色的膏状物I. 25kg，HPLC法检测羟基酪醇含量为96. 44%。实施例2I)将干燥的橄榄叶粉碎至20目，称取50kg置于提取罐中，加入原料重量6倍的PH= 12的碳酸钠水溶液，于100°C条件保温提取3h，过滤，滤渣再加入原料重量6倍的pH=12的碳酸钠水溶液，于80°C条件下保温提取3h，过滤，合并滤液，得到提取液；2)用盐酸调节提取液的pH值至7，浓缩至I波美，用100目的不锈钢筛网过滤，滤液过XDA-7大孔吸附树脂柱，先用水洗树脂柱直至流出液清澈，再用体积浓度为35%的甲醇洗柱，薄层层析跟踪检测，收集含目标成分的醇洗脱液，3)将所得醇洗脱液浓缩至浸膏(25波美)，所得浸膏用乙酸乙酯萃取4次，每次萃取时乙酸乙酯的用量为浸膏重量的4倍，合并萃取相，浓缩至浸膏，真空干燥至含水量(5%，得到淡黄色的膏状物I. 06kg，HPLC法检测羟基酪醇含量为95. 39%。实施例3I)将干燥的橄榄叶粉碎至18目，本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.从橄榄叶中提取羟基酪醇的方法，其特征在于以橄榄叶为原料，用PH=Il 14的碱液于80 100°C条件下保温提取，所得提取液浓缩，过大孔吸附树脂柱，用甲醇或乙醇洗柱，薄层层析跟踪检测，收集含目标成分的醇洗脱液；将醇洗脱液浓缩，用萃取剂萃取，收集萃取相，浓缩，干燥，得到羟基酪醇。2.根据权利要求I所述的从橄榄叶中提取羟基酪醇的方法，其特征在于包括以下步骤 1)以橄榄叶为原料，用PH=Il 14的碱液于80 100°C条件下保温提取I 3次，每次3 8h，过滤，合并滤液，得到提取液； 2)用酸调节提取液的pH值至6 7，浓缩，过滤或离心，滤液或上清液过大孔吸附树脂柱，先用水洗柱，再用甲醇或乙醇洗柱，薄层层析跟踪检测，收集含目标成分的醇洗脱液， 3)将所得醇洗脱液浓缩，用萃取剂萃取，收集萃取相，浓缩，干燥，得到羟基酪醇。3.根据权利要求2所述的从橄榄叶中提取羟基酪醇的方法，其特征在于步骤I)中，用PH=Il 12碱液对橄榄叶进行提取。4.根据权利要求2所述...
【专利技术属性】
技术研发人员：卢照凯，卢昶年，钟德品，谢冬养，陆美珍，
申请(专利权)人：桂林三宝药业有限公司，
类型：发明
国别省市：
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