猪圆环病毒PCR诊断试剂盒制造技术

本实用新型专利技术公开了一种猪圆环病毒PCR诊断试剂盒，包括盒体和盒盖，盒体内设有衬垫，衬垫上设有若干个放置诊断试剂的容器孔，盒盖内设有海绵缓冲层。盒体的衬垫上设有若干个放置诊断试剂的容器孔，将每种诊断试剂放入试剂孔内，由荧光PCR仪自动收集荧光信号，避免常规PCR终点分析法中的人为因素干扰，提高了特异性，有效地避免假阳性和假阴性，准确，使用安全，简单，应用范围广、取样及样品处理方便。盒盖内设有海绵缓冲层，保护试剂盒在运输过程中往往不会因为挤压原因而损坏。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本技术涉及一种猪圆环病毒PCR诊断试剂盒。
技术介绍
猪圆环病毒能够不同程度的导致妊娠母猪的繁殖障碍，引起母猪流产、胚胎死亡、胎儿畸形、胎儿木乃伊化及不孕等，在猪群中具传播快、胚胎致死率高、流行范围广、传播途径多、病原体顽固等特点，每年给养猪业造成了巨大损失。而 且经常混合感染，靠中和试验和分离病毒来确诊容易造成假阴性，而且操作繁琐，所需时间长，寻求一种操作简单、快速的检测、鉴别诊断方法是防制这类疾病的基础。目前，针对以上三种病毒病的诊断方法有很多，这些方法具有操作复杂、费时费力、敏感度差及阴性率高等缺点；临床已经使用的PCR诊断技术，虽然有灵敏度高、特异性强、快速、简便等优点，但不能准确定量；基于TaqMan技术荧光定量PCR方法能定量，但是成本较高，且需要合成特异性探针。亟需研究和开发简便、快速、特异、成本低、定量的检测方法。
技术实现思路
本技术要解决的技术问题是提供一种猪圆环病毒PCR诊断试剂盒。本技术的技术方案是猪圆环病毒PCR诊断试剂盒，包括盒体和盒盖，盒体内设有衬垫，衬垫上设有若干个放置诊断试剂的的容器孔，盒盖内设有海绵缓冲层。所述诊断试剂包括PCR缓冲液、引物、酶、超纯水、检测PCR管。本技术的有益效果是猪圆环病毒PCR诊断试剂盒，盒体的衬垫上设有若干个放置诊断试剂的的容器孔，将每种诊断试剂放入试剂孔内，由荧光PCR仪自动收集荧光信号，避免常规PCR终点分析法中的人为因素干扰，进一步提高灵敏度，采用一对特异引物进行目标基因片段的扩增及一条可与模板互补配对的荧光探针进行检测，提高了特异性，有效地避免假阳性和假阴性，准确，荧光(RT-) PCR检测方法与常规的病原分离方法的敏感性基本一致。使用安全，简单，应用范围广、取样及样品处理方便。盒盖内设有海绵缓冲层，保护试剂盒在运输过程中往往不会因为挤压原因而损坏。附图说明图I为本技术展开示意图。具体实施方式猪圆环病毒PCR诊断试剂盒，包括盒体I和盒盖5，盒体I内设有衬垫2，衬垫上设有若干个放置诊断试剂的的容器孔3，诊断试剂包括PCR缓冲液、引物、酶、超纯水、检测PCR管，可以根据需要设定容器孔的大小和数量。盒盖内设有海绵缓冲层4。猪圆环病毒引物的序列如下上游引物Pl :5 ' -TAA CTA CTC CTC CCG CCATAC-3 ;;下游引物P2 5 ; -GCC TAC GTG GTC TAC ATT TCC-3 ;;利用上述引物检测猪圆环病毒的多重SYBR Green I实时荧光PCR检测方法，包括提取样品的DNA后，按如下SYBRGreen I实时荧光PCR反应体系和SYBR Green I实时荧光PCR扩增程序对样品进行检测。所述SYBR Green I实时荧光PCR反应体系，在25 μ 体系中加入以下成份SYBRGreen I PreMix 17 μ , Pl O. 5 μ , Ρ2 O. 5 μ , DNA 2 μ , ddH20 5 μ ，所述 SYBRGreen I实时荧光PCR扩增程序为95°C预变性5min ;进入循环，95°C变性15s，55°C退火20s，72°C延伸20s，40个循环；反应结束后先加热至95°C，然后再降至65°C，开始以O. 5°C /s递增至95°C检测荧光信号得出扩增产物的溶解曲线。·本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.猪圆环病毒PCR诊断试剂盒，包括盒体和盒盖，盒体内设有衬垫，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏战勇，崔保安，
申请(专利权)人：魏战勇，
类型：实用新型
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