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一种检测污泥中四环素类抗性基因tetB的引物序列及方法技术

技术编号:7833246 阅读:382 留言:0更新日期:2012-10-11 08:44
本发明专利技术公开了一种测污泥中四环素类抗性基因tetB的引物序列及方法,引物序列包括正向引物和反向引物,其碱基序列为:正向引物:GGCAGGAAGAATAGCCACTAA;反向引物:AGCGATCCCACCACCAG。检测污泥中四环素类抗性基因tetB的方法包括:(1)提取待测污泥样品中的DNA,以提取的DNA为模板,用所述的正向引物和反向引物进行定量PCR扩增并记录下达到荧光阈值时的循环数;(2)将步骤(1)中得到的循环数参照定量PCR测定目的基因tetB质粒标准品的标准曲线,得到待测污泥样品中四环素类抗性基因tetB的含量。本发明专利技术的引物序列及检测方法实现了污泥中四环素类抗性基因tetB的快速精确定量检测。

Primer sequence and method for detecting tetracycline resistant gene tetB in sludge

The invention discloses a primer sequence and a method of tetracycline resistance gene tetB in sludge measurement, including primer sequences of forward and reverse primers, their nucleotide sequence: forward primer: GGCAGGAAGAATAGCCACTAA; reverse primer: AGCGATCCCACCACCAG. Including the method of tetracycline resistance gene tetB detection in sludge: (1) extracted from sludge samples in DNA, with the extracted DNA as template, PCR amplification cycles and record quantitative fluorescence can be achieved at a threshold value of forward and reverse primers used in the process; (2) the step (1) standard the cycle number obtained in the reference curve was measured by quantitative PCR tetB gene standard plasmid, get the content of tested tetracycline resistance gene tetB in sludge samples. The primer sequence and the detection method of the invention achieve rapid, accurate and quantitative detection of tetracycline resistant gene tetB in sludge.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子生物学领域,具体涉及。
技术介绍
抗生素是人类20世纪最重要的医学发现之一,然而近年来,抗生素在人类医疗以及养殖业方面滥用情况越发严重,越来越多的抗生素进入环境已成为不争的事实。环境中抗生素的存在除了导致化学药物污染外,更诱导细菌产生的抗生素抗性基因污染,并由此可能引发的生态问题亦令人关注。因为抗生素在环境中的浓度增长所带来的抗生素选择性压力的加大,将加速抗生素耐药性细菌以及抗生素抗性基因在环境中的出现和传播。同时,也增加了人类致病菌获得抗生素抗性基因、对抗生素产生抗性的几率。因此,抗生素抗性基因的存在及传播将严重威胁人类的健康。 抗生素抗性基因可以在环境中长期残留,并且可以在不同环境介质中的迁移、转化。抗生素的大量使用,使水环境不仅成为耐药基因的储库,也成为耐药基因扩展和演化的媒介,因此需要特别加强水环境中抗生素抗性基因的环境行为研究。污水处理厂因为进水中包含重金属、抗生素、洗涤剂、季铵盐等物质,这些物质也可以协同或交叉引起微生物抗药性,且污水处理厂微生物分布密集,极易诱导微生物产生抗性基因;而污水处理厂出水被认为是受纳水体中抗生素抗性基因的主要来源。并且国外相本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测污泥中四环素类抗性基因tetB的引物序列,其特征在于,包括正向引物和反向引物,其碱基序列为 正向引物GGCAGGAAGAATAGCCACTAA ; 反向引物AGCGATCCCACCACCAG。2.一种利用权利要求I所述的引物序列检测污泥中四环素类抗性基因tetB的方法,其特征在于,包括 (1)提取待测污泥样品中的DNA,以提取的DNA为模板,用权利要求I所述的正向引物和反向引物进行定量PCR扩增并记录达到荧光阈值时的循环...

【专利技术属性】
技术研发人员:陈红张明美
申请(专利权)人:浙江大学
类型:发明
国别省市:

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