本发明专利技术为一种从黑豆皮中制备花色苷提取物的方法，解决已有提取物有效成分含量低蛋白质含量高的问题。首先将黑豆皮以酸性溶剂提取，提取溶液浓缩除溶剂后加入酸性蛋白酶进行酶解，酶解溶液以树脂吸附，对吸附树脂进行解吸附洗脱，解吸附后洗脱溶液浓缩干燥得无蛋白花色苷提取物。并且研究表明该无蛋白花色苷提取物与标准银杏叶提取物具有抗氧化衰老协同作用。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于分离方法领域，具体涉及一种从黑豆皮中提取无蛋白质花色苷的方法。
技术介绍
黑豆为豆科大豆属植物Glycine max(L. )Merr.的黑色种子。又名乌豆、黑豆，味甘性平。黑豆是大豆的一种，含较丰富的蛋白质、脂肪、碳水化合物以及胡萝卜素、维生素BI、B2、烟酸及粗纤维，钙，磷，铁等营养物质，并含少量的大豆黄酮甙，有雌激素样作用。黑豆皮 含果胶、糖类和多种色素。《本草纲目》记载“豆有五色，各治五脏，惟黑豆属水性寒，可以入肾。治水、消胀、下气、治风热而活血解毒，常食用黑豆，可百病不生。”“黑豆入肾功多，故能治水、消肿下气。治风热而活血解毒。”因此传统中医学认为黑豆味甘性平，入脾经、肾经，是一种有助于抗衰老的特殊功能的食品。现代研究发现黑豆皮提取物(Black Soybean Hull Extract)具有优良抗氧化性，也具有一定的抗癌变、血管保护、抗炎、抗肥胖和抗糖尿效果(Bioavailability,antioxidant and biologicalproperties of the natural free-radical scavengerscyanidin and related glycosides. Ann 1st SuperSanita. 2007 ；43(4) :382-93.) 因此，黑豆皮提取物已被广泛用作保健食品和化妆品中。而黑豆皮提取物中所含的有效成分主要为花色素中的矢车菊素(Cyanidin)和它的衍生花色苷一矢车菊素3_0_葡萄糖苷(Cyanidin-3-O-glucoside)。中国专利申请CN101250206(申请号为200810052526. 9)含有矢车菊素3_0_葡萄糖苷的有效部位及制备方法及应用。公开了一种含有矢车菊素3-0-葡萄糖苷的有效部位及制备方法及应用，其制备方法为以黑豆皮为原料，加水常温提取，过筛，得提取溶液；提取溶液经大孔树脂吸附，用水及乙醇水溶液梯度洗脱，收集富含矢车菊素3-0-葡萄糖苷的组分，减压浓缩，得浓缩物；浓缩物进行聚酰胺树脂吸附，用水及乙醇水溶液梯度洗脱，收集富含矢车菊素3-0-葡萄糖苷的组分，将洗脱溶液减压浓缩，干燥，得到含量大于50 %的矢车菊素3-0-葡萄糖苷产品。中国专利申请CN1844129(申请号为200610013546.6)从黑豆皮中提取花色苷的方法。公开了一种从黑豆皮中提取花色苷的方法，包括如下向黑豆皮原料中加入乙醇水溶液或甲醇水溶液，浸泡提取，过滤，溶液的PH为I 4，浸提溶液浓缩至无醇，静置，弃沉淀，得上清液；将上清液经苯乙烯类树脂吸附，用水或乙醇水溶液或甲醇水溶液洗脱，从颜色变深时开始收集，将洗脱溶液在< 70°C条件下，减压干燥，得花色苷产品。中国专利申请CN101095504(申请号为200710057844. X)天然黑豆皮色素的制备工艺。公开了一种天然黑豆皮色素的提取工艺，它包括精选黑豆、机械脱皮、风选豆皮、干燥、粉碎、浸提、过滤、蒸发浓缩、液态研磨、干燥、成品等制备工艺步骤，并从提取溶液及其浓度、PH值、物液比、温度、提取时间等多方面优化了黑豆皮提取黑色素的工艺。中国专利申请CN101353362(申请号为200810052747. 6)，矢车菊素3_0_葡萄糖苷的提取方法。公开了一种矢车菊素3-0-葡萄糖苷的提取方法，包括如下步骤以黑豆皮等为原料，加入水或酸水溶液进行提取；通过大孔树脂吸附，用水及乙醇水溶液梯度洗脱，收集富含矢车菊素3-0-葡萄糖苷的组分，减压浓缩；将浓缩物分散至水中进行聚酰胺树脂吸附，用水及乙醇水溶液梯度洗脱，收集富含矢车菊素3-0-葡萄糖苷的组分，减压浓缩，干燥；进行Toyopearl体积排阻层析柱层析纯化，得到含量> 20%的不同矢车菊素3_0_葡萄糖昔提取物。上述黑豆皮提取物的生产工艺均是单纯地从黑豆皮中提取色素，在提取过程都未进行除蛋白质处理，蛋白质含量大多> 5%。因此这些提取物在运用时，特别是在添加到化妆品中时存在植物蛋白质引起皮肤过敏反应的巨大风险。并且目如尚未见从黑 皮制备无蛋白花色苷红色素的方法的相关报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种有效成份含量高蛋白质含量微量的从黑豆皮中制备花 色苷提取物的方法。本专利技术是这样实现的本专利技术，首先将黑豆皮以酸性溶剂提取，提取溶液浓缩除溶剂后加入酸性蛋白酶进行酶解，酶解溶液以树脂吸附，对吸附树脂进行解吸附洗脱，解吸附后洗脱溶液浓缩干燥得无蛋白花色苷提取物。以柠檬酸乙醇溶液作为溶剂对黑豆皮进行提取，其中柠檬酸的含量为O. I 0.3%(w/v)，乙醇醇度为70° 90°，提取温度为45 55°C，溶剂pH值为2 3，柠檬酸乙醇溶液与黑豆皮总重量比为15 1，分三次提取，每次溶液与黑豆皮重量比为5 1，提取2小时。方法提取溶液真空减压浓缩除溶剂后加入酸性蛋白酶进行酶解，其中真空减压浓缩要保持在60°C以下，浓缩结束时比重为1.03 I. 05，加入酸性蛋白酶的酶量为30 50u/ml，酶解保温温度为40 60°C，酶解时间为4 6小时。酶解溶液以极性大孔树脂进行吸附，吸附流速为I 3BV/h，吸附完毕后，以柠檬酸的含量为O. 2% (w/v)，乙醇醇度为10°的溶液对吸附后的极性大孔树脂进行除杂洗涤，洗涤体积为2 4BV，再以柠檬酸的含量为O. 2% (w/v)，乙醇醇度为50° 70°的溶液对极性大孔树脂进行洗脱，从颜色加深开始收集，洗脱体积为2 4BV，洗脱流速为O. 5 1.5BV/h，对洗脱溶液浓缩干燥后得无蛋白花色苷提取物。本专利技术工艺简，成本低廉，蛋白含量< O. I %，大大降低了植物蛋白质引起皮肤过敏反应的巨大风险。具体实施例方式本专利技术的1-9实施例以柠檬酸乙醇作为溶剂，在提取浓缩溶液中添加酸性蛋白酶分解蛋白质，浓缩溶液经树脂吸附后进行除杂洗涤和解吸附洗脱。通过以下对工艺条件的列表以说明本专利技术的1-9实施例。下述实施例I 9是将500g黑豆皮以柠檬酸乙醇溶液对黑豆皮进行提取。然后将黑豆皮提取溶液浓缩至比重I. 03 I. 05，向提取浓缩溶液添加酸性蛋白酶，搅拌保温酶解。将酶解溶液以极性大孔树脂进行吸附，吸附完毕后，柠檬酸乙醇溶液对吸附后的极性大孔树脂进行除杂洗涤，再以柠檬酸乙醇溶液对极性大孔树脂进行洗脱，从颜色加深开始收集。柠檬酸乙醇洗脱溶液用真空减压浓缩，温度在70°以下，浓缩比重在1.03 1.05。浓缩完成后，干燥即得无蛋白质花色苷提取物。其中，乙醇浓度(° )、柠檬酸浓度(w/v)、提取温度和pH值、提取物中矢车菊素3-0-葡萄糖苷含量(％ )见表I。 表I本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种从黑豆皮中制备花色苷提取物的方法，首先将黑豆皮以酸性溶剂提取，提取溶液浓缩除溶剂后加入酸性蛋白酶进行酶解，酶解溶液以树脂吸附，对吸附树脂进行解吸附洗脱，解吸附后洗脱溶液浓缩干燥得无蛋白花色苷提取物。2.根椐权利要求I所述的方法，其特征在于以柠檬酸乙醇溶液作为溶剂对黑豆皮进行提取，其中柠檬酸的含量为O. I 0.3% (w/v)，乙醇醇度为70° 90°，提取温度为45 55°C，溶剂pH值为2 3，柠檬酸乙醇溶液与黑豆皮总重量比为15 1，分三次提取，每次溶液与黑豆皮重量比为5 1，提取2小时。3.根椐权利要求I所述的方法，其特征在于提取溶液真空减压浓缩除有机溶剂后加入酸性蛋白酶进行酶解，其中真空减压浓缩要保持在60°C以下，浓缩结束时比重为I. 03 I. 05，加入酸性蛋白酶的酶量为30 50u/ml，酶解保温温度为40...
【专利技术属性】
技术研发人员：周开静，张国芬，秦岭，
申请(专利权)人：成都华高药业有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。