人类全血中病毒基因组DNA提取试剂盒及方法技术

本发明专利技术涉及一种人类全血中病毒基因组DNA提取试剂盒及其方法。该发明专利技术的特征在于试剂盒包括红细胞裂解液、白细胞裂解液、消化液、纯化液及DNA保存液。本发明专利技术采用两种裂解液分别处理含有病毒细胞的血液样品，在裂解血液细胞的同时，可以高效彻底地裂解其中的各种病毒细胞，使病毒DNA释放出来，与血液基因组DNA相互缠绕在一起而被提取出来.用该试剂盒提取病毒DNA时，不用事先对血液进行血浆和血清分离，只需取新鲜或冰冻的0.1至1ml抗凝全血即可提取高纯度微量病毒的DNA，并可以完全解链和高效地被扩增.本发明专利技术适用于所有科研单位和从事分子遗传学研究的实验室及开展临床基因诊断技术的医疗单位、血站以及疾病控制中心使用。

【技术实现步骤摘要】

该专利技术涉及一种从人类全血中提取病毒基因组DNA的试剂盒及利用该试剂盒从人类全血中提取病毒基因组DNA的方法。
技术介绍
病毒是一类个体微小，结构简单，只含单一核酸，必须在活细胞内寄生并以复制方式增殖的非细胞型微生物。病毒在自然界分布广泛，可感染人体细胞，在细胞内解体释放出核酸分子，借细胞内环境的条件以独特的生命活动体系进行复制，常引起人体发病。目前知道的DNA病毒有乙肝病毒，T2噬菌体，天花病毒，花椰菜花叶病毒等，本专利技术适用于所有的感染人类的血液中的病毒基因组DNA的提取，在已知的DNA病毒中，因为乙肝病毒对人类的影响和危害最大，传染性最强，因此本专利技术尤其适用于乙肝病毒基因组DNA 的提取。目前临床对于病毒的检测方法主要有两种I.血清学检查(ELISA检测)主要检查患者血清特异性抗原抗体物质。如乙肝病毒检测，主要检测血液中HbsAg、HbsAb、HbeAg、HbeAb、HbeAb,这就是人们常说的“乙肝两对半”检查，反映机体HBV感染的免疫状态。ELISA检测，无法判定病毒感染的数量和复制状态，检测灵敏度相对较低，时有有漏检发生。2. DNA检查DNA检测则是采用聚合酶本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种人类全血中病毒基因组DNA提取试剂盒，其特征在于包括以下试剂 红细胞裂解液、白细胞裂解液、消化液、纯化液、DNA保存液。2.根据权利要求I所述一种人类全血中病毒基因组DNA提取试剂盒，其特征在于各试剂分别为 1)红细胞裂解液含有碳酸氢钾12mmol/L，氯化铵155mmol/L，PH值为8.O乙二胺四乙酸(EDTA)O. 15mmol/L ； 2)白细胞裂解液含有PH值为8.0的三羟甲基氨基甲烷(Tris-HCl)15mmol/L，PH值为8. 0乙二胺四乙酸(EDTA) 100mmol/L，十二烷基硫酸(SDS) 1.0% ； 3)消化液含十二烷基硫酸(SDS)1.5% ； 4)纯化液含饱和氯化钠溶液6mol/L;或含饱和醋酸钠溶液6mol/L ； 5)DNA保存液为经过灭菌处理的PH值为8. 5的Tri s-HCl溶液，或PH值为8. 0的灭菌 ddH20。3.根据权利要求I和2所述的试剂盒提取人类外周血液中病毒基因组DNA的方法，其特征在于包括以下步骤 1)取0.I-Iml全血放入到2ml的离心管中，加入0. I-Iml红细胞裂解液，上下翻转，使沉淀物分散，8000-1200()rpm离心l_2min。倒掉上层液，可见离心管底部有血色沉淀。2)离心管中加入0.I-Iml白细胞裂解液，上下翻转，务必使沉淀物分散，旋转，8000-12000rpm离心l_2min...

【专利技术属性】
技术研发人员：缪林，张琼，
申请(专利权)人：缪林，张琼，
类型：发明
国别省市：