降解原油的微生物和用组合的微生物降解原油的方法技术

本发明专利技术涉及降解原油的微生物和用组合的微生物降解原油的方法。具体地，本发明专利技术公开了用于降解原油的假单胞菌和芽孢杆菌，以及用它们的组合来降解原油，将原油的重组分降解为轻组分的方法。该方法包括用上述两种微生物组合后用加入原油中进行降解。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及。具体地，涉及用假单胞菌和芽孢杆菌的组合来降解原油，将原油的重组分降解为轻组分。
技术介绍
原油是非常重要的资源，目前原油已成为影响各国经济发展建设的一重大因素。 如何更有效地、更科学地、更切合实际地利用好目前现有的原油能源，已成为各国科学研究竞相解决的热门课题。原油是一个多组分的复杂混合物，其沸点范围很宽，从-161. 5°C (甲烷)一直到 800°C以上。所以，无论是对原油进行研究或进行加工利用，都必须对原油进行分馏。分馏就是按照组分沸点的差别将原油“切割”成若干“馏分”。原油的馏分主要有汽油、煤油、柴油、 润滑油、渣油等。在加工分馏的过程中各国都十分重视提高轻质馏分油的收率，因此采用了物理、化学等不同的方式对原油进行处理，以提高收率。最常用的方法除常减压蒸馏外，还有催化裂化、加氢裂化、延迟焦化、催化重整、烷基化和调合。提高组分中轻组分含量、减少重组分含量，是提高石油利用率的关键。近年来，随着现代生物技术的发展，科学家利用现代生物修复技术对石油对环境的污染进行了深入的研究。大量的研究结果证明自然界中存在能降解石油烃的微生物，能将原油部分分解，将重组分降解为较轻的组分，甚至降解为二氧化碳和水。但此项技术目前主要应用于治理原油污染，解决因原油污染而造成的环境问题和微生物强化采油技术，如海洋原油泄露、土壤原油污染和三次采油等。
技术实现思路
本专利技术是利用微生物对原油的降解作用，将不同种的微生物进行组合来处理原油，将原油中的重组分部分降解成较轻的组分，部分芳香烃开环转化为直链烃。将此技术应用于原油的加工，可提高轻组分油的产出率，从而提高现有原油产品的经济效益。本专利技术将原油经过复合微生物降解后，进入蒸馏塔进行蒸馏，可以获得更多的短链烃，即轻组分馏分变多，而重组分馏分变少，使轻组分油的产出率提高，重组分油的产出率降低。将本专利技术应用于现代石油化工中，具有非常好的应用前景和经济效益。本专利技术的一方面涉及保藏号为CGMCC No. 3607的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)SWS-0603。本专利技术的另一方面涉及保藏号为CGMCC No. 3608的短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)SWS-0501。本专利技术的另一方面涉及用组合的微生物来降解原油的方法，其特征在于将保藏号为CGMCC No. 3607的铜绿假单胞菌SWS-0603和保藏号为CGMCC No. 3608的短小芽孢杆菌 SWS-0501组合加入原油中进行降解。在一个具体实施方案中，加入的保藏号为CGMCC No. 3607的铜绿假单胞菌附图说明图I原油气相色谱图。图2复合微生物降解后原油的气相色谱图(菌A图3复合微生物降解后原油的气相色谱图(菌A图4复合微生物降解后原油的气相色谱图(菌A具体实施例方式获得降解原油的微生物的方法和降解原油的基本方法概述如下I、原油降解菌筛选对取自扬子石化炼油厂的原油污泥和含油污泥浸泡搅拌预处理，吸取上清液作为分离目的菌株的菌悬液。将菌悬液在原油平板上涂布培养96小时，挑取菌落到牛肉膏蛋白胨基础培养基上纯化，将分离到的菌株在原油平板培养基复筛，能继续生长的菌株为能利用并降解原油的目的菌株。共筛选到原油降解菌78株，保种。2、原油降解选取筛选的两株微生物作为降解原油配伍菌。菌株A :铜绿假单胞菌SWS-0603 ； 菌株B :芽孢杆菌SWS-0501。将菌株A和菌株B接种于牛肉膏蛋白胨液体培养基中，分别培养，培养条件为30°C，180rpm，48小时。将菌液分装于40mL离心管中，8000rpm离心，除去上清液，将菌体转移到50mL原油液体培养基中，降解条件为30°C，180rpm，降解时间为4天。3、气相色谱分析将降解后的发酵液以SOOOrpm的速度离心，除去菌体，上清液采用二氯甲烷萃取四次，O. 22 μ m膜过滤，蒸发溶剂后，采用GC进行分析，并加入外标进行定性，积分定量。具体实验方法和结果见下述实施例。实施例一I、原油降解菌的筛选取自扬子石化炼油厂的原油罐底部沉积的污泥2 3克，置于250mL烧杯中，加入蒸懼水150mL,置于磁力搅拌器上,温度为室温20 30°C,搅拌速度180rpm,搅拌处理2.5 3小时，然后用无菌双层纱布过滤，除去上层漂浮物和下层沉淀物，上清液作为分离SWS-0603和保藏号为CGMCC No. 3607的短小芽孢杆菌SWS-0501的比例是I : 2-2 : I。在一个具体实施方案中，加入的保藏号为CGMCC No. 3607的铜绿假单胞菌 SWS-0603和保藏号为CGMCC No. 3607的短小芽孢杆菌SWS-0501的比例是I 2。在另一个具体实施方案中，加入的保藏号为CGMCC No. 3607的铜绿假单胞菌 SWS-0603和保藏号为CGMCC No. 3607的短小芽孢杆菌SWS-0501的比例是1:1。在另一个具体实施方案中，加入的保藏号为CGMCC No. 3607的铜绿假单胞菌 SWS-0603和保藏号为CGMCC No. 3607的短小芽孢杆菌SWS-0501的比例是2:1。在一个具体实施方案中，原油是在以下条件下降解的摇床培养，30°C，180rpm，降解时间为4天。此外，本专利技术还涉及保藏号为CGMCC No. 3607的铜绿假单胞菌SWS-0603和保藏号为CGMCC No. 3607的枯草芽孢杆菌SWS-0501的组合在降解原油中的用途。菌B为菌B为菌B为目的菌株的菌悬液，并将其置于无菌三角瓶中备用。整个操作过程在无菌操作台上完成。分别取ImL菌悬液在原油(扬子石化鲁宁管原油)平板涂布培养96小时，挑取菌落到牛肉膏蛋白胨固体培养基(配方(L—1):牛肉膏5g，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂18g)上纯化三次，将纯化后的菌株在原油平板复筛，30°C，培养72小时，能继续生长的菌株为能利用并降解原油的目的菌株。共筛选到原油降解菌78株，鉴定后保种备用。原油筛选和复筛时原油平板的组成如下在离子培养基中加入原油O. 5% (w/v)， 琼脂 4 % (w/V)。离子培养基组成为=NaNO3lg, KH2PO4 2g，K2HPO4 · 3H20 lg，MgSO4 · 7H200.5g，KCl 0. lg, CaCl2 0. Olg, FeSO4 0. Olg，微量元素液 0. 025mL。微量元素液组成硼酸O. 25g，五水硫酸铜O. 25g，硫酸锰O. 5g，钥酸钠O. 05g，硫酸锌O. 7g，水IOOOmL02、原油降解选取筛选的两株微生物，分别标为SWS-0603和SWS-0501。其生理生化实验结果如下权利要求1.保藏号为CGMCC No. 3607 的铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa) SWS-0603。2.保藏号为CGMCC No. 3608 的短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus) SWS-0501。3.用组合的微生物来降解原油的方法，其特征在于将保藏号为CGMCCNo. 3607的铜绿假单胞菌SWS-0603和保藏号为CGMCC No. 3607的枯草芽孢杆菌SWS-0501组合加入原油中进行降解。4.根据权利要求3所述的方法，其中加入的保藏号为CGMCCN本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨树林，艾凤祥，赵健烽，徐骏，杨苏平，
申请(专利权)人：中国石油化工股份有限公司，中国石化扬子石油化工有限公司，
类型：发明
国别省市：