在可选实施方案中,本发明专利技术提供磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)酶、编码它的核酸、与其特异性结合的抗体以及制备和使用它们的方法。还提供包括使用这些磷脂酶的工业方法和产品。在某些实施方案中,本文提供的是使脂质基质内的非水化磷脂(NHP)水合的方法。该方法能够使NHP迁移到油-水界面,从而允许NHP反应和/或从脂质除去。在某些实施方案中,提供的是从植物油中除去NHP、水化磷脂和卵磷脂以制造可用于食物生产和/或非食物应用的脱胶油或脂肪产品的方法。在某些实施方案中,本文提供的是使NHP水合、然后酶处理并除去各种磷脂和卵磷脂的方法。本文提供的方法可以针对粗制或水脱胶油实施。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】相关申请本申请要求提交于2009年10月16日的美国专利申请No. 61/252,638的优先权。 上述参考文献在此全文引入作为参考。对经由EFS-WEB提交的序列表的参照本申请经由MPEP § 1730 II. B. 2. (a) (A)授权并列出的USPTO EFS-WEB服务器电子提交,该电子申请包括电子提交的序列(SEQ ID)表;该序列表在此全文引入作为参考。 该序列表以下面的电子提交的.txt文件识别权利要求1.一种水合食用油中的非水化磷脂的方法,包括i-a)混合水性酸与食用油,得到pH小于约4的酸性混合物;和i-b)混合碱与所述酸性混合物,得到pH约6-9的反应混合物,其中步骤i-a)和/或i-b)中的混合产生包含至少约60体积%的液滴尺寸为约15 μ m 约45 μ m的水相的乳液。2.如权利要求1所述的方法,其中所述乳液包含至少约60、70、80、90、93、95、96、97、98或99体积%的液滴尺寸为约20 μ m 约45 μ m的水相。3.如权利要求1所述的方法,其中所述液滴尺寸为约15、18、20、22、25、27、四、32、35或40 μ m04.如权利要求1所述的方法,其中所述乳液包含至少约90体积%的液滴尺寸为约15-40 μ m的水相。5.如权利要求1所述的方法,其中所述食用油是粗制油或水脱胶油。6.如权利要求1所述的方法,其中所述食用油包括NeochlorisοIeoabundans油、二形棚藻(Scenedesmus dimorphus)油、目艮虫藻(Euglena gracilis)油、三角揭指藻(Phaeodactylum tricornutum)油、颗石藻(Pleurochrysis carterae)油、zj、定 Ii更金藻(Prymnesium parvum)油、扁藻(Tetraselmis chui)油、四 y 藻(Tetraselmissuecica) ^> § ^ ^ ^ ^ (Isochrysis galbana) ^> it it iS (Nannochloropsissalina)油、(Botryococcus braunii)油、才土氏· (Dunaliellatertiolecta)油、微球藻(Nannochloris)油、螺旋藻(Spirulina)油、绿藻(Chlorophycease)油、硅藻(Bacilliarophy)油、巴西莓油、杏仁油、巴巴苏仁油、黑加仑籽油、琉璃苣籽油、芥花油、腰果油、蓖麻油、椰子油、香菜油、玉米油、棉籽油、海甘蓝油、亚麻仁油、葡萄籽油、榛子油、其他坚果油、大麻籽油、麻风树油、荷荷芭油、亚麻籽油、夏威夷核果油、芒果仁油、绣线菊油、芥末油、牛蹄油、橄榄油、棕榈油、棕榈仁油、棕榈油精、花生油、山核桃油、松仁油、开心果油、罂粟籽油、菜籽油、米糠油、红花油、油茶油、芝麻油、乳木果油、大豆油、葵花籽油、妥尔油、tsiAaki油、核桃油、经由遗传修饰的微生物(GMO)或传统的“育种”而具有改变的脂肪酸组成的“天然”油种类如高油酸、低亚麻酸或低饱和油(高油酸芥花油、低亚麻酸大豆油或高硬脂酸葵花籽油)或其共混物。7.如权利要求1所述的方法,其中使用高剪切混合器进行步骤i-a)和/或i-b)中的混合,所述高剪切混合器的尖端速度至少为约1400cm/s、1600cm/s、I800cm/S、2000cm/S、2100cm/s、2300cm/s、2500cm/s、3000cm/s 或 3500cm/so8.如权利要求1所述的方法,其中使用尖端速度为约2300cm/s的高剪切混合器进行步骤i-a)和/或i-b)中的混合。9.如权利要求1所述的方法,其中所述酸选自磷酸、乙酸、柠檬酸、酒石酸、琥珀酸和其‘昆合物。10.如权利要求1所述的方法,其中所述酉堯是柠檬酸。11.如权利要求1所述的方法,其中步骤L_a)中的酸性混合物的pH为约1 约4。12.如权利要求1所述的方法,其中所述酉I的混合持续约1分钟至约5小时。13.如权利要求1所述的方法,其中步骤L_b)中的反应混合物的pH为约6 约9。14.如权利要求1所述的方法,其中所述碱选自氢氧化钠、氢氧化钾、硅酸钠、碳酸钠、碳酸钙和其组合。15.如权利要求1所述的方法,其中所述碱的混合持续约1分钟至约5小时。16.如权利要求1所述的方法,还包括水或酶脱胶而得到脱胶油的步骤。17.如权利要求1所述的方法,还包括酶脱胶的步骤。18.如权利要求16所述的方法,其中所述酶选自磷脂酶A、磷脂酶C、磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C或其组合。19.如权利要求16所述的方法,其中所述酶选自磷脂酶C、磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C或其组合。20.如权利要求16所述的方法,其中所述酶选自磷脂酶C、包含SEQIDNO :8的酶或其组合。21.如权利要求16所述的方法,其中所述酶包含SEQID NO :8。22.如权利要求16所述的方法,其中所述酶是具有SEQID NO :8的多肽。23.如权利要求16所述的方法,其中所述脱胶油含有小于约30ppm的磷、小于约20ppm的磷、小于约15ppm的磷、小于约IOppm的磷、小于约7ppm的磷、小于约5ppm的磷或小于约3ppm的磷。24.一种水合食用油中的非水化磷脂的方法,包括i-a)混合水性酸与食用油,得到pH小于约4的酸性混合物;和i-b)混合碱与所述酸性混合物,得到pH约6-9的反应混合物,其中步骤i-a)和/或i-b)中的混合产生包含平均液滴尺寸为约15-35 μ m的水相的乳液。25.如权利要求M所述的方法,其中所述平均液滴尺寸为约15、18、20、22、25、27、四或35 μ m026.如权利要求25所述的方法,其中所述平均液滴尺寸为约15、18、20、22或25口!11。27.如权利要求沈所述的方法,其中所述平均液滴尺寸为约20μ m。28.一种获得磷脂的方法,包括i-a)混合水性酸与食用油,得到pH小于约4的酸性混合物;i-b)混合碱与所述酸性混合物,得到pH约6-9的反应混合物,其中步骤i-a)和/或i-b)中的混合产生包含至少约60体积%的液滴尺寸为约15 μ m 约45 μ m的水相的乳液;i-c)混合磷脂酶;和i-d)分离磷脂。29.如权利要求观所述的方法,其中所述磷脂酶是磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C。30.如权利要求观所述的方法,其中所述酶是具有SEQID NO :8的多肽。31.如权利要求观所述的方法,其中所述磷脂包括磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰丝氨酸(PQ、磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酸(PA)、溶血磷脂酰胆碱(LPC)、溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)、溶血磷脂酰丝氨酸(LPQ、溶血磷脂酰肌醇(LPI)、溶血磷脂酸(LPA)、胆碱(C)、乙醇胺(E)、丝氨酸⑶,肌醇(I)或其组合。32.如权利要求四所述的方法,其中所述磷脂是磷脂酰肌醇。33.一种获得磷脂的方法,包括i-a)混合水性酸与食用油,得到pH小于约4的酸性混合物;i-b)混合碱与所述酸性混合物,得到pH约6-9的反应混合物,其中步骤i-a)和/或i-b)中的混合产生包含平均液滴尺寸为约15-35 μ m的水相的乳液;i-c)混合磷脂酶;和i-d)分离磷脂本文档来自技高网...
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【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员:C·L·G·戴顿,弗拉维奥·达席尔瓦·加里亚多,纳尔逊·巴顿,蒂姆·希契曼,乔纳森·里昂,艾琳·奥多诺休,马克·A·沃尔,
申请(专利权)人:邦奇油类公司,
类型:发明
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