本发明专利技术公开了一种用于毛细管培养法检测或筛选微生物的装置，包括毛细管，所述毛细管为管径小于0.5cm、管长大于1cm的直管或弯管。进一步的，还包括检测管，毛细管的一端伸入检测管中。所述检测管上设有透气或不透气的密封盖，毛细管的一端穿过密封盖伸入检测管中。所述检测管的侧壁上设有平面贴壁，以方便与待检测样品的增菌容器内或外壁贴紧，防止脱落或丢失。所述检测管侧壁内或外设有磁铁。本发明专利技术的用于毛细管培养法检测或筛选微生物的装置，可以用于毛细管培养法检测或筛选微生物，大部分菌属的检测或分离时间由现有技术中的36～48小时缩短为12～24小时，具有快速、高效、省时省力、特异性好、敏感性强等优点。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种用于毛细管培养法检测或筛选微生物的装置。技术背景目前，国内外微生物检验过程中分离培养主要是预增菌、增菌、选择性平板分离培养的方法，上世纪七十年代，以酶底物法显色为基本原理的显色培养基的专利技术大大提高了致病菌分离培养的特异性和敏感性。其基本原理为选择性增菌，划线分散成单个菌体，单菌体生长为单菌落并分解显色底物显色，需要两步，且需要大量的培养基及有经验的人工划线技术，耗时36-48小时。而众所周知，在化学物质和生物大分子分离过程中，以色谱层析或电泳为基本原理的分离方法快速省时且敏感性、特异性、准确性都比较高。但由于微生物不具溶解性，无法进行分配，因此不可能利用色谱层析。而且由于微生物个体太大无法进行有效常规电泳，有些科学家摸索了高效毛细管电泳的效果，结果表明在分离致病性球菌，如葡萄球菌和链球菌以及大肠杆菌方面有一定的有效性，但受生长环境、条件和生长时期等多种因素的影响，同种微生物会表现比较大的荷质比差异性，导致重现性很低，大大限制了它的适用性。那么是否可以想一种办法间接模拟色层原理呢？就如数字模拟信号解决数字信号的问题。从文献分析，导管装入半固体琼脂，一端接种沙门氏菌，可以在毛细管另一端解离出具有鞭毛的沙门氏菌；或在一端接种某菌种，导管中若添加某化学物质，可以检测其对该物质的趋药性。因此可否设计以微生物的运动性或趋药性为基本动力(模拟色谱层析中的动力)，以选择性杂菌抑制剂为选择性基础物质(模拟色谱层析中的固相分配剂)，以半固体琼脂为载体(模拟色谱层析中液相分配剂)的基本方法，即把毛细管一端放入样品增菌液，混合菌体经过装有特异性比较强的选择性杂菌抑制剂的半固体琼脂毛细管，随着混合菌体向前生长移动会受到反复的抑制性选择，最终杂菌会被全抑制，理论上讲最后目标菌会被彻底释放到毛细管另一端，如此就类似化学成分在色谱中不断进行再分配的结果， 从而实现目标菌的快速高效分离。且从理论上分析，一大部分微生物具有鞭毛，具运动性； 其它微生物可以利用其趋药性，因此动力上能够保证；而且从目前选择性培养基，如科玛嘉类显色培养基的显色选择性来分析，对大多数致病微生物可以筛选到特异性比较强的选择性杂菌抑制物质。因此用毛细管选择性半固体培养法理论上可以分离大部分微生物。迄今为止，尚未见到有用毛细管培养法检测或筛选微生物的报道。
技术实现思路
针对上述现有技术，本专利技术提供了一种用于毛细管培养法检测或筛选微生物的装置，可用于检测或筛选微生物，大部分菌属的检测或分离时间由现有技术中的36 48小时缩短为12 M小时，具有快速、高效、省时省力、特异性好、敏感性强等优点。本专利技术是通过以下技术方案实现的一种用于毛细管培养法检测或筛选微生物的装置，包括毛细管，所述毛细管为管径小于0. 5cm、管长大于Icm的直管或弯管。所述毛细管的材质为玻璃、塑料、合成树脂或硅胶中的一种，材质要求硬质不透水，透气或不透气根据目标微生物好氧情况选定，优选使用透明材质，透明材质易于观察培养基装填效果，也便于终点判定。最优选耐高压硬质无毒透明的材料。所述毛细管为管径为0. 5 2mm、长度为2 20cm的直管或弯管。所述用于毛细管培养法检测或筛选微生物的装置，还包括检测管，毛细管的一端伸入检测管中。所述检测管上设有透气或不透气的密封盖(塞)，毛细管的一端穿过密封盖(塞) 伸入检测管中。所述检测管的侧壁上设有平面贴壁，以方便与待检测样品的增菌容器内或外壁贴紧，防止脱落或丢失，检测时用胶带或磁条将此平面固定于增菌容器内或外壁上。所述检测管侧壁内或外设有磁铁，使用时，该磁铁可以通过与含铁的物品或其它磁铁的配合，而将检测管固定住，防止脱落或丢失。使用时，向毛细管中填装培养基(培养基为半固体培养基或液体培养基或固体培养基；培养基中含有供目标微生物生长的营养物质；培养基中含有或不含有选择性杂菌抑制剂或/和目标微生物显色剂)，然后将填装后的毛细管的一端接入待检样本或待检样本的稀释液或增菌液中，或将待检样本接入毛细管的一端(当有检测管时，同时向检测管中加入培养基，并将毛细管的另一端接入检测管的培养基中)，培养0 < t < 后，进行以下操作之一①当培养基中含有选择性杂菌抑制剂时，直接观察毛细管的另一端，判断是否有菌生长，若有菌生长，则证明待检样本中含有目标微生物，若无，反之；②当培养基中含有选择性杂菌抑制剂时，直接观察毛细管的另一端，判断是否有菌生长，若有菌生长，则证明待检样本中含有目标微生物，将菌接种至目标微生物的常规选择培养基上进行进一步的分离纯化或培养，若无，反之；③当培养基中含有目标微生物显色剂时，直接观察毛细管的另一端，判断是否有特异显色反应，若有特异显色反应，则证明待检样本中含有目标微生物，若无，反之；④当培养基中不含有目标微生物显色剂，含有或不含有选择性杂菌抑制剂时，观察毛细管另一端是否有菌生长，若有菌生长，则将毛细管的另一端接入含有目标微生物显色剂的半固体培养基或液体培养基或固体培养基中(检测管中)，培养后，观察是否有特异显色反应，若有特异显色反应，则证明待检样本中含有目标微生物，若无，反之；若无菌生长，则证明待检样本中不含有目标微生物；⑤当培养基中不含有目标微生物显色剂，含有或不含有选择性杂菌抑制剂时，观察毛细管另一端是否有菌生长，若有菌生长，则将菌接种至目标微生物的常规选择培养基上进行纯化或培养；⑥当培养基中含有或不含有选择性杂菌抑制剂或/和目标微生物显色剂时，也可将另一端接入一组液体或半固体生化鉴定培养基(检测管中)，对目标微生物进行鉴定，或者多根毛细管另一端分别接入一种液体或半固体生化鉴定培养基形成一组生化鉴定实验。所述毛细管为管径小于0. 5cm、管长大于Icm的直管或弯管管径小于0. 5cm，管径比较小，填装量少，节约培养基且易于通过虹吸装填，而且在培养过程中切面横向扩散影响4小；管长大于1cm，管的长度选取依据具体的目标微生物和选择性抑制剂对目标微生物和杂菌的分离能力通过实验验证来确定，达到既能较好的选择性分离目标微生物，又能在较短时间内分离的最佳方案；管的形状根据实验的便利性可以进行一定程度的弯曲，以不影响实验结果为前提。所述填装毛细管采用无菌虹吸法或灌注法。所述目标微生物为带有或不带有鞭毛的细菌。所述供目标微生物生长的营养物质选自能支持或促进微生物生长的碳源、氮源、 生长因子和无机盐中的一种或任几种。所述目标微生物的选择性显色剂为目标微生物的特异生化酸碱指示剂、生化鉴定试剂或/和酶底物显色剂，作用为使目标微生物特异生化反应通过颜色反应显示出来。生化鉴定培养根据目标菌生化特征选择项目，一般一种目标微生物需要一组生化反应鉴定， 因此生化鉴定培养基需要多管形成一组，有些生化底物可以几个反应在一管内完成。所述选择性杂菌抑制剂为对目标微生物无抑制作用、对非目标微生物有抑制作用的试剂，或对目标微生物的抑制作用小于非目标微生物的抑制作用的试剂，或对目标微生物的生长促进作用相对大于对非目标微生物的生长作用的试剂；具体应用时，根据目标微生物选择合适的选择性杂菌抑制剂。所述选择性杂菌抑制剂选自胆盐、脱氧胆酸钠、碘、碘化钾、煌绿、孔雀绿、亚硒酸盐、胱氨酸、质量浓度在以上的氯化钠溶液、吖啶黄、萘啶酮酸、月桂基硫酸盐、氯化锂、 结晶紫、中性本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：刘岚铮，李健，刘辉，胡光春，张济，时玉雯，
申请(专利权)人：济南市疾病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：
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