用于生化分析仪定量检测尿碘的试剂及尿碘检测方法技术

技术编号:7438299 阅读:489 留言:0更新日期:2012-06-16 00:59
本发明专利技术公开了一种用于生化分析仪定量检测尿碘的试剂及尿碘检测方法。该试剂由以下主要试剂成分组成:消解液-过硫酸铵溶液;试剂R1-亚砷酸或三氧化二砷溶液;试剂R2-硫酸铈铵或硫酸铈溶液;碘标准溶液-碘化钾(钠)或碘酸钾(钠)溶液。该检测方法的主要步骤为:选用上述检测试剂;消解尿样;设置生化分析仪参数;用生化分析仪测定。本发明专利技术的检测方法自动化程度高,人为误差小,试剂用量少,检测时间短。使用生化分析仪来检测尿碘,拓展了该仪器的检测项目,特别适合已备有生化分析仪的医疗单位使用,满足了临床检测要求快速出结果和检测自动化的需求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医用检测试剂及检测方法,特别是一种。
技术介绍
尿碘水平是评价人群碘摄入状况的重要指标,已被国内外广泛采用。当前,碘缺乏和碘过量已成为人们同等关注的公共卫生问题。尿碘检测已成为指导人群科学补碘的重要依据。尿碘检测是一项复杂的超微量分析技术。目前,能够较准确测定尿碘且被国内外采用的方法有如下三种(1).等离子色谱质谱法(ICP-MS),以下简称方法(1)。该方法使用等离子色谱仪, 在近10000°C的高温下将尿样中的碘离子气化。根据离子的荷质比不同,通过离子色谱检测器检测碘的含量。美国疾病预防控制中心及欧洲部分国家采用此方法。此方法准确度高, 但仪器昂贵,约160万元人民币/台,不适合发展中国家广泛采用。(2).砷铈催化分光光度法,以下简称方法O)。该方法根据碘催化砷铈氧化还原反应的原理,使用分光光度计动态测定试液中剩余的高价态铈的含量来间接测定碘。我国及世界上大多数国家采用此方法,是我国卫生行业标准方法(WS/T 107-2006)。但该方法消解过程需要使用恒温消解仪,反应过程需要使用超级恒温水浴箱,测定过程需要使用分光光度计,且操作时为了使每个样品的反应时间一致,需要准确间隔30秒加一次试剂,测定时也同样需要准确间隔30秒用分光光度计测定一次,若错漏一次,则前功尽弃。因此,步骤繁琐,人为负担重,检测时间长,检测60份尿样需时4-5小时,试剂用量大,特别是剧毒化学品砷的用量大(是本专利技术砷的用量的20倍),对人体会造成伤害。(3).砷铈催化计时测定法,以下简称方法(3)。该方法是本专利技术人刘列钧的已授权专利技术专利(专利号01133682. X)。该方法通过在常温下使用强氧化剂消解尿样,根据碘催化砷铈氧化还原反应的原理,使用指示剂指示反应终点,用秒表记取反应时间,根据反应时间来计算尿碘含量。该方法对于医院(特别是大型医院)开展尿碘检测项目,因操作步骤全是手工操作,检测时间较长,且需用肉眼判断反应终点,实验结果的客观性不强,故大多数医院还不愿接受。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种能简捷快速准确检测出尿中碘含量的。本专利技术的目的由以下技术方案来完成本专利技术所用的检测试剂盛装于试剂盒内,其试剂由以下主要试剂成分组成(1)消解液-过硫酸铵溶液,浓度范围为0. 3-2. 0mol/Lo(2)试剂Rl-亚砷酸或三氧化二砷溶液,其中砷浓度范围为0. 01-0. lmol/L。(3)试剂硫酸铈铵或硫酸铈溶液,其中铈浓度范围为0. 001-0. lmol/L。(4)系列碘标准溶液-碘化钾(钠)或碘酸钾(钠)溶液,碘含量为0-500 μ g/ L0所述主要试剂成分及含量的优选值为(1) ·消解液-过硫酸铵溶液{c = 1. 3mol/L};(2) ·试剂 R1-亚砷酸溶液;(3) ·试剂 R2-硫酸铈铵溶液;(4).系列碘标准溶液-碘酸钾溶液,碘含量分别为0,50,100,200,300,400μβ/L0运用本专利技术的检测试剂进行尿碘检测的方法,其主要步骤为1.选用上述检测试剂;2.消解;准确吸取系列碘标准溶液、尿样各50-500 μ 1于试管中,各加100-1000 μ 1消解液,置于电热干燥箱中100-110°c消解1小时;将消解完毕的样品冷却至室温;3.设置生化分析仪测定参数,3. 1波长单波长,在400_600nm范围内选定一种波长;3. 2样品、试剂量消解后的系列碘标准溶液、样品5-200 μ L,试剂R1 10-300 μ L, 试剂& 10-250 μ L,在各自的用量范围内选定一种用量;3. 3反应温度在30_40°C范围内选定一种温度;3. 4分析方法终点法或速率法;3. 4. 1 一点终点法加入试剂R1反应0-2min,测定加入试剂&后反应3-20min范围内选定的时间点的光密度值;3. 4. 2两点速率法加入试剂R1反应0-2min,连续测定加入试剂民后在3-15min 范围内选定的时间段的光密度值变化率;3. 5校准方法标准曲线法,使用仪器上的对数模式(l0git-l0g4p)或样条函数 (spline)拟合标准曲线;3. 6反应方向负反应;4.测定,将消解后的系列碘标准溶液、样品、试剂R1、试剂&分别放置于生化分析仪相应的标准位、样品位和试剂位中,按步骤“3”所述设置的生化分析仪测定参数,启动仪器进行自动测定。所述检测方法中的样品、试剂用量及生化分析仪测定参数的优选值为(1)消解,准确吸取系列碘标准溶液、尿样各300 μ 1于试管中,各加600 μ 1消解液,置于电热干燥箱中于100°c消解1小时;(2)设置生化分析仪测定参数,(2. 1)波长:405nm ;(2. 2)样品、试剂量消解后的系列碘标准溶液、样品各25 μ L,试剂R1 120 μ L,试齐[J& 36μ L ;(2. 3)反应温度:37°C ;(2. 4)分析方法两点速率法,加入试剂R1反应Ο-aiiin,连续测定加入试剂&后 3min时间段内的光密度值的变化率;(2. 5)校准方法标准曲线法,使用仪器上的对数模式(l0git-l0g4p)拟合标准曲线。本专利技术的原理使用过硫酸铵消解尿样,分解尿样中干扰碘测定的物质,利用碘催化砷铈反应的原理,碘含量越高反应速度越快,试液中剩余的黄色铈G+)离子越少。使用生化分析仪在规定的反应时间后测定试液中剩余的铈G+)的光密度值(一点终点法)或在规定的时间段连续监测试液的光密度值的变化(两点速率法),根据光密度值或光密度值变化率与碘含量成定量关系,通过标准曲线法计算尿碘浓度。本专利技术的有益效果本专利技术的消解尿样使用控温烤箱,样品消化后再不需要任何中间步骤,直接使用生化分析仪自动测定,人工操作只有加样消化一步,其余操作步骤全由仪器完成(包括给出测定结果)。本专利技术与
技术介绍
中的方法( 相比,使用的仪器和操作步骤完全不同,本专利技术的自动化程度高,人为误差小,试剂用量少,检测时间短,60份样品仅需1小时10分钟。 其创新点在于通过调整主要反应试剂砷铈的比例,加之辅助试剂的作用,使碘的催化反应速度按照生化分析仪固有的反应曲线方程进行,创建了砷铈催化反应与生化分析仪测定程序的良好接口,实现了利用生化分析仪能自动快速检测尿碘的目的。本专利技术与
技术介绍
中的方法C3)相比,除使用的化学反应原理相同外,其他各方面都不相同或类似。本专利技术主要是针对医院开展尿碘检测项目而研制的,原因是生化分析仪是医院常规使用的仪器,用于临床其他多种生化指标的检测,普及程度高。本专利技术使用生化分析仪来检测尿碘,拓展了该仪器的检测项目,特别适合已备有生化分析仪的医疗单位使用,满足了临床检测要求快速出结果和检测自动化的需求,具有广泛的应用前景。具体实施例方式下面结合实施例对本专利技术作进一步描述,但实施例不应理解为对本专利技术的限制。1.试剂组成,(1)消解液过硫酸铵溶液{c = 1. 3mol/L};(2)试剂 R1 亚砷酸溶液;(3)试剂 & 硫酸铈铵溶液;(4)系列碘标准溶液碘酸钾溶液,碘含量分别为0,50,100,200,300,400 μ g/L。2.消解,准确吸取系列碘标准溶液、尿样各300 μ 1于试管中,各加600 μ 1消解液,置于电热干燥箱中100°c消解1小时;消解时电热干本文档来自技高网
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【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:刘列钧
申请(专利权)人:武汉众生生化技术有限公司
类型:发明
国别省市:

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