脱氧野尻霉素的一种纯化方法技术

本发明专利技术涉及一种从植物内提取化合物的纯化技术，从天然产物桑叶中提取分离高纯度1-脱氧野尻霉素，同时精制获得桑叶多糖的方法，主要包括以下步骤：原料预处理后溶于乙醇溶液，超声波提取，提取液浓缩后过阳离子树脂，洗脱液浓缩后经有机溶剂萃取、重结晶、凝胶过滤层析后制备获得1-脱氧野尻霉素精制品，纯度不低于98.5％。本工艺操作简单，成本低，环境污染低，设备典型，材料易于获得，适合大规模生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物与新医药
，涉及从植物中提取活性化合物，即从桑叶中提取分离高纯度的1-脱氧野尻霉素及高附加值副产物桑叶多糖。
技术介绍
1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirimycin，以下简称“1-DNJ”)是一种多羟基哌啶生物碱，因其结构类似单糖也称为亚胺基糖，其化学名称是3，4，5-三羟基-2-羟甲基四氢吡啶，化学结构式如附图说明图1所示，分子式为C6H13NO4，分子量为163。I-DNJ具有多种生物活性，可用于治疗糖尿病、肥胖症、病毒感染等疾病，同时可抑制肿瘤，对α-葡萄糖淀粉酶有抑制作用，并可用作载体用于高纯度麦芽糖的酶合成。权利要求1.，其特征在于(1)桑叶药材除杂，干燥后粉碎，过筛，得提取用桑叶粉末；(2)原料粉末在乙醇溶液内浸泡后，超声波提取，分离固液相后获得提取液，提取液浓缩并回收乙醇，离心，去沉淀；(3)将步骤( 得到的的离心浓缩液过阳离子树脂层析柱上样后用蒸馏水冲洗至流出液无色为止，用氨水洗脱，收集PH 9-12段洗脱液，浓缩至小体积；(4)将步骤(3)得到的浓缩液调节pH值至7.0左右，以氯仿萃取，留水相；(5)将步骤的水相用正丁醇萃取，保留正丁醇相，浓缩后收集析出固体；(6)将步骤(5)析出的固体用无水乙醇进行重结晶；(7)将步骤(6)获得的晶体溶于水后，过凝胶过滤层析柱，流出液浓缩、干燥获得1-脱氧野尻霉素精制品，纯度不低于98. 5%。2.如权利要求1中所述的，其特征在于，步骤(1)所述的桑叶干燥粉碎后过30 50目筛。3.如权利要求1中所述的，其特征在于，步骤( 所述乙醇的浸泡浓度为60% 65%，浸泡时间为30 40min。4.如权利要求1中所述的，其特征在于，步骤( 所述超声波的提取功率为125W，温度70°C，提取次数为2 3次，每次30min。5.如权利要求1中所述的，其特征在于，步骤C3)中所述的阳离子树脂为AB-8、732H、D152，氨水的洗脱浓度为0. 25 0. 30mol/L，洗脱速度为1 2mL/min。6.如权利要求1中所述的，其特征在于，步骤(4)所述 PH值调节液为盐酸、醋酸，氯仿与浓缩液的体积比为1 2-1 4，萃取次数为2 4次。7.如权利要求1所述的，其特征在于，步骤(5)所述正丁醇与水相的体积比为1 2-1 4，萃取次数为4 6次。8.如权利要求1所述的，其特征在于，步骤(6)所述无水乙醇重结晶的次数为2 3次。9.如权利要求1所述的，其特征在于，步骤(7)所述凝胶过滤层析柱Superose 4B, Sephdex 20等，纯水洗脱。10.，其特征在于制备获得1-脱氧野尻霉素的同时可制备获得桑叶多糖(1)将权利要求1步骤( 超声波提取后分离获得的固相加入2-3倍体积的蒸馏水，搅拌均勻后固液分离获得提取液；(2)将权利要求10步骤(1)获得提取液浓缩后加入乙醇、丙酮或异丙醇萃取，除去脂溶性部分，保留水相；(3)将权利要求10步骤⑵获得水相内加入乙酸乙酯或石油醚萃取，去除叶绿色，保留水相；(4)将权利要求10步骤C3)获得水相内加入无水乙醇，使其终浓度达到80%，搅拌均勻后4°C下静置48h，抽滤，获得沉淀物；(5)将权利要求10步骤(4)获得沉淀物加水溶解后4°C下加入三氯乙酸，终浓度达到20%，搅拌20min后离心，保留液相，除蛋白；(6)将权利要求10步骤( 获得液相过AB-8大孔径吸附树脂，蒸馏水洗脱，洗脱液浓缩后加活性炭脱色，脱色液加无水乙醇终浓度达到80%以上，搅拌均勻后4°C下静置48h， 抽滤，沉淀分别用无水乙醇、丙酮各洗3-5次，得白色沉淀；(7)将权利要求10步骤(6)获得沉淀溶解透析(分子量11000以上)，干燥，获得白色粉末，多糖含量高于90%。全文摘要本专利技术涉及一种从植物内提取化合物的纯化技术，从天然产物桑叶中提取分离高纯度1-脱氧野尻霉素，同时精制获得桑叶多糖的方法，主要包括以下步骤原料预处理后溶于乙醇溶液，超声波提取，提取液浓缩后过阳离子树脂，洗脱液浓缩后经有机溶剂萃取、重结晶、凝胶过滤层析后制备获得1-脱氧野尻霉素精制品，纯度不低于98.5％。本工艺操作简单，成本低，环境污染低，设备典型，材料易于获得，适合大规模生产。文档编号C08B37/00GK102491938SQ20111042278公开日2012年6月13日 申请日期2011年12月16日 优先权日2011年12月16日专利技术者殷红 申请人:北京贯虹科技集团有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：殷红，
申请(专利权)人：北京贯虹科技集团有限公司，
类型：发明
国别省市：