用辛德毕斯病毒包膜糖蛋白假型化的慢病毒载体制造技术

本发明专利技术提供了慢病毒载体粒子，其包含辛德毕斯病毒E2糖蛋白变体和包含目标序列的慢病毒载体基因组。一种慢病毒载体粒子，其包含：(a)包膜，其包含辛德毕斯病毒E2糖蛋白变体；和(b)慢病毒载体基因组，其包含目标序列；其中所述E2糖蛋白变体促进树突状细胞由慢病毒载体粒子的感染，并且其中与参考序列(HR菌株)相比，所述E2糖蛋白变体与硫酸乙酰肝素的结合降低。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利申请一般涉及靶基因递送，并且更具体地说涉及假型化慢病毒的用途，所述假型化慢病毒包含靶向树突状细胞并因此能用于树突状细胞接种的包膜。
技术介绍
树突状细胞(DC)是用于起始和控制免疫反应的基本抗原呈递细胞。DC可俘获和加工抗原，从外周器官迁移到淋巴器官，并以主要组织相容性复合体(MHC)限制性方式将抗原呈递至静止T细胞。这些细胞来源于骨髓(BM)并且显示树突状形态和高迁移率。 DC作为特化的抗原呈递细胞(APC)的发现已促进了在基于DC的免疫/接种策略方面的尝试，所述策略涉及用特异抗原体外加载DC (Banchereau和I^alucka，Α. K. 2005. Nat. Rev. Immunol. 5 :296-306 ；Figdor 等 2004. Nat. Med. 10 :475-480)。然而，所有这些尝试都涉及患者特定治疗的劳动强度大的准备，所述治疗包括了用特异抗原离体加载自体DC，然后将其施用于患者。替代策略是利用基于重组病毒的载体作为将编码指定抗原的基因直接递送至宿主细胞的机理。在这种情况下，经由引入所需的适应性免疫反应，所表达的基因产物提供了治疗益处。然而，实本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.07.24 US 61/228,4911.一种慢病毒载体粒子，其包含(a)包膜，其包含SEQID NO 1的辛德毕斯病毒E2糖蛋白，其中160X不存在或为不同于谷氨酸的氨基酸，或SEQ ID NO :1的变体，所述变体与SEQ ID NO :1具有至少80%序列同一性并且其中160X不存在或为不同于谷氨酸的氨基酸，其能够感染树突状细胞；其中E2 不是与辛德毕斯病毒E3的融合蛋白的部分；和(b)慢病毒载体基因组，其包含目标序列。2.根据权利要求1所述的慢病毒载体粒子，其中所述E2糖蛋白或变体与DC-SIGN结合。3.根据权利要求1或权利要求2所述的慢病毒载体粒子，其中所述160X不存在或为甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸或异亮氨酸，诸如选自甘氨酸、缬氨酸、亮氨酸或异亮氨酸。4.根据权利要求1或权利要求2所述的慢病毒载体粒子，其中160X是甘氨酸。5.根据权利要求1、2、3或4所述的慢病毒载体粒子，其中所述E2糖蛋白变体的至少一个氨基酸改变以减少其净正电荷。6.根据权利要求5所述的慢病毒载体粒子，其中所述改变的氨基酸选自由SEQID NO 1的赖氨酸70、赖氨酸76或赖氨酸159组成的组，并且所述取代任选独立地选自谷氨酸或天冬氨酸。7.根据权利要求1、2、3、4、5或6所述的慢病毒载体粒子，其中所述E2变体序列是SEQ ID No. 2、3或4 ；(变体1、2和幻，任选地包含一个或多个其它取代、插入或缺失。8.根据权利要求1、2、3、4、5、6或7所述的慢病毒载体粒子，其为一种变体，其中SEQ ID NO 1的残基71-75的序列无变化或具有不影响所述变体感染DC的能力的一个或两个取代，但不改变这个区内的氨基酸的数目。9.根据前述权利要求中任一项所述的慢病毒载体粒子，其中所述目标序列编码肿瘤特异性抗原或病毒衍生抗原，诸如HIV或SIV抗原。10.根据前述权利要求中任一项所述的慢病毒载体粒子，其中所述粒子的IU是至少 105/mL。11.一种在包含辛德毕斯病毒E2糖蛋白变体的包膜中假型化的慢病毒载体基因组，所述基因组包含目标序列，其中所述E2糖蛋白变体促进树突状细胞由所述慢病毒载体粒子的感染；并且其中所述E2糖蛋白变体具有根据以上权利要求1至10所述中任一项的所定义的氨基酸序列。12.一种用于制备假型化慢病毒载体粒子的慢病毒载体包装系统，其包含(i)第一核酸分子，其编码SEQ ID NO 1的辛德毕斯病毒E2糖蛋白，其中160X不存在或为不同于谷氨酸的氨基酸，或能够感染树突状细胞的辛德毕斯病毒E2糖蛋白的变体，所述变体与SEQ ID NO :1具有至少80%序列同一性并且...

【专利技术属性】
技术研发人员：詹姆士·M·艾伦，尼尔·S·凡霍芬，李金中，德瑞克·D·史隆，小汤玛士·W·杜班斯基，
申请(专利权)人：詹姆士·M·艾伦，尼尔·S·凡霍芬，李金中，德瑞克·D·史隆，小汤玛士·W·杜班斯基，
类型：发明
国别省市：