一种应用尺寸排阻层析制备金银花提取物的方法技术

本发明专利技术涉及一种中药制备方法，尤其涉及一种中药有效成分的提取纯化方法，具体涉及一种应用尺寸排阻层析制备金银花提取物的方法，包括水煮预提取、微滤粗分离和尺寸排阻层析精制等步骤，可以得到绿原酸含量70％以上的金银花提取物。采用尺寸排阻层析制备金银花提取物，可显著提高金银花提取物中有效成分的含量，提高绿原酸的转移率，不仅可以节约药材成本，更能简化工业生产步骤，操作简单，能够提供更有利于工业生产地的工艺条件，并确保工艺的稳定性和安全性，使这一传统中药尽可能发挥其功效。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种中药制备方法，尤其涉及一种中药有效成分的提取纯化方法，具体涉及。
技术介绍
金银花为忍冬科植物忍冬Lonicera japonica Thunb.、红腺忍 Lonicerahypoglauca Miq. > ill IB Lonicera confuse DC. 5 ^ tt / Loniceradasytyla Rehd.的干燥花蕾或带初开的花，含有有机酸类、三萜皂苷类、黄酮及其苷类、环烯醚萜苷类、挥发油等成分。金银花具有抑菌、抗病毒、解热、抗炎、保肝、止血、抗氧化、免疫调节等作用。目前认为金银花中主要有效成分为绿原酸类化合物。绿原酸其别名咖啡鞣酸，通常以其含量高低来评价金银花质量的优劣。金银花提取、精制工艺多以绿原酸类化合物为考察指标。目前从金银花中提取有机酸类成分的方法通常采用温浸法、水煮法、稀醇提取和酸醇提取等，纯化方法多采用醇沉法、水醇法、石硫醇法、萃取法、大孔树脂吸附法等；其中醇沉法和水沉法只能达到初步纯化的目的，其收膏量大，有机酸含量低。石硫法、萃取法及大孔树脂吸附法分别单独应用对一些要求较高的制剂也还存在着一些不足，比如， 石硫法可能带入一些金属离子，萃取法色素较多，提取物粘度大，使制剂颜色较深，大孔树脂吸附法需要反复处理，操作麻烦，重现性较差，并且还存在有机残留问题，这些直接影响了制剂的安全性和稳定性。中国专利申请文件申请号200810043051. 7公开了 “一种应用膜过滤技术制备金银花提取物的方法”应用膜过滤技术提取金银花中有机酸类成分，提取物中绿原酸含量可达70%，转移率92%，但是膜过滤，存在需多次冲洗膜、处理时间长、膜容易堵等缺点。
技术实现思路
本专利技术提供，用于解决目前金银花提取工艺中工艺成本高、制剂工艺稳定性差、加工时间长等技术问题，本专利技术通过如下技术方案实现本专利技术提供一种金银花提取物的制备方法，该方法包括以下步骤(1)预提取将金银花药材破碎成2_3mm的小段，加入药材重量6_15倍的水煎煮 1-1. 5小时，滤取药液，药渣再加药材重量4-8水煎煮0. 5-1小时，滤取药液，弃去药渣；合并两次药液，将药液浓缩，冷却至室温，得金银花预提液；(2)粗分离将金银花预提液离心10-20分钟，转速4000-6000转/分钟，取上清液，用微滤膜处理，控制流速为5 lOml/min，并用水进行洗滤，合并滤液，得粗提物；(3)精制将粗提物用水进行尺寸排阻层析分离，控制流速1 5ml/min，减压浓缩，真空干燥，即得金银花提取物。步骤(1)预提取中将药材破碎可以提高提取效率，缩短药材煎煮的时间，煎煮过程中控制温度，保持溶液微沸即可。步骤( 中所使用的微滤膜微滤膜规格为0. 42-0. 65微米，流速为5 lOml/min， 并进行2-5次的蒸馏水或纯化水洗滤，保证绿原酸等有效成分尽可能透过膜层。步骤(3)中所使用的层析介质为可在分子量1000-4000范围内进行分离的介质， 流速为1 5ml/min，收集绿原酸等有效成分。浓缩时采用减压浓缩，干燥采用真空干燥，温度均控制在50-70°C，以避免绿原酸等有效成分的受热分解。本专利技术具有以下有益效果将尺寸排阻层析这种高效分离技术应用于金银花提取物制备中，利用层析介质的多孔性，能够有效地分离溶液中的各种微粒、胶体以及大分子溶质，以达到浓缩或净化除杂的目的。与通常的分离方法相比，尺寸排阻层析具有不必经过相的转换、不需要添加化学试剂、介质能多次重复利用等优点。采用尺寸排阻层析制备金银花提取物，金银花提取物中有效成分的含量、绿原酸的转移率高，同时简化工业生产步骤，操作简单，能够提供更有利于工业生产地的工艺条件，并确保工艺的稳定性和安全性，使这一传统中药尽可能发挥其功效。具体实施例方式实施例1称取金银花500g，加水3000ml微沸煎煮1小时，过滤，药渣加水4000ml微沸煎煮 1.0小时，过滤，合并滤液，得到预提液。取预提液，60°c减压浓缩至比重为1.05(60°C )， 4500转/分钟的速度离心15分钟，取上清液，过微滤膜(0. 65微米)，控制流速5ml/min，用蒸馏水洗滤3次，每次IOOml ；合并滤液，得粗提物。将粗提物进料至kphadex LH-20层析柱(CV = 500ml)控制流速为5ml/min，用水冲洗，收集小分子洗脱组分，将其60°C减压浓缩至比重为1. 2 (600C )，真空干燥，得到金银花提取物干粉。提取物中绿原酸含量为78%。实施例2称取金银花500g，加水7500ml微沸煎煮1小时，过滤，药渣加6倍水2000ml微沸煎煮0. 5小时，过滤，合并滤液，得到预提液。取预提液，60°C减压浓缩至比重为1. 05(60°C )， 6000转/分钟的速度离心10分钟，取上清液，过微滤膜(0. 45微米)，控制流速lOml/min， 用蒸馏水洗滤3次，每次IOOml ；合并滤液，得粗提物。将粗提物进料至kphacryl S-IOO HR层析柱(CV = 500ml)控制流速为5ml/min，用水冲洗，收集小分子洗脱组分，将其60°C 减压浓缩至比重为1. 2(60°C )，真空干燥，得到金银花提取物干粉。提取物中绿原酸含量为 72%。实施例3称取金银花500g,加水5000ml微沸煎煮1. 5小时，过滤，药渣加6倍水3000ml 微沸煎煮0.8小时，过滤，合并滤液，得到预提液。取预提液，60°C减压浓缩至比重为 1. 05 (60°C)，4000转/分钟的速度离心20分钟，取上清液，过微滤膜(0. 65微米)，控制流速 Sml/min，用蒸馏水洗滤3次，每次IOOml ；合并滤液，得粗提物。将粗提物进料至Superose 12 pg层析柱(CV = 500ml)控制流速为5ml/min，用水冲洗，收集小分子洗脱组分，将其 60°C减压浓缩至比重为1. 2(60°C )，真空干燥，得到金银花提取物干粉。提取物中绿原酸含量为74%。权利要求1.，该方法包括以下步骤(1)预提取将金银花药材破碎成2-3mm的小段，加入药材重量6-15倍的水煎煮1-1.5 小时，滤取药液，药渣再加药材重量4-8水煎煮0. 5-1小时，滤取药液，弃去药渣；合并两次药液，将药液浓缩，冷却至室温，得金银花预提液；(2)粗分离将金银花预提液离心10-20分钟，转速4000-6000转/分钟，取上清液，用微滤膜处理，控制流速为5 lOml/min，并用水进行洗滤，合并滤液，得粗提物；(3)精制将粗提物用水进行尺寸排阻层析分离，控制流速1 5ml/min，减压浓缩，真空干燥，即得金银花提取物。2.根据权利要求1所述的应用尺寸排阻层析制备金银花提取物的方法，其特征在于， 步骤O)中所使用的微滤膜规格为0. 42-0. 65微米，流速为5 lOml/min。3.根据权利要求1所述的应用尺寸排阻层析制备金银花提取物的方法，其特征在于， 在步骤O)中，微滤膜分离中用水洗滤2-5次。4.根据权利要求1所述的应用尺寸排阻层析制备金银花提取物的方法，其特征在于， 步骤(3)中所使用的层析介质为可在分子量1000-4000范围内进行分离的介质，流速为 1 5ml/min。全文摘要本专利技术涉及一种中药制备方法，尤其涉及一种中药有效成分的提取纯化方本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毕云英，
申请(专利权)人：威海天泓农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：