一种丹皮中各活性成分的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种丹皮中各活性成分的制备方法，是丹皮生药用25～45℃水中渗漉4～6倍体积，得到固相药渣和液相水提取液；固相加水室温浸泡后用水蒸气蒸馏法制取丹皮酚，液相水浸提液用凝胶过滤层析对浸提液进行分离，分别得到高分子量组分和低分子量组分，高分子量组分用醇沉法制取丹皮多糖，低分子量组分用大孔树脂吸附分离制取丹皮总苷。本方法从中药丹皮中综合提取得到丹皮酚、丹皮多糖和丹皮总苷，所得到的丹皮多糖纯度高于80％，丹皮总苷纯度高于80％，丹皮酚经纯化后纯度高于95％。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及天然药物领域，特别涉及。
技术介绍
中药丹皮是毛茛科植物牡丹(Paeonia suffruticosa Andr.)的干燥根皮，其性微寒，味辛，苦，凉，入心、肝、肾经，具有清热，凉血，和血，消淤的功效。丹皮酚(又称牡丹酚)、 丹皮多糖和丹皮总苷(主要包括芍药苷、苯甲酰芍药苷、丹皮苷、丹皮原苷、丹皮新苷等) 是丹皮中的有效活性成分，丹皮酚具有活血化瘀、清热凉血、消炎收敛、镇痛解痉等多方面的药理作用，在医药、日化、香料领域有着广泛的用途，例如做成霜剂外涂，对急性湿疹、脂溢性皮炎、接触性皮炎有明显疗效，添加入牙膏中能起到消炎杀菌、抗牙龈过敏的作用，还能消除面部粉刺，对蚊虫叮咬、夏季皮炎、痱子、头皮瘙痒，具有杀菌、祛痱、止痒的作用，此外，其对心血管系统和中枢神经系统等具有多方面的药理作用，可用于开发抗心血管系统疾病的药物；丹皮多糖具有较高的降血糖活性，可用于开发治疗糖尿病药物，具有重要的临床实践价值，还具有增强机体免疫功能及抗炎作用等，有效安全，无药理毒性；丹皮总苷具有较好的清除氧自由基和肝保护作用，可用于治疗肝炎，其免疫调节和抗炎作用，为其开发成为治疗类风湿性关节炎的新药提供可能。目前，对于丹皮的开发应用绝大部分局限于其中的某一种活性成分，所使用的技术手段较为陈旧繁琐，生产效率较低，能源消耗大，也浪费了原料丹皮，限制了在工业生产上的应用，且从丹皮中同时综合提取丹皮酚、丹皮多糖和丹皮总苷三种活性物质的专利、文献报道不多，为了提高得率，往往采用较为繁琐的方法，需要一定规模的仪器设备，限制了在工业生产中的应用。因此，建立一种简洁方便、成本较低、能够同时提取丹皮中三种活性物质、经济高效、节能环保的方法对实现中药现代化具有现实意义。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供一种低成本、高效率、节能环保地从丹皮中同时获得丹皮酚、 丹皮多糖和丹皮总苷各活性成分的制备方法。本专利技术是通过以下技术方案实现的包括渗漉、分离以及液相和固相的处理，所述的渗漉是将丹皮生药粉碎后，用25 45°C水渗漉4-6倍体积，然后分离得到固相药渣和液相水提取液；所述的液相处理是用凝胶过滤层析对提取液进行分离，根据出峰时间不同得到高分子量组分和低分子量组分，向高分子量组分中加入至少两倍体积浓度50 90wt% 乙醇，搅拌均勻后静置、沉淀，收集沉淀，冻干得到丹皮多糖；低分子量组分减压浓缩，浓缩液用大孔树脂吸附分离，先水洗脱4 10柱体积(BV)，后用浓度20 50wt%的乙醇洗脱 3 10BV，收集乙醇洗脱液，真空脱溶、干燥后得到丹皮总苷；所述的固相处理是药渣加水室温浸泡至少3小时，药渣与水的重量比不小于1 5，然后用2.0 2. ^g/cm3压力的蒸气进行水蒸气蒸馏，控制釜温110 120°C，收集蒸馏液并冷却，分离，收集沉淀得到丹皮酚。所述的大孔树脂选自D201或宝恩3号或ASD-8或AB-8或HP16型大孔树脂，优选型号为D201型大孔树脂。得到的各活性成分可通过重结晶等公知的方法进一步纯化。比如丹皮酚可用70% 乙醇溶液重结晶，即85°C水浴加热溶解，冷冻结晶至少一次。本专利技术的有益效果在于根据丹皮多糖与丹皮总苷分子量大小的差异(丹皮多糖分子量在IOkDa以上，丹皮总苷分子量小于IOOODa)，使用凝胶过滤层析从中药丹皮中获得丹皮多糖和丹皮总苷，实现了对药材的最大程度的利用，并且成本较低，适合工业化应用； 丹皮总苷纯化过程中使用D201型大孔树脂，成本较低、效果可靠；本专利技术改善了从中药丹皮中综合提取丹皮酚、丹皮多糖和丹皮总苷的方法，设计合理，成本低、易操作、得率高，适合工业化生产，应用前景广阔。具体实施例方式下面结合具体实施例对本专利技术作进一步详细说明。实施例一取丹皮生药100g，洗净烘干粉碎，装入渗漉柱中，柱体积90ml，用360mL 35°C温水，流速200ml/h，渗漉，分离得到药渣和提取液；提取液使用Superdex G50凝胶过滤层析分离，得到含丹皮多糖的大分子组分和含丹皮总苷的小分子组分；大分子组分使用3倍体积70%乙醇沉淀12小时，收集沉淀冷冻干燥，得丹皮多糖部分，小分子组分减压浓缩，馏出液保留，浓缩液上大孔树脂柱D201 (3. 5g芍药苷/kg湿树脂)，先用水冲洗6BV除杂，再用 30%乙醇洗脱4BV，收集洗脱液并减压蒸馏至无醇味，冷冻干燥，即得丹皮总苷部分；药渣加入9. 5倍水室温浸泡5小时后，于蒸馏罐内用2. 3kg/cm3压力的蒸气进行水蒸气蒸馏，控制釜温115°C (并入上一步浓缩透过液时的馏出液)，间歇加热，循环加水，至罐内排出的原药液体澄清并伴有少量珠点油花止，收集蒸馏液，冷却后沉淀得丹皮酚粗品；粗品使用3倍体积70%乙醇于85°C水浴中溶解，完全溶解后移至冷柜中结晶，第一次结晶时间较短，至刚有晶体析出，再重复以上操作3次至彻底结晶，得丹皮酚纯品；经液相色谱测定，丹皮多糖的得率为5.0%，纯度为83% ；丹皮总苷的得率为6.3%，纯度为(以芍药苷计)85. 3% ； 丹皮酚的提取率为4. 47 %，纯度为99 %。实施例二取丹皮生药500g，洗净烘干粉碎，装入渗漉柱中，柱体积450ml，用2700mL35°C温水，流速200ml/h，渗漉，分离得到药渣和提取液；提取液使用SuperdeX650凝胶过滤层析分离，得到含丹皮多糖的大分子组分和含丹皮总苷的小分子组分；大分子组分使用3倍体积 80%乙醇沉淀12小时，收集沉淀冷冻干燥，得丹皮多糖部分，小分子组分减压浓缩后上大孔树脂柱AB-8 (3. 5mg芍药苷/g湿树脂)，先用水冲洗6BV除杂，再用50 %乙醇洗脱!3BV， 收集洗脱液并减压蒸馏至无醇味，冷冻干燥，即得丹皮总苷部分；药渣加入9. 5倍水浸泡5 小时后，于蒸馏罐内用2. 4kg/cm3压力的蒸气进行水蒸气蒸馏，控制釜温115°C (并入上一步浓缩透过液时的馏出液)，至罐内排出的原药液体澄清并伴有少量珠点油花止，收集蒸馏液，冷却后沉淀得丹皮酚粗品；粗品使用3倍体积70%乙醇于85°C水浴中溶解，完全溶解后移至冷柜中结晶，得丹皮酚纯品；经液相色谱测定，丹皮多糖的得率为5. 3%，纯度为86% ； 丹皮总苷的得率为6. 6%，纯度(以芍药苷计)为80. 8%，其中芍药苷含量为41. 7% ；丹皮酚的提取率为4. 16%，纯度为97%。实施例三取丹皮生药500g，洗净烘干粉碎，装入渗漉柱中，柱体积450ml，用2300mL35°C温水，流速200ml/h，渗漉，滤得到药渣和提取液；提取液使用Superdex G50凝胶过滤层析分离，得到含丹皮多糖的大分子组分和含丹皮总苷的小分子组分；大分子组分使用3倍体积 90%乙醇沉淀12小时，收集沉淀冷冻干燥，得丹皮多糖部分，小分子组分减压浓缩后上大孔树脂柱D201 (3. 5mg芍药苷/g湿树脂)，先用水冲洗6BV除杂，再用50 %乙醇洗脱!3BV， 收集洗脱液并减压蒸馏至无醇味，冷冻干燥，即得丹皮总苷部分；药渣加入9. 5倍水浸泡5 小时后，于蒸馏罐内用2.3kg/cm3压力的蒸气进行水蒸气蒸馏，控制釜温115°C (并入上一步浓缩透过液时的馏出液)，至罐内排出的原药液体澄清并伴有少量珠点油花止，收集蒸馏液，冷却后沉淀得丹皮酚粗品。粗品使用3倍体积70%乙醇本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毕云英，
申请(专利权)人：威海天泓农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：