一种快速简便构建下一代高通量测序文库的方法技术

本发明专利技术涉及下一代高通量测序文库构建方法，适用于Illumina和Roche?454测序平台。该方法包括以下设计思想：主要实验部分在微珠(Beads)上或其他固体表面进行，微珠与含有测序接头序列的双链寡核苷酸相连，DNA/RNA热变性成单链后，与微珠上双链寡核苷酸退火杂交。加入含有聚合酶或反转录酶的溶液进行延伸。清洁后加入另一测序接头和T4DNA连接酶进行连接，最后将产物寡核苷酸从微珠上洗脱下，聚合酶链反应扩增后，测序文库构建完成。主要构建过程依次包括杂交、延伸、连接、洗脱和聚合酶链反应步骤。本发明专利技术有益的效果：实验过程快速、简洁、低成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
中下一代高通量测序文库构建方法，适用于Illumina 和Roche妨4测序平台文库构建。
技术介绍
近年来，以Illuminma GAIIx/HiSeq 2000和Roche 454为代表的下一代测序高速发展。以Illumina产品为例，GAII读长从2008年的36碱基发展到现在的100碱基，通量从2008年的48M reads/run发展到现在的MOM reads/run，测序能力提高了 14倍。到目前为止，HiSeq 2000每个run可以达到2个人基因组30X覆盖的测序通量，约200G/run数据，上机操作时间也减少到了 30分钟。另外，测序能力的提升使得将多个样品混合放入一条通道同时测序的方式更加普遍。但测序效率的提升和多样品混合测序的普及对样品的制备效率提出了更高的要求，而现有的样品制备方法经过几年的发展，一直赶不上测序能力的提高。因此，下一代高通量测序样品制备效率和成本成为了高通量测序普及的关键。下一代高通量测序样品制备过程本质上是将符合测序长度的DNA/RNA插入到已有的测序载体中，即在待测序DNA/RNA两端连上已知的测序接头序列。目前本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：不公告发明人，
申请(专利权)人：张建光，
类型：发明
国别省市：