制备IGF2b转基因鱼的慢病毒方法技术

技术编号:7202743 阅读:437 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公布了一种制备IGF2b转基因鱼的慢病毒方法的方法,其特征在于:通过构建含有靶基因的慢病毒载体来进行转基因鱼的生产,其含有GFP报告基因可用于检测转基因的效果。本发明专利技术能够生产慢病毒转基因鱼,转基因鱼的成活率12.2%。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种的方法。
技术介绍
目前,生产转基因动物的方法有原核内显微注射法、精子载体法、脂质体转染法、 反转录病毒载体法、以及细胞核移植方法,但这些方法皆因成本高、转基因效率低或者插入片段小等缺点而无法广泛应用。慢病毒载体法的出现,不仅克服了以往逆转录病毒表达沉默的缺陷,而且转基因的效率远远高于传统的显微注射法,是转基因动物研究领域的突破性进展。随后,利用该方法,已经有转基因猪、转基因牛、转基因鼠、转基因鸡、绵羊、猕猴等出生。在我国,朱作言等就通过显微注射的方法获得了转草鱼生长激素的转基因鲤鱼, 黑龙江水产研究所也通过同样的方法获得了转大马哈生长激素基因的转基因鲤鱼,而使用慢病毒生产转基因鲤鱼还未见报道。因此,本专利技术期望获得转基因鲤鱼的慢病毒方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术中存在的不足,提供一种基于慢病毒的转基因鲤鱼生产方法,该处理方法既能提高转基因的效率,又能降低转基因鲤的生产成本。本专利技术为实现上述目的,采用如下技术方案,其特征在于首先构建所要转基因的慢病毒载体, 其次,获得人工授精的鲤鱼未分裂的受精卵并进行脱粘处理;使用显微注射的方式进行慢病本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.制备IGF2b转基因鱼的慢病毒方法,其特征在于按如下步骤实现:(1)、根据鲤鱼IGF2b基因cDNA序列Genbank登录号为AF402958,设计引物:IGF2b-BamHI-F:GATCATACGGATCCGCCACCATGGAGGACCAACTAAAACATCAIGF2b-NheI-R:CAGTTGACGCTAGCTCATCGACTCTGTGCAAAAAGG;扩增其CDS区ATGGAGGACCAACTAAAACATCATTCTTTGTGCCATACTTGTTTGAGAACAGACAGTGTCATAAATAAGGTCATAAAGATGTACTGGTCCATACGAATGCCCATATG...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:张成锋董在杰朱健邴旭文苏胜彦
申请(专利权)人:中国水产科学研究院淡水渔业研究中心
类型:发明
国别省市:32

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1