The invention discloses a method for slow virus and preparation of transgenic pig sperm incubation, which comprises the following steps: lentiviral vectors were incubated with sperm, the sperm adsorption of lentiviral vector; then the artificial insemination of female offspring in animal, animal screening of transgenic pigs. The invention adopts the lentivirus and sperm incubated sperm through technology, absorb the slow viruses and then artificial insemination or in vitro fertilization, lentivirus into fertilized egg, and the exogenous gene integrated into the embryonic genome, thereby preparing transgenic pigs. Thus, the problem of low rate of integration and genetic instability of transgenic pigs with sperm absorption by naked DNA was overcome. The prominent feature of this method is that it combines the advantages of lentivirus and sperm carrier, and it is easy to operate and low in cost. Incubation of spermatozoa with lentiviral vectors is a low cost, simple and highly efficient transgenic method.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及制备转基因猪的新技术。
技术介绍
精子介导基因转移方法是目前获得转基因猪简单而高效的方法之一。该方 法在小鼠、猪等动物上有过成功的报道，但随后的研究中，由于转基因的效 率低而一度引起争议，且不同的实验室报道的结果差异很大，存在外源基因 整合效率差的问题。慢病毒被认为是制备转基因猪的新型优良基因转移载体。慢病毒即能感染 分裂细胞又能感染非分裂细胞，可从生殖细胞到囊胚期各发育阶段转移外源 基因。目前利用慢病毒载体感染动物胚胎、受精卵以及精原干细胞成功了生 产转基因鼠、羊、牛、猪、鸡、鱼等动物。大量研究证实精子和慢病毒是基因转移的理想载体，但是有关慢病毒和精 子共孵育制备转基因猪的研究国内外未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供了。 ，包括如下步骤慢病毒载体与精子共孵育后，使精子吸附慢病毒载体；然后经人工授精雌性动物，在子代动物筛选转基因猪。，包括如下步骤慢病毒载体 与精子共孵育后，使精子吸附慢病毒载体；经体外受精，体外培养后胚胎移植， 获得转基因猪。在上述慢病毒与精子孵育制备转基因猪的方法中，所述慢病毒与精子共孵 育的方法为动物精液稀释液洗去精...
【技术保护点】
一种慢病毒与精子孵育制备转基因猪的方法，其特征在于包括如下步骤：慢病毒载体与精子共孵育后，使精子吸附慢病毒载体；然后经人工授精雌性动物，在子代猪中筛选转基因动物。
【技术特征摘要】
1.一种慢病毒与精子孵育制备转基因猪的方法，其特征在于包括如下步骤慢病毒载体与精子共孵育后，使精子吸附慢病毒载体；然后经人工授精雌性动物，在子代猪中筛选转基因动物。2. —种慢病毒与精子孵育制备转基因猪的方法，其特征在于包括如下步 骤慢病毒载体与精子共孵育后，使精子吸附慢病毒载体；经体外受精，体外 培养后胚胎移植，获得转基因猪。3. 如权利要求1或2所述的制备转基因猪的方法，其特征在于所述慢病...
【专利技术属性】
技术研发人员：张永亮，习欠云，丁景华，吴珍芳，蔡伟光，张守全，江青艳，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：81[]
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