本发明专利技术涉及一种简易快速检测植物器官或组织含原花色素(Proanthocyanidins)的方法，利用染色法，加入与原花色素特异结合的染料对植物的器官或组织染色，DMACA（p-dimethylaminocinnamaldehyde）的酸性-醇类溶液可以使含有原花色素的植物器官或组织变为蓝色，原花色素含量越高，颜色越蓝，而不含原花色素的植物器官或组织则不产生蓝色，从而达到快速检测植物样品中是否含有原花色素的目的。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物化学领域，特别是涉及一种植物中原花色素的快速鉴定方法。
技术介绍
原花色素(Proathocyanidins)，也叫原花青素，是类黄酮的一种。原花色素是清除自由基最强的抗氧化剂之一，能保护大脑与神经组织，改善血液循环，灵活关节和年轻皮肤的作用。长期食用高含原花色素的食品，可以缓解心血管等疾病。食用高含原花色素的食品已成为预防这些疾病的主要食疗方法，消费需求越来越大。在活体植物的组织和器官中，未被氧化的原花色素在细胞中是无色的，肉眼无法判断植物器官中是否含有该物质。为了对活体植物中未氧化的原花色素的进行选择，现有检测原花色素的方法一般采用高压液相色谱法(HPLC)，该法需要昂贵的仪器、良好的实验平台，复杂的样品前处理、花费时间长和费用较高，不利于大规模的推广，因此专利技术一种快速、简便、低廉的检测植物中含原花色素的方法，是寻找产原花色素植物和大规模开发原花色素产品的重要基础。目前，未见有利用化学染色法快速检测植物中含原花色素物种方法的报道，基于我们的研究结果，本专利技术为检测植物中是否含原花色素提供了一种新的方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种直观、经济、简便的植物中原花色素的快速检测方法， 可应用于检测植物中原花色素的含量。本专利技术方法使用试剂价格低廉，操作简单，效果明显，见效快。本专利技术的技术方案在常温下，用DMACA (p-dimethylaminocinnamaldehyde)酸性醇类溶液浸泡待检测的植物器官或组织样品5分钟左右，若植物器官或组织样品中含有原花色素则会被染上蓝色，且原花色素含量越高，颜色越蓝；若样品中不含原花色素则不被染上蓝色，从而达到快速检测植物样品中是否含有原花色素的目的。所述DMACA酸性醇类溶液为DMACA盐酸-乙醇溶液或DMACA盐酸-甲醇溶液。所述的DMACA盐酸-乙醇溶液中，DMACA的浓度为0. 5-2%,盐酸浓度为10-15%， 乙醇浓度为45-55%。所述的DMACA盐酸-甲醇溶液中，DMACA的浓度0. 5-2%,盐酸浓度为8-14%，甲醇浓度为50-55%。专利技术申请人根据植物材料的特点和原花色素的化学性质，在本专利技术中采用高浓度的盐酸软化植物组织并提供酸性环境，有利于染色剂进入细胞与原花色素反应，植物器官或组织中原花色素含量越高，颜色越蓝，从而能简便、直观区分植物器官或组织中原花色素的有无和含量的高低。具体实施方式实施例1(1)取原花色素标准品(购自南京替斯艾么中药研究所)，分别配制成以下浓度的原花色素溶液lmg/ml、;3mg/ml、5mg/ml，分别取1毫升原花色素溶液置于透明容器中；(2)把1 克 DMACA (p-dimethylaminocinnamaldehyde)加入 100 毫升盐酸-乙醇溶液中，其中盐酸浓度为10%，乙醇浓度为50%，充分溶解，得DMACA盐酸-乙醇溶液。(3)分别在装有原花色素溶液的透明容器中加入1毫升上述DMACA盐酸-乙醇溶液，在常温下染色5分钟后观察颜色，所有溶液中都产生蓝色，且蓝色的程度随着原花色素浓度的增加依次增加。实施例2(1)分别取两种不同类型的授粉后8天的拟南芥dahWoAsis种子的种皮，其中一个为野生型的种子种皮，文献报道种皮中含有原花色素，另一个为黄籽突变体的种子种皮，文献报道种皮中未检测到原花色素。(2)把 1. 5 克 DMACA (p-dimethylaminocinnamaldehyde)加入 100 毫升盐酸-乙醇溶液中，其中盐酸浓度为15%，乙醇浓度为50%，充分溶解，得DMACA盐酸-乙醇溶液。(3)分别取上述材料授粉后8天的种皮于载玻片上，用DMACA盐酸-乙醇溶液完全覆盖。常温下染色5分钟后，野生型拟南芥种子的种皮由绿色染为蓝色，而黄籽突变体的种子种皮未被染上蓝色，仍然为绿色。实施例3:(1)分别取两种不同类型的授粉后10天的白菜(SraMica rapa)种子的种皮，其中一个为藏油2号种子种皮，文献报道种皮中含有原花色素，另一个为彭波黄的种子种皮，文献报道种皮中不含原花色素。(2)把 1 克 DMACA (p-dimethylaminocinnamaldehyde)加入 100 毫升盐酸-甲醇溶液中，其中盐酸浓度为1496，，甲醇浓度为55%，充分溶解，得DMACA盐酸-甲醇溶液。(3)分别取上述材料授粉后10天的种子种皮于载玻片上，用DMACA盐酸-甲醇溶液完全覆盖。常温下染色5分钟后，藏油2号的种子种皮由绿色变为蓝色，彭波黄种皮未被染上色，仍然为绿色。实施例4:(1)分别取两种不同类型的授粉后10天的水稻(ftT^a. Miira)颖果，其中一个为红米颖果，文献报道其中含有原花色素，另一个为白米颖果，文献报道其中未检测到原花色素。(2)把 0. 5 克 DMACA (p-dimethylaminocinnamaldehyde)力口入 100 毫升盐酸-乙醇溶液中，其中盐酸浓度为10%，乙醇浓度为55%，充分溶解，得DMACA盐酸-乙醇溶液。(3)分别取上述材料的授粉后10天的颖果于载玻片上，用DMACA盐酸-乙醇溶液完全覆盖。常温下染色5分钟后，红米颖果由绿色变为蓝色，白米颖果未被染上色，仍然为绿色。实施例5 (1)取来源不同类型茶叶Siz^z7lSi1S)的新鲜叶片样品，颜色均为绿色，HPLC 测定其中原花色素的含量由高到底依次为样品1>样品2>样品3。(2)把2 克 DMACA (p-dimethylaminocinnamaldehyde)加入 100 毫升盐酸-乙醇溶液中，其中盐酸浓度为10%，乙醇浓度为55%，充分溶解，得DMACA盐酸-乙醇溶液。 (3)分别取上述新鲜茶叶的叶片，切成小块，分别放置于载玻片上，用DMACA盐酸-乙醇溶液完全覆盖。常温下染色5分钟后，样品均被染上蓝色，且蓝色程度由浅到深依次为样品3〈样品2〈样品1。权利要求1.，其特征在于，在常温下，用DMACA酸性醇类溶液浸泡待检测的植物器官或组织样品，若植物器官或组织样品中含有原花色素则会被染上蓝色，且原花色素含量越高，颜色越蓝，若样品中不含原花色素则不被染上蓝色。2.根据权利要求1所述的快速检测植物中含原花色素的方法，其特征在于，所述DMACA 酸性醇类溶液为DMACA盐酸-乙醇溶液。3.根据权利要求1所述的快速检测植物中含原花色素的方法，其特征在于，所述DMACA 酸性醇类溶液为DMACA盐酸-甲醇溶液。4.根据权利要求2所述的快速检测植物中含原花色素的方法，其特征在于为，所述的DMACA盐酸-乙醇溶液中，DMACA的浓度为0. 5-2%,盐酸浓度为10-15%，乙醇浓度为 45-55%。5.根据权利要求3所述的快速检测植物中含原花色素的方法，其特征在于，所述的 DMACA盐酸-甲醇溶液中，DMACA的浓度0. 5-2%,盐酸浓度为8-14%，甲醇浓度为50_55%。全文摘要本专利技术涉及一种简易快速检测植物器官或组织含原花色素(Proanthocyanidins)的方法，利用染色法，加入与原花色素特异结合的染料对植物的器官或组织染色，DMACA(p-dimethylaminocinnamaldehyde)的酸性-醇类溶液可以使含有原花色素的植物器官或组织变为蓝色本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．一种快速检测植物中含原花色素的方法，其特征在于，在常温下，用ＤＭＡＣＡ酸性醇类溶液浸泡待检测的植物器官或组织样品，若植物器官或组织样品中含有原花色素则会被染上蓝色，且原花色素含量越高，颜色越蓝，若样品中不含原花色素则不被染上蓝色。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：严明理，刘丽莉，金元昌，向建华，贺峦，
申请(专利权)人：湖南科技大学，
类型：发明
国别省市：43
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