一种快速繁殖白芨苗的方法技术

本发明专利技术提供了一种快速繁殖白芨苗的方法，按照以下步骤进行：1)选择白芨成熟种子作为外植体；2)种子消毒后接种至萌发培养基，7天左右种子萌发，14天左右形成原球茎，切割原球茎，转接至原球茎增殖培养基；3)原球茎转接至丛生芽诱导及增殖培养基；4)切割丛生芽使其大量繁殖，等丛生芽长成高约3cm的小苗后转接至生根壮苗培养基，待苗长成高约7～10cm时移栽。本发明专利技术解决了目前白芨无性繁殖存在的种苗携带病毒、品种退化、有效产量低等问题。本发明专利技术可在人工控制条件下获得大量有性繁殖的无病毒苗，与传统繁殖方式相比，产量提高约30％，对缓解白芨的市场供需矛盾有积极意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物快繁
，具体涉及。
技术介绍
白芨(Bletilla Striata(Thunb.)Reichb. f.)为兰科(Orchidaceae)植物白芨属多年生草本植物，以干燥块茎入药。具有收敛止血，消肿生肌的功效。对咯血、吐血、便血及外伤止血、疮疡肿毒、手足跋裂等有较好疗效，广泛用于治疗肺结核及支气管扩张咯血、胃溃疡出血等症，其白芨胶广泛应用于食品、医药和日用化学品等领域。近年来，野生白芨遭到过度采挖，导致野生资源濒危。人工栽培因其无性繁殖种苗携带病毒、品质退化、有效产量低，导致市场货源极缺，价格连年攀升，解决白芨繁殖技术是缓解市场供需矛盾的关键。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种能提高白芨苗产量的快速繁殖白芨苗的方法。为达到上述目的，本专利技术提供，所述的方法按照以下步骤进行步骤1)外植体消毒先用流水冲洗蒴果，洗衣粉溶液漂洗，蒸馏水洗净，再分别用75%酒精和升汞溶液浸泡，最后无菌水冲洗，备用；步骤2、原球茎形成及增殖将消毒后种子均勻抖落在无菌水或萌发培养基中， 约7天后种胚开始膨大，14天左右形成原球茎，将原球茎切割后转接至原球茎增殖培养基， 以获得大量原球茎；步骤幻丛生芽诱导及增殖将原球茎转接至丛生芽诱导及增殖培养基，25 35 天繁殖出大量丛生芽，根据需要切割丛生芽，转接至新鲜的丛生芽增殖培养基，14天左右即可收获增殖的丛生芽；步骤4)幼苗繁殖及生根壮苗取丛生芽置于新鲜的丛生芽增殖培养基中，30 35天丛生芽可繁殖成高约2 3cm的幼苗，将幼苗转接至生根壮苗培养基，约30天后，可获得高7 10cm、根系发达、根茎粗壮的白芨苗，室内自然光下开盖炼苗3 5天，以备移栽用；步骤5)移栽植入大田。优选的，所述步骤1)中的外植体消毒的方法具体是先用流水冲洗白芨蒴果(内含外植体种子)，经洗衣粉溶液漂洗，蒸馏水洗净，再用75%酒精浸泡25 35秒，(0. 1 0.2) %升汞溶液浸泡10 15分钟，最后用无菌水冲洗2 5遍。优选的，所述步骤2)中的原球茎增殖培养基是1/2MS固体培养基添加(0.9 1.2)mg/Kg 6-苄氨基嘌呤、(0. 08 0. 12)mg/Kg 萘乙酸、(25 35)g/Kg 蔗糖和(4 6) g/ Kg琼脂；培养条件为温度23 ^°C，相对湿度65 80%，光照时间11 14小时/天， 光照强度2000 5000Lx。优选的，所述步骤3)中的丛生芽诱导及增殖培养基是MS固体培养基添加(0.9 1.2)mg/Kg 6-苄氨基嘌呤、(25 35)g/Kg蔗糖和G 6) g/Kg琼脂；培养条件为温度 23 ^°C，相对湿度65 80%，光照时间11 14小时/天，光照强度2000 5000Lx。优选的，所述步骤4)中的生根壮苗培养基是1/2MS固体培养基添加(0. 4 0. 6) mg/Kg萘乙酸、(65 85)g/Kg香蕉汁、(185 210) g/Kg番茄汁、(8 12) g/Kg活性炭、 (25 35) g/Kg蔗糖和G 6) g/Kg琼脂；培养条件为温度23 ^°C，相对湿度65 80%，光照时间11 14小时/天，光照强度2000 5000Lx。优选的，对白芨苗进行炼苗移栽前用800 1100倍稀释的百菌清液浸泡白芨根部。本专利技术解决了目前白芨无性繁殖存在的种苗携带病毒、品种退化、有效产量低等问题。本专利技术可在人工控制条件下获得大量有性繁殖的无病毒苗，与传统繁殖方式相比，产量提高约30%，对缓解白芨的市场供需矛盾有积极意义。本专利技术能够实现工厂化生产大量无病毒白芨苗。具体实施例方式下面将结合实施例对本专利技术作进一步说明。符合本专利技术的繁殖白芨苗的方法按照以下步骤进行首先选择外植体，本实施例是从陕南地区的药材种植基地采摘的白芨成熟蒴果， 选用其中颗粒饱满、外壳未见破损的成熟蒴果的种子作为外植体。实施例1 1)外植体消毒先用流水冲洗蒴果，洗衣粉溶液漂洗，蒸馏水洗净，75%酒精浸泡 28秒，再用0. 15%升汞溶液浸泡12分钟，最后无菌水冲洗3遍，备用。2)原球茎形成及增殖将消毒种子均勻抖落在无菌水或萌发培养基中，该培养基是1/2MS固体培养基添加1.05mg/Kg 6-苄氨基嘌呤。约7天后种胚开始膨大，14天左右形成原球茎，将原球茎切割后转接至原球茎增殖培养基，以获得大量原球茎。其中原球茎增殖培养基是1/2MS固体培养基中添加1. 08mg/Kg 6-苄氨基嘌呤、0. 95mg/Kg萘乙酸、28g/Kg 蔗糖和4.6g/Kg琼脂。培养条件为温度M°C，相对湿度70%，光照时间12小时/天，光照强度 4000Lx。3)丛生芽诱导及增殖将原球茎转接至丛生芽诱导增殖培养基，30天左右繁殖出大量丛生芽。切割丛生芽，转接至新鲜的丛生芽增殖培养基，60天左右每丛可平均增殖2 3个新丛生芽。丛生芽诱导及增殖培养基为MS固体培养基中添加1. 06mg/Kg 6-苄氨基嘌呤、28g/Kg蔗糖、4. 6g/Kg琼脂；培养条件为温度M°C，相对湿度70%，光照时间12小时/ 天，光照强度4000Lx。4)幼苗繁殖及生根壮苗取白芨丛生芽置于新鲜的丛生芽增殖培养基上，30 35 天可繁殖成高约3cm苗。将苗转接至生根壮苗培养基，约30天后长出3 6根幼根，生根率在90%以上。在生根的同时，幼苗会不断的发育长至7 8cm高，叶片会增多且绿色会加深。室内自然光下开盖炼苗3天。所述生根壮苗培养基为1/2MS固体培养基中添加0. 55mg/ Kg萘乙酸、76g/Kg香蕉汁、205g/Kg番茄汁、llg/Kg活性炭、28g/Kg蔗糖和4. 6g/Kg琼脂； 培养条件为温度M°C，相对湿度70%，光照时间12小时/天，光照强度4000Lx。5)移栽洗净根部培养基，用稀释900倍的百菌清液浸泡白芨苗根部，即可植入大田。正常田间管理，移栽两个月后长出新根、新叶。实施例2 1)外植体消毒先用流水冲洗蒴果，洗衣粉溶液漂洗，蒸馏水洗净，75%酒精浸泡 25秒，再用0. 升汞溶液浸泡10分钟，最后无菌水冲洗2遍，备用。2)原球茎形成及增殖将消毒种子均勻抖落在无菌水或萌发培养基中，约7天后种胚开始膨大，14天左右形成原球茎，将原球茎切割后转接至原球茎增殖培养基，以获得大量原球茎。其中原球茎增殖培养基为1/2MS固体培养基中添加0.9mg/Kg 6-苄氨基嘌呤、 0. 08mg/Kg萘乙酸、25g/Kg蔗糖和4g/Kg琼脂；培养条件为温度23°C，相对湿度65%，光照时间11小时/天，光照强度2000LX。3)丛生芽诱导及增殖将原球茎转接至丛生芽诱导增殖培养基，30天左右繁殖出大量丛生芽。切割丛生芽，转接至新鲜的丛生芽增殖培养基，60天左右每丛可平均增殖2 3个新丛生芽。丛生芽诱导增殖培养基为MS固体培养基中添加0.9mg/Kg 6-苄氨基嘌呤、 25g/Kg蔗糖和4g/Kg琼脂；培养条件为温度23°C，相对湿度65%，光照时间11小时/天， 光照强度2000Lx。4)幼苗繁殖及生根壮苗取白芨丛生芽置于新鲜的丛生芽增殖培养基上，30 35 天可繁殖成高约3cm苗。将苗转接至生根壮苗培养基，约30天后长出3 6根幼根，生根率在90%以上。在生根的同时，幼苗会不断的发育长至7 8cm高，叶片会增多且绿色会本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种快速繁殖白芨苗的方法，包括种子萌发、原球茎增殖、丛生芽诱导及增殖、生根壮苗以及炼苗移栽，其特征在于：所述的方法按照以下步骤进行：步骤１）：外植体消毒：先用流水冲洗蒴果，洗衣粉溶液漂洗，蒸馏水洗净，再分别用７５％酒精和升汞溶液浸泡，最后无菌水冲洗，备用；步骤２）：原球茎形成及增殖：将消毒后种子均匀抖落在无菌水或萌发培养基中，约７天后种胚开始膨大，１４天左右形成原球茎，将原球茎切割后转接至原球茎增殖培养基，以获得大量原球茎；步骤３）：丛生芽诱导及增殖：将原球茎转接至丛生芽诱导及增殖培养基，２５～３５天繁殖出大量丛生芽，根据需要切割丛生芽，转接至新鲜的丛生芽增殖培养基，１４天左右即可收获增殖的丛生芽；步骤４）：幼苗繁殖及生根壮苗：取丛生芽置于新鲜的丛生芽增殖培养基中，３０～３５天丛生芽可繁殖成高约２～３ｃｍ的幼苗，将幼苗转接至生根壮苗培养基，约３０天后，可获得高７～１０ｃｍ、根系发达、根茎粗壮的白芨苗，室内自然光下开盖炼苗３～５天，以备移栽用；步骤５）：移栽植入大田。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：齐香君，王钏，施春阳，
申请(专利权)人：陕西科技大学，
类型：发明
国别省市：87