【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物
更具体地说,本专利技术涉及一种快速生产白及种苗的方法。
技术介绍
兰科植物种子细小如尘,也称为“灰尘种子”,其种子海量,每一颗成熟的果实包含数万粒以上可利用的种子,但在自然条件下,种子很难萌发。兰科植物是植物界进化程度高,且与真菌有着密切联系的特殊生态类群。研究表明,无论是兰科植物的种子萌发,还是植物的生长,都离不开菌根真菌;菌根真菌在兰科药用和观赏类植物的保护、引种驯化和人工栽培中显得尤为重要。由于大多数兰科植物处于濒危状态,所有兰科植物的野生种都已被列入《濒危野生动植物国际贸易公约》,是植物保护中的“旗舰”类群。因此,如何在生产中有效地利用菌根真菌,已成为兰科植物大规模人工栽培、引种驯化和资源再生及保护的关键限制性因子。白及为兰科多年生草本植物,其花色艳丽,极具观赏价值,还是目前我国濒危紧缺的中药材,其根茎中富含药用成分白及胶质,具有治疗肺结核咯血、支气管扩张咯血、胃溃疡吐血、尿血、便血等作用,疗效确切,经济价值很高。但由于自身特殊的生理特点及其生态环境受到严重破坏,其资源几近枯竭。因此,如何实现白及资源的保护与资源再生,是一个重要而急切的课题。目前,白及的繁殖方法主要有根茎分株繁殖和组织培养。传统的根茎分株繁殖速度慢,生长周期长,效率低,种苗成本高,很难满足大面积的栽培需求;而组织培养生产的无菌试管苗生长缓慢、移栽成活率低、抗逆性差、易感染病原菌。从目前情况看,白及繁殖困 ...
【技术保护点】
一种快速生产白及种苗的方法,其特征在于,将白及种子与白及菌根真菌进行液体共培养至白及种子萌发,以及将萌发的白及种子进行白及种苗培养,其中,所述白及菌根真菌为蜡壳菌目(Sebacinales sp.)菌根真菌菌株YY‑51,所述白及菌根真菌于2015年7月31日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,保藏号为GCMCC NO.11104。
【技术特征摘要】
1.一种快速生产白及种苗的方法,其特征在于,将白及种子与白及菌根真菌进行液
体共培养至白及种子萌发,以及将萌发的白及种子进行白及种苗培养,其中,所述白及菌
根真菌为蜡壳菌目(Sebacinalessp.)菌根真菌菌株YY-51,所述白及菌根真菌于2015年7
月31日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址是北京市朝阳区
北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,保藏号为GCMCCNO.11104。
2.如权利要求1所述的快速生产白及种苗的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一、菌液的制备:采用PDA固体培养基培养白及菌根真菌,然后将白及菌根真菌
接种至共生液体培养基中得到白及菌根真菌菌丝体的菌液;
步骤二、共生混合体的制备:将经过预处理的白及种子接种至所述步骤一中得到的菌
液中,在摇床上进行共生培养,得到白及种子和白及菌根真菌的共生混合体;
步骤三、白及种的包埋:待所述步骤二中所述白及种子萌发并形成原球茎和叶片后,
将所述共生混合体过滤,得共生培养后的白及种,并用包埋剂进行包埋,在包埋物表面喷
洒2.5~40g/L普鲁兰多糖溶液,即得白及种苗。
3.如权利要求2所述的快速生产白及种苗的方法,其特征在于,所述步骤一中所述共
生液体培养基为燕麦培养基、麦麸培养基、土豆培养基、苹果培养基、萝卜培养基、番薯
培养基、或芋头培养基;
其中所述燕麦培养基的制作方法为:按2~20g/L的用量称取燕麦,加入500mL的水,
煮开后保持30min,4层纱布过滤后,定容至1L,调节pH值为5.1~5.3,即得燕麦培养基;
所述麦麸培养基的制作方法为:按2~20g/L的用量称取麦麸,加入500mL的水,煮开
后保持30min,4层纱布过滤后,定容至1L,调节pH值为5.1~5.3,即得麦麸培养基;
所述土豆培养基、苹果培养基、萝卜培养基、番薯培养基或芋头培养基的制作方法为:
称取5~200g/L土豆、苹果、萝卜、番薯或芋头,切成小块,开水煮30分钟,4层纱布过滤
后,即得相应的培养基,然后置于高压121℃高温条件下灭菌20min,冷却后备用。
4.如权利要求2所述的快速生产白及种苗的方法,其特征在于,所述步骤一中得到白
及菌根真菌菌丝体具体方法为:先采用PDA固体培养基,培养温度为26~28℃,暗培养7~10
天后,从形成的菌落边缘挑取小块,接种到共生液体培养基中进行摇床暗培养3~5天,摇
\t床转速为100~150r/min,培养温度为26~28℃。
5.如权利要求2所述的快速生产白及种苗的方法,其特征在于,所述步骤二中所述白
及种子的预处理的具体步骤为:
步骤a、取9~10月份的成熟的白及蒴果,用自来水洗净,然后依次用体积分数为75%
的酒精溶液浸泡30s和质量分数为2.5%氯酸钠溶液浸泡8~20min,取出白及蒴果用无菌水冲
洗3...
【专利技术属性】
技术研发人员:谭小明,缪剑华,李力,周雅琴,
申请(专利权)人:广西壮族自治区药用植物园,
类型:发明
国别省市:广西;45
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