本发明专利技术公开了一种烟草耐冷性的苗期鉴定方法，包括以下步骤：（1）漂浮育苗；（2）烟苗移植；（3）温室驯化：在6~8片真叶期驯化2~3d；（4）低温胁迫处理：处理温度设置为4℃~8℃，并记录幼苗的形态反应特征；（5）常温恢复生长：低温胁迫处理后，恢复至温室驯化时的温度和光照条件，并记录幼苗的恢复生长情况；（6）烟草苗期耐冷性评价：根据烟草幼苗在所述低温胁迫处理下的形态反应特征和常温恢复生长情况进行综合评价，将耐冷程度分为低温敏感、较耐冷和耐冷三种类型。本发明专利技术烟草耐冷性的苗期鉴定方法，结果客观、准确性高，耐冷性评价依据直观、简洁明了，该方法易于操作，重复性好，可用于指导烟草耐冷育种和烟叶安全生产。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于烟草抗逆性鉴定
，具体涉及。
技术介绍
烟草原产于亚热带，是喜温作物，生长最适温度为25°C 28°C，低于10°C时生长受阻。我国烟草种植区域分布广泛，各地温度条件差异较大，环境温度尤其是低温对烟草的生长发育、产量和品质都有明显的影响；早春季节烟草移栽后频繁发生低温危害，即“倒春寒”，导致幼苗受害、大田前期生长缓慢以及发生早花现象，严重引起烟叶产量和品质的波动，已成为烟叶生产中的突出问题。因此，评价现有烟草品种的耐冷性，筛选出耐冷性强的烟草种质资源，并培育抗逆性强的烟草品种已成为目前烟叶生产中亟待解决的问题，而找到一种行之有效、能准确地早期鉴定烟草耐冷性的方法是解决这个问题的技术关键。目前，在低温对烟草形态(金磊等.苗期低温对烤烟花芽分化及发育进程的影响.中国烟草科学2007，28 (6):1-5;招启柏等.苗期低温对烤烟叶数及现蕾时间的影响.中国烟草学报，2008，14(3) :27-31)、生理(晋艳等.低温胁迫对烟草保护性酶类及氮和碳化合物的影响.西南师范大学学报(自然科学版)，2007，32(3):74-79;陈卫国等.烟草抗寒性生理生化研究进展.作物研究，2007, 1:81-83 ;易建华和孙在军.烟草光合作用对低温的响应.作物学报，2004, 30(6) :582-588)及早花现象(金磊等.烟草早花机理及控制的研究进展.中国烟草学报，2008，14(1) :58-62)等方面影响的研究较多，而在烟草耐冷性筛选与鉴定方法上的报道很少。虽然，曾有研究者提出采用种子发芽率、苗期形态及相关生理生化指标来鉴定和评价烟草的耐冷性(陈卫国等.烤烟品种耐寒性及相关生理指标的研究.中国烟草科学2008，29 (3) :39-42;李永平等.不同烟草品种发芽和苗期耐寒性的鉴定.科技通报，2009, 25(6) :806-810 ;马文广等.20个烟草品种低温逆境下发芽和苗期生理生化特性的变化及耐寒性评价.浙江农业学报，2011, 23(2) :232-238)，这些指标也应用在水稻和玉米等其他作物耐冷性的鉴定上(韩龙植等.水稻种质资源芽期耐冷性的鉴定与评价.植物遗传资源学报，2004，5 (4): 346-350;扈光辉.耐冷玉米种质资源的筛选与鉴定.杂粮作物，2008, 28(6) :370-373 ;傅泰露等.杂交水稻苗期耐冷性综合评价及其鉴定指标的筛.西南农业学报，2009，22(3):608 -614)，但这些鉴定方法都是用发芽期或较弱小的幼苗来进行低温处理，由于刚萌发的种子及幼苗自身生长脆弱、根系不发达以及生理生化特性没有得以充分发挥等因素，难以展示材料的真实抗性表现，而生理生化等指标的测定需要相关的仪器和设备条件，数据的可靠性和重复性也较差，此外还需要进行比较复杂的数据统计分析等，从而影响了这些方法的可操作性、实用性和鉴定结果的准确性。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是针对当前烟草生产中存在的问题，提供一种新的烟草耐冷性的苗期鉴定方法，以鉴定和评价烟草品种资源的耐冷性，指导烟草耐冷育种和烟叶安全生产，该鉴定方法结果客观、准确性高，耐冷性评价依据直观、简洁明了，鉴定方法易于操作，重复性好。本专利技术提供的技术方案是，包括以下步骤(1)漂浮育苗对待鉴定的烟草种子进行漂浮育苗，出苗后于广2片真叶期进行间苗；(2)烟苗移植待烟草幼苗生长到3 4片真叶时，移植至装填有漂浮育苗基质的盆中；(3)温室驯化在6 8片真叶期，将烟苗移入光照培养箱或人工气候室中，于 220C 26°C驯化2 3d，光照强度为2000 3000 lux，光照时间10 12h ；(4)低温胁迫处理低温胁迫处理的光照条件与所述温室驯化时一致，处理温度设置为 40C 8°C，处理时间为6 8d，并记录幼苗的形态反应特征；其中，烟草幼苗在低温胁迫下的形态反应特征按照以下四种类型记载第I类所有幼叶萎蔫、下垂；第II类心叶和幼叶出现水溃状斑，或皱缩而形成泡斑，或形成淡黄色至绿色相间的花叶斑，叶片边缘并向叶背面卷曲；第III类心叶或幼叶出现褶皱或水溃状斑，叶片边缘向内卷曲；第IV类植株挺立，幼叶没有表现萎蔫状，心叶和幼叶没有上述第II或III类伤害症状；(5)常温恢复生长低温胁迫处理结束后，恢复至所述温室驯化时的温度和光照条件继续生长7 10d，并记录幼苗的恢复生长情况；低温胁迫处理后，在常温下恢复生长7 10d后的烟草幼苗表现情况按照以下三种类型记载第i类生长恢复缓慢，新出心叶(Tl片，幼叶仍呈萎蔫状，或下部f 3片真叶萎蔫下垂，并出现退绿变黄或发生脱落；第ii类生长恢复较快，新出心叶广2片，整株形态和长势表现较好，仅在叶片中有伤害的部位变黄；第iii类生长恢复快，新出心叶2 3片，整株形态和长势表现良好，叶片不变黄，不脱落；(6)烟草苗期耐冷性评价根据烟草幼苗在所所述低温胁迫处理下的形态反应特征和常温恢复生长情况进行综合评价，将耐冷程度分为低温敏感、较耐冷和耐冷三种类型，其中低温敏感类型烟草幼苗在所述低温胁迫处理下表现为第I、II、III类中的任何一种情形或这三种类型的综合表型，且在所述常温恢复生长时表现为第i类；较耐冷类型烟草幼苗在所亭低温胁迫处理下表现为第I、II、III类中的任何一种情形或这三种类型的综合表型，且在常温恢复生长时表现为第 类；耐冷类型烟草幼苗在所述低温胁迫处理下表现为第IV类，且在常温恢复生长时表现为第iii类。上述方法中，进一步地，步骤(I)中，间苗后每穴只留I棵烟草幼苗，步骤(2 )中，每盆定植I株烟草幼苗。本专利技术提供的具有如下优点和有益效果(I)结果客观、准确性高。本专利技术采用61片真叶期烟苗进行低温胁迫处理，由于这个时期的幼苗健壮，生长旺盛，且经移植后的根系发达，与生产实际中低温危害时的苗情相似，因而能准确、客观地反映鉴定材料本身的遗传特性和对低温逆境的反应。然而，在种子发芽期或较弱小的幼苗(如2 4片真叶期)就进行低温胁迫，此时因为生长脆弱而自身的生理特性没有得以充分发挥，而且容易受到其它多种因素的影响，从而难以展示材料抗性的真实表现，干扰判断结果。(2)耐冷性评价依据直观、简洁明了。本专利技术提供的鉴定方法中低温胁迫处理的时间较长，温度较低，从而胁迫导致烟草幼苗形态变化的特征明显，容易辨认和记载，而且在常温恢复生长时期的判断标准也很好掌握。在进行烟草苗期耐冷性评价时，综合了低温胁迫处理下的形态反应特征和常温恢复生长情况，评价依据科学而直观，也没有模糊不清的数字记录和数理统计过程。(3)鉴定方法易于操作，结果可靠性和重复性好。本专利技术提供的鉴定方法易于操作和掌握，使用光照培养箱就可以进行鉴定，若具备智能温室或人工气候室等设备条件时，可以进行大规模鉴定。低温胁迫处理使用待鉴定材料的生长时期(61片真叶期， 株高8 15cm，经移植后根系生长发达)能充分展示材料自身的遗传特性和生理特征，而在 40C ^S0C (若温度过高或过低均不能准确区分不同耐冷程度材料的形态反应特征)下持续 6^8d的处理条件足以使不同耐冷程度材料的形态反应特征差异明显，因而鉴定的结果可靠性高、重复性好。本专利技术中低温胁迫处理的烟苗生长时期和处理条件与烟叶生产中经常遭遇的“倒春寒”不良环境相似，通过室内模拟“倒春寒”本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：胡日生，曾中，史端甫，刘志，杨全柳，戴杏华，贺利雄，朱列书，
申请(专利权)人：中国烟草中南农业试验站，
类型：发明
国别省市：
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