一种车叶草苷的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种车叶草苷的制备方法，具体步骤为：以长尾粗叶木的根或茎为原料，粉碎，加入4-8倍量50-75％的乙醇超声提取，提取液加入适量活性炭保温脱色，脱色液浓缩，通过大孔树脂柱富集，水和30-50％的乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩，干燥，干燥物采用高速逆流色谱法分离得到车叶草苷。本发明专利技术所述方法操作简便、分离效率高、产品纯度好，适合工业化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于天然产物分离领域，涉及，尤其是一种应用活性炭脱色、大孔树脂富集和高速逆流色谱制备车叶草苷的方法。
技术介绍
长尾粗叶木(Lasianthus acuminatissimus)为茜草科粗叶木属植物，其根俗称 “铁铁骨人参”，具有行气活血、祛湿强筋、止痛的功效，主要用于治疗跌打损伤、风湿关节痛、腰肌劳损等症。长尾粗木叶中康类风湿性关节炎的有效成分是车叶草苷等环烯醚萜类成分。车叶草苷，针状结晶(丙酮)，溶于水、甲醇、乙醇、丙酮、醋酸乙酯、二氧杂环己烷、 吡啶、醋酸，几乎不溶于乙醚、苯、氯仿等。目前，车叶草苷提取工艺方面研究较少，中国专利(公开号为CN101496845A) “一种白花蛇舌草提取物及其分离制备方法”，该专利公开的方法包括提取、醇沉、膜分离、非极性大孔树脂分离和工业色谱分离等步骤，提取物主要包括鸡矢藤苷甲酯、去乙酰基车叶草甘酸甲酯、车叶草甘酸和车叶草苷等成分，其中车叶草苷的含量只有15% -25%，所得产品是混合物，单体成分含量有限。
技术实现思路
本专利技术要解决技术问题是提供，该方法获得的产品纯度尚ο本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现的—种车叶草苷的制备方法，其特征在于包括以下步骤以长尾粗叶木的根或茎为原料，粉碎，加入4-8倍量50-75 %的乙醇超声提取1-3次，每次0. 5_2h，提取频率为 25-40KHZ，过滤得到提取液，提取液加入适量活性炭，50-70°C保温脱色30-60min，脱色液浓缩至无醇味，通过大孔树脂柱富集，先用水洗脱杂质，再用30-50%的乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩，干燥，干燥物采用高速逆流色谱法分离得到车叶草苷。所述活性炭为针剂类医用活性炭，用量为液体量的0. 3-0. 6%。所述大孔树脂型号可选D-101、LSA-20、HZ826和AB-8中的任一种。所述高速逆流色谱的两相溶剂系统为乙酸乙酯-正丁醇-水 2-3 4-5)， 上相为固定相，下相为流动相，色谱仪转速为800-950rpm。本专利技术具有以下优点采用超声提取效率高，能耗低；活性炭脱色，不仅出去部分杂质，还使大孔树脂柱过柱容易，分离效果好；本专利技术采用高速逆流色谱进行精制，获得的产品品质好，符合食品药品的要求。本专利技术所述方法不仅适合实验室小规模提取分离，也适合工业化生产。下面将结合具体实施方式进一步说明本专利技术，但本专利技术要求保护的范围并不局限于下列实施方式。具体实施例方式实施例1 取Ikg长尾粗叶木的根或茎，粉碎，加入4倍量55 %的乙醇超声提取2次，每次 lh，提取频率为35KHz，过滤得到提取液，提取液加入0.3%针剂类医用活性炭，50°C保温脱色30min，脱色液浓缩至无醇味，通过AB-8型大孔树脂柱富集，先用水洗脱杂质，再用 3BV30%的乙醇溶液洗脱，收集富含车叶草苷的洗脱液，浓缩干燥，干燥物采用高速逆流色谱法分离，以乙酸乙酯-正丁醇-水O 2 5)为两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，先后泵入固定相和流动相，设定流动相流速为3ml/min，同时启动主机，调节转速为 850rpm，待管柱内溶剂系统达成动态平衡，进样，收集高浓度车叶草苷流分，浓缩干燥即得车叶草苷0.9g，含量为98.5%。实施例2:取Ikg长尾粗叶木的根或茎，粉碎，加入8倍量50%的乙醇超声提取1次，每次 2h，提取频率为40KHz，过滤得到提取液，提取液加入0.6%针剂类医用活性炭，50°C保温脱色60min，脱色液浓缩至无醇味，通过D-101型大孔树脂柱富集，先用水洗脱杂质，再用 4BV40%的乙醇溶液洗脱，收集富含车叶草苷的洗脱液，浓缩干燥，干燥物采用高速逆流色谱法分离，以乙酸乙酯-正丁醇-水O 3 5)为两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，先后泵入固定相和流动相，设定流动相流速为2. 5ml/min,同时启动主机，调节转速为800rpm，待管柱内溶剂系统达成动态平衡，进样，收集高浓度车叶草苷流分，浓缩干燥即得车叶草苷1. lg，含量为96.1%。实施例3:取2kg长尾粗叶木的根或茎，粉碎，加入8倍量75%的乙醇超声提取2次，每次 0. 5h，提取频率为25KHz，过滤得到提取液，提取液加入05%针剂类医用活性炭，70°C保温脱色50min，脱色液浓缩至无醇味，通过AB-8型大孔树脂柱富集，先用水洗脱杂质，再用 3BV30%的乙醇溶液洗脱，收集富含车叶草苷的洗脱液，浓缩干燥，干燥物采用高速逆流色谱法分离，以乙酸乙酯-正丁醇-水(3 2 4)为两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，先后泵入固定相和流动相，设定流动相流速为3ml/min，同时启动主机，调节转速为 850rpm，待管柱内溶剂系统达成动态平衡，进样，收集高浓度车叶草苷流分，浓缩干燥即得车叶草苷1.7g，含量为98.5%。实施例4:取2g长尾粗叶木的根或茎，粉碎，加入5倍量60 %的乙醇超声提取3次，每次 0.证，提取频率为30KHz，过滤得到提取液，提取液加入0. 5%针剂类医用活性炭，60°C保温脱色40min，脱色液浓缩至无醇味，通过LSA-20型大孔树脂柱富集，先用水洗脱杂质，再用 5BV50 %的乙醇溶液洗脱，收集富含车叶草苷的洗脱液，浓缩干燥，干燥物采用高速逆流色谱法分离，以乙酸乙酯-正丁醇-水(3 2 5)为两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，先后泵入固定相和流动相，设定流动相流速为2ml/min，同时启动主机，调节转速为 820rpm，待管柱内溶剂系统达成动态平衡，进样，收集高浓度车叶草苷流分，浓缩干燥即得车叶草苷2. Og，含量为98.4%。实施例5: 取5kg长尾粗叶木的根或茎，粉碎，加入6倍量65%的乙醇超声提取2次，每次 lh，提取频率为40KHz，过滤得到提取液，提取液加入0. 6 %针剂类医用活性炭，70°C保温脱色45min，脱色液浓缩至无醇味，通过型大孔树脂柱富集，先用水洗脱杂质，再用 6BV35 %的乙醇溶液洗脱，收集富含车叶草苷的洗脱液，浓缩干燥，干燥物采用高速逆流色谱法分离，以乙酸乙酯-正丁醇-水O 2 5)为两相溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相，先后泵入固定相和流动相，设定流动相流速为2ml/min，同时启动主机，调节转速为 950rpm，待管柱内溶剂系统达成动态平衡，进样，收集高浓度车叶草苷流分，浓缩干燥即得车叶草苷5. 3g，含量为98.3%。权利要求1.，其特征在于包括以下步骤以长尾粗叶木的根或茎为原料，粉碎，加入4-8倍量50-75%的乙醇超声提取，提取液加入适量活性炭保温脱色，脱色液浓缩，通过大孔树脂柱富集，水和30-50 %的乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩，干燥，干燥物采用高速逆流色谱法分离得到车叶草苷。2.根据权利要求1所述的，其特征在于所述活性炭为针剂类医用活性炭，用量为液体量的0. 3-0. 6%。3.根据权利要求1所述的，其特征在于所述大孔树脂型号可 it D-10U LSA-20.HZ826 和 AB-8 中的任一种。4.根据权利要求1所述的，其特征在于所述高速逆流色谱的两相溶剂系统为乙酸乙酯-正丁醇_水 2-3 4-5)，上相为固定相，下相为流动相， 色谱仪转速为800-950rpm。全文摘要本专利技术涉及，具体步骤为以长尾粗叶木的根或茎为原料，粉碎，加入本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种车叶草苷的制备方法，其特征在于包括以下步骤：以长尾粗叶木的根或茎为原料，粉碎，加入４－８倍量５０－７５％的乙醇超声提取，提取液加入适量活性炭保温脱色，脱色液浓缩，通过大孔树脂柱富集，水和３０－５０％的乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩，干燥，干燥物采用高速逆流色谱法分离得到车叶草苷。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘东锋，万冬梅，杨成东，
申请(专利权)人：南京泽朗医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：84