一种基于免疫磁珠富集的甲型流感病毒检测试剂盒及方法技术

本发明专利技术公开了一种基于免疫磁珠富集的甲型流感病毒检测试剂盒及方法，试剂盒包括A、免疫富集反应体系组分；B、环介导的等温核酸扩增体系组分；C、抗体的制备；D、免疫磁珠的制备；E、设计甲型H1N1流感病毒的特异性引物，用于环介导的等温65?C扩增反应。检测方法是：a、免疫富集；b、热裂解上述产物、经磁力架分离，将含有病毒核酸的上清作为环介导等温扩增反应的模板；c、环介导等温扩增反应；d、结果判定。该试剂盒具有操作简单、快速、特异性好、灵敏度高、对硬件要求低等优势，可广泛应用于各级疾病预防控制机构，流感监测网络实验室，哨点医院等对发热病人鼻咽拭子等标本的甲型H1N1流感病毒的检测和监测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物技术应用领域，更具体涉及一种甲型Hmi流感病毒的检测试剂盒，同时还涉及一种甲型Hmi流感病毒的检测方法，可应用于各级疾病预防控制机构，流感监测网络实验室，哨点医院等对发热病人鼻咽拭子等标本的甲型Hmi流感病毒的检测和监测。
技术介绍
2009年3月墨西哥爆发“人感染猪流感”疫情，造成人员死亡。研究发现，此次疫情的病原为变异后的新型甲型Hmi病毒，包括猪流感、禽流感和人流感三种流感病毒的基因片段。该病毒具有较强的传染性、可通过近距离飞沫和接触传播。临床主要表现为流感样症状，少数病例病情重，进展迅速，可出现病毒性肺炎，合并呼吸衰竭、多脏器功能损伤， 严重者导致死亡。目前，甲型Hmi流感疫情已在全球较大范围内传播，这场持续了一年多的疫情造成约1. 85万人死亡，出现疫情的国家和地区达到了 214个。截止至2010年3月 31日，中国31个省份累计报告甲型Hmi流感确诊病例12. 7余万例，，死亡病例800例。已有的甲型流感病毒监测方法主要包括病毒分离培养、病毒核酸检测和血清学检查。其中病毒分离培养费时费力，无法满足疾病流行期间同时处理大量标本的需要，而甲型流感病毒特异性本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种甲型Ｈ１Ｎ１流感病毒的检测试剂盒，其特征在于：Ａ、免疫富集反应体系组分：标记甲型Ｈ１Ｎ１流感病毒特异性单克隆抗体的免疫磁珠，直径：１００－３００　ｎｍ；工作稀释浓度：１：１０－１：２０；０．１　Ｍ　磷酸盐缓冲液ｐＨ　７．２－　ｐＨ７．４；无菌超纯水；Ｂ、环介导的等温核酸扩增体系组分：Ｂｓｔ　ＤＮＡ聚合酶、１０×Ｂｓｔ　ＤＮＡ聚合酶缓冲液、ＡＭＶ反转录酶、Ｃａｌｃｅｉｎ　、　ｄＮＴＰ　、Ｂｅｔａｉｎｅ、ＭｇＳＯ４、１０×引物混合物：Ｆ３：　２　μＭ；Ｂ３：　２　μＭ；ＦＩＰ：　１６　μＭ；ＢＩＰ：　１６　μＭ；Ｌｏｏｐ－１：　８　μＭ；Ｌｏｏｐ－２：　８０　μＭ；Ｃ、抗体的制备：采用标准...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张先恩，王殿冰，危宏平，张治平，
申请(专利权)人：中国科学院武汉病毒研究所，
类型：发明
国别省市：83