一种提取纯化精液DNA的方法技术

本发明专利技术公开了一种提取纯化精液DNA的方法。该方法包括以下步骤：1)预处理：将精液与预处理裂解液接触，去除生物细胞所粘附的固体物质，得到粗裂解液；2)核酸吸附：将步骤1)得到的粗裂解液与裂解结合液以及磁珠悬浮液混合，形成含有磁性纳米微球-DNA的复合体的溶液体系，收集所述溶液体系中的磁性纳米微球-DNA的复合体；3)洗涤：将步骤2)得到的磁性纳米微球-DNA的复合体依次用洗涤液I、洗涤液II洗涤，然后用洗脱液溶出DNA。本发明专利技术提供的方法提取DNA的效率可达90％，提取的DNA可应用于STR复合扩增、DNA测序、DNA定量等下游分析操作。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
，特别涉及一种提取纯化DNA的方法。
技术介绍
DNA分离纯化是分子生物学实验中非常重要的操作，核酸的质量直接关系到后续操作能否顺利进行。生物学、法医学和基因组学的发展，强化了对从各种生物检材中获得核酸的复杂方法的需求。例如，脱氧核糖核酸提供了广泛的关于遗传起源和遗传多态性信息。 这些信息可用于法医遗传学鉴定实践。目前所存在的各种核酸纯化方法皆可分成以下两大类液相纯化和固相纯化。在液相纯化中，核酸维持为液体状态，而杂质通过沉淀、离心被除去或者核酸被沉淀出来，而杂质被保留；在固相纯化中，核酸被结合到固相载体上，而杂质被选择性洗脱。例如，采用液相纯化来分离的DNA保留在液相中，而杂质被通过诸如沉淀和/或离心之类的方法除去。在固相纯化中DNA结合到固相载体上，而杂质如RNA、蛋白质和磷脂等被选择性洗脱。在DNA 纯化中，如果起始材料包括细胞，液相方法和固相方法都需要细胞或病毒共破裂，或裂解步骤。破裂或裂解步骤产生与污染物如RNA、脂质、碳水化合物、蛋白质等混合的DNA。这种混合物还含有降解DNA的必须被除去和/或灭活以不感染产生基本上未降解的DNA的DNA酶。本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．提取纯化ＤＮＡ的方法，包括以下步骤：１）预处理：用预处理裂解液裂解生物样品，得到粗裂解液，所述生物样品是精液；其中，预处理裂解液：ｐＨ为７．６，溶剂是水，溶质是如下终浓度的物质：９０ｍＭ　Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ，４．５ｇ／１００ｍｌ的十二烷基磺酸钠ＳＤＳ，６ｍＭ的ＥＤＴＡ和７０ｍＭ的ＮａＣｌ，１．０ｍｇ／ｍｌ的蛋白酶Ｋ，０．０５Ｍ二硫苏糖醇；２）核酸吸附：将步骤１）得到的粗裂解液与裂解结合液以及磁珠悬浮液混合，形成含有磁性纳米微球－ＤＮＡ的复合体的溶液体系，收集所述溶液体系中的磁性纳米微球－ＤＮＡ的复合体；其中，裂解结合液：ｐＨ为７．２，溶剂是水，溶质是如下终浓度的物质：２０ｍＭ的Ｔｒｉｓ－ＨＣ...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：赵兴春，周云彪，叶健，
申请(专利权)人：公安部物证鉴定中心，
类型：发明
国别省市：11