一种双酚A快速检测卡及其检测方法技术

一种双酚A快速检测卡及其检测方法，属于食品容器用聚碳酸酯成型品中酚含量检测技术领域。本发明专利技术双酚A快速检测卡外壳内有测试条，由支承背板上依次粘贴样品垫、胶体金膜、硝酸纤维素膜和吸水膜所组成；胶体金膜为含抗双酚A单克隆抗体或多克隆抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有两条印迹显示带，一条为含双酚A蛋白质偶联物的检测带，另一条为含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带。本发明专利技术优点是应用免疫学的方法直接检测塑料奶瓶等样品中双酚A的含量。本发明专利技术双酚A快速检测卡易于制备，使用方便快速，结果准确。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种双酚A快速检测卡及其检测方法，是一种检测双酚A的检测器具， 属于食品容器用聚碳酸酯成型品中酚含量检测

技术介绍
双酚A 简称双酚基丙烷(BPA)，是聚碳酸酯PC的重要原料，许多日常消费品如食品包装容器、婴儿奶瓶等儿童用品都可能含有双酚A。双酚A属于环境内分泌干扰物， 在加热时能析出到食物和饮料当中，它可能扰乱人体代谢过程，对婴儿发育、免疫力有影响，甚至致癌。此外，双酚A有雌性荷尔蒙效果，可能会导致男孩女性化，女孩性早熟等。同时它影响成年人的生理功能，长期暴露在双酚A里的工人生育功能会受到很大影响。由于关于双酚A的各项研究结果和不良事件的发生，许多国家都对这种化学物质的生产和使用进行了整顿。比如，美国已经率先禁止婴儿奶瓶等食品和饮料容器中使用化学物质双酚A ；加拿大政府去年就明令禁止进口和销售含双酚A成分的聚碳酸酯塑料婴儿奶瓶。欧盟将于2011年3月起禁止生产含有双酚A的塑料奶瓶，从2012年6月起禁止进口或在市场上销售含有双酚A的塑料奶瓶。此举引发很多人尤其是新妈妈们的担忧，而目前国内市场上的奶瓶八成以上是含有双酚A的PC材料奶瓶。《GB14942-1994食品容器、包装材料用聚碳酸酯成型品卫生标准》中规定奶瓶中酚类物质通过蒸馏水回流6小时的溶出游离量不大于0. 05毫克/公斤。目前，现有技术对于双酚A的检测有滴定法、比色法和示波极谱法，这些方法普遍存在操作繁琐，对实验仪器设备要求高，需要专门技术人员操作等缺点。为此，本专利技术拟专利技术一种基于双酚A蛋白质偶联物抗原性的免疫学检测方法，采取免疫学竞争法的原理，结合胶体金标记技术和免疫层析法设计的一种快速检测试剂，可快速特异地检测塑料奶瓶中含有的双酚A。根据检测卡样品测试线(T)和对照线(C)的有无来判定塑料奶瓶样品中的双酚A含量。本专利技术是利用双酚A蛋白质偶联物抗原性而建立的一种检测方法，具有特异性强的优点，可避免其它检测方法的假阳性导致的误检问题。本专利技术由于样本量需要少、简便快速，适用于大量样本的筛查。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种能检测双酚A的检测器具，应用免疫学的方法直接检测塑料奶瓶中双酚A的含量，克服现有技术操作繁琐、对仪器设备要求高的缺点，建立基于免疫学特异性的检测方法。本专利技术的技术方案一种双酚A快速检测卡，其为在长条扁平薄壳状的检测卡外壳1中设置测试条2，检测卡外壳表面有检测窗孔3和加样孔4 ；测试条2是由支承背板5 上通过不干胶在其上依次粘贴样品垫8、胶体金膜7、硝酸纤维素膜6、和吸水膜9所组成； 支承背板中部叠置粘贴硝酸纤维素膜6，支承背板一端叠置粘贴吸水膜9，另一端叠置粘贴样品垫8，吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部，两者之间夹置粘贴一段胶体金膜7 ；胶体金膜为含抗双酚A抗体胶体金标记的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有一条检测带和一条质控带，依次是含双酚A蛋白质偶联物的检测带10，含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带11，测试条置入检测卡外壳内，样品垫正对加样孔，硝酸纤维素膜正对检测窗孔。采用上述双酚A快速检测卡，检测样品可以是塑料奶瓶、水瓶等食品容器。 其检测样品的处理方法是称取约Ig试样，精确至O.Olg，加蒸馏水IOOmL,水浴加热微沸回流6小时，取蒸馏液用于测定。当检测带10和质控带11同时显现棕红色印迹带，检测结果为阴性，表示被检测样品中双酚A含量低于允许值；当检测带10不显示颜色，只有质控带11显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表示被检测样品中双酚A含量高于允许值；当检测带10和质控带11均不显色，则表明测试条已失效。本专利技术的优点是能检测塑料奶瓶中含有的双酚A，易于制备且节省检测费用，使用方便，检测快速，灵敏度高，结果准确。附图说明图1双酚A快速检测卡外壳及测试条在外壳内的安置图。1、检测卡外壳，2、测试条，3、检测窗孔，4、加样孔。图2测试条的硝酸纤维膜上显示印迹示意图。6、硝酸纤维素膜，10、检测带，11、质控带。图3双酚A快速检测卡的测试条结构示意图。5、支承背板，6、硝酸纤维素膜，7、胶体金膜，8、样品垫，9、吸水膜。具体实施例方式本专利技术结合具体实施例参见附图进一步说明如下 实施例1一种双酚A快速检测卡，它是在检测卡外壳1中设置测试条2，检测卡外壳1的结构及测试条2的设置参见附图1，检测卡外壳1为长条扁平薄壳状外壳，长70mm，宽20mm，厚5mm， 薄壳壁厚1mm，由工程塑料制成。检测卡外壳1由壳盖与壳座两半联接构成，在检测卡外壳 1壳盖上有检测窗孔3和加样孔4。测试条2放置在检测卡外壳1的壳座内。测试条2是多层结构的窄条薄片，片长约60mm，片宽约4mm，厚度约2. 5mm。测试条2是多层结构底层是支承背板5，为聚氯乙烯塑料薄片，厚约0. 5mm,长60mm，宽4mm ；支承背板5中部叠置粘贴硝酸纤维素膜6，硝酸纤维素膜厚0. 5mm,长20_25mm，宽4mm。硝酸纤维素膜6上有二条间隔开的横向显示印迹带，参见附图2，二条显示印迹带中，一条是检测带10，含双酚A蛋白质偶联物；另一条是质控带11，含抗兔抗体或抗鼠抗体。支承背板5 一端部上叠置粘贴吸水膜9，支承背板5另一端部上叠置粘贴样品垫8，吸水膜9内端与样品垫8内端各自分别与硝酸纤维素膜6 —端搭接，在样品垫8与硝酸纤维素膜6的搭接部， 两者之间夹置粘贴一段胶体金膜7，胶体金膜7是含抗双酚A单克隆抗体或多克隆抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜。胶体金膜7厚0. 5-0. 8mm,长5mm，宽4mm。样品垫8厚0. 5-0. 8mm, 长20_，宽4_。吸水膜9厚0. 5-0. 8mm,长16-20_，宽4_。胶体金膜7、样品垫8及吸水膜9与硝酸纤维素膜搭接长度为l_2mm。吸水膜9材料是吸水纸，样品垫8材料是吸水玻璃纤维膜。本专利技术双酚A检测卡用于塑料奶瓶中的双酚A含量的检测。实施例2样品的处理方法是称取约Ig试样，精确至0. Olg，加蒸馏水IOOmL,水浴加热微沸回流6小时，取蒸馏液用于测定。使用双酚A快速检测卡进行检测时，先将待检测的样品液从加样孔4中滴注入双酚A快速检测卡的样品垫8上，由于虹吸作用原理，带动待检测的样品液及胶体金膜7所含的抗双酚A单克隆抗体或多克隆抗体胶体金标记物一起向硝酸纤维素膜6扩散，5-10分钟内观察结果。检测卡的主要反应是免疫学的抗原和抗体反应，在硝酸纤维素膜上迁移的胶体金标记的抗体，在测试带上分别与含双酚A蛋白质偶联物，以及质控带抗兔抗体或抗鼠抗体反应，形成棕红色条带。若样品中有待检双酚A存在，当样品加入后即与抗体发生反应，而不会与检测带所含的双酚A反应，从而不显色。主要反应的结果有以下3种情况1、当显示检测带10和质控带11同时显现棕红色印迹带，表示检测结果为阴性，说明被检测样品中双酚A含量未超标。2、当检测带10不显示颜色，只有质控带11显现棕红色印迹，检测结果为阳性，说明被检测样品中双酚A含量超标。3、当检测带10和质控带12均不显色，则表明检测试条已失效。本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种双酚Ａ快速检测卡，其特征在于：在长条扁平薄壳状的检测卡外壳（１）中设置测试条（２），检测卡外壳表面有检测窗孔（３）和加样孔（４）；测试条（２）是由支承背板（５）上通过不干胶在其上依次粘贴样品垫（８）、胶体金膜（７）、硝酸纤维素膜（６）、和吸水膜（９）所组成；支承背板中部叠置粘贴硝酸纤维素膜（６），支承背板一端叠置粘贴吸水膜（９），另一端叠置粘贴样品垫（８），吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部，两者之间夹置粘贴一段胶体金膜（７）；胶体金膜为含抗双酚Ａ抗体胶体金标记的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有一条检测带和一条质控带，依次是：含双酚Ａ蛋白质偶联物的检测带（１０），含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带（１１），测试条置入检测卡外壳内，样品垫正对加样孔，硝酸纤维素膜正对检测窗孔。

【技术特征摘要】
1.一种双酚A快速检测卡，其特征在于在长条扁平薄壳状的检测卡外壳(1)中设置测试条(2)，检测卡外壳表面有检测窗孔(3)和加样孔(4);测试条(2)是由支承背板(5)上通过不干胶在其上依次粘贴样品垫(8)、胶体金膜(7)、硝酸纤维素膜(6)、和吸水膜(9)所组成；支承背板中部叠置粘贴硝酸纤维素膜(6)，支承背板一端叠置粘贴吸水膜(9)，另一端叠置粘贴样品垫(8)，吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部，两者之间夹置粘贴一段胶体金膜(7);胶体金膜为含抗双酚A抗体胶体金标记的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有一条检测带和一条质控带，依次是含双酚A 蛋白质偶联物的检测带...

【专利技术属性】
技术研发人员：周坚，吴文晔，熊晓芳，
申请(专利权)人：无锡安迪生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：32