抗肿瘤组合制造技术

本发明专利技术提供了ｍＴＯＲ抑制剂和抗肿瘤烷化剂的组合在治疗肿瘤中的应用。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及mTOR抑制剂(例如雷帕霉素与3-羟基-2-(羟基甲基)-2-甲基丙酸的42-酯(CCI-779))和抗肿瘤烷化剂的组合在治疗肿瘤中的应用、mTOR抑制剂和抗肿瘤烷化剂在制备治疗肿瘤的药物中的应用、用于治疗哺乳动物肿瘤的以同时、单独或相继应用的联合制剂形式包含mTOR抑制剂和抗肿瘤烷化剂的产品、以及包含mTOR抑制剂、抗肿瘤烷化剂和可药用载体的药物组合物。
技术介绍
雷帕霉素是一种由吸湿链霉菌所产生的大环三烯类抗生素，发现其在体外和体内都具有抗真菌活性，特别是具有对抗白色念珠菌的活性。此外，已经表明单独(US 4,885,171)或与溶血链球菌联合(US 4,401,653)的雷帕霉素具有抗肿瘤活性。在FASEB 3，3411(1989)中已经公开了雷帕霉素的免疫抑制作用。还表明环孢菌素A和其它大环分子——FK-506作为免疫抑制剂是有效的，因此，其可用于预防移植的排斥反应。R.Martel等人公开了雷帕霉素在一种用于多发性硬化的模型——实验性过敏脑脊髓炎模型；在一种用于类风湿性关节炎的模型——佐剂关节炎模型中都是有效的，并且可以有效地抑制类-IgE抗体的形成。雷帕霉素还可用于预防或治疗全身性红斑狼疮、肺炎、胰岛素依赖型糖尿病、皮肤病，如牛皮癣、内脏病症、平滑肌细胞增生和血管损伤后的内膜变厚、成人T-细胞白血病/淋巴瘤、眼睛炎症、恶性癌、心脏炎性疾病、和贫血。已经证明雷帕霉素与3-羟基-2-(羟基甲基)-2-甲基丙酸的42-酯(CCI-779)是在体外和体内模型中都对肿瘤生长有显著抑制作用的雷帕霉素酯。在US 5,362,718中公开了包括CCI-779在内的雷帕霉素的羟基酯的制备和应用。CCI-779表现出与细胞毒性完全不同的细胞抑制作用，并且可以延迟肿瘤的发展时间或肿瘤复发的时间。认为CCI-779具有与sirolimus的作用机理相似的作用机理。CCI-779与胞浆蛋白FKBP相结合并与之形成一种复合体，其抑制了一种酶，mTOR(雷帕霉素的哺乳动物靶目标，也被称为与FKBP12-雷帕霉素有关的蛋白)。对mTOR的激酶活性的抑制作用抑制了许多信号转导途径，从而抑制了细胞周期从G1到S的进行，其中所说的转导途径包括细胞因子-刺激的细胞增殖、mRNA对于一些调控细胞周期G1期的关键蛋白的翻译、和IL-2-诱导的转录。可以产生G1-S期传导阻滞的CCI-779的作用机理对于抗癌药而言是新的。在体外，CCI-779已经表现出可以抑制许多在组织形态学上分化的肿瘤细胞的生长。神经系统(CNS)癌、白血病(T-细胞)、乳癌、前列腺癌、和黑素瘤系是对CCI-779最敏感的物质中的一些。该化合物抑制了细胞周期的G1期中的细胞。用裸鼠进行体内研究已经证明CCI-779具有对抗各种组织形态类型的人肿瘤异种移植物的活性。神经胶质瘤对于CCI-779特别敏感并且该化合物在裸鼠正位神经胶质瘤模型中有效。CCI-779可以显著抑制体外生长因子(血小板来源的)-诱导的人成胶质细胞瘤细胞系。CCI-779还抑制了一些人胰腺肿瘤在裸鼠体内的生长以及两种乳癌系之一在体内的生长。
技术实现思路
本专利技术提供了mTOR抑制剂和抗肿瘤烷化剂的组合作为抗肿瘤的组合化疗的应用。这些组合特别是可用于治疗肾癌、软组织癌、乳癌、肺的神经内分泌的肿瘤、宫颈癌、子宫癌、头脖癌、神经胶质瘤、非小细胞肺癌、前列腺癌、胰腺癌、淋巴瘤、黑素瘤、小细胞肺癌、卵巢癌、结肠癌、食道癌、胃癌、白血病、结肠直肠癌、和未知的原发癌。本专利技术还提供了用作抗肿瘤组合化疗的mTOR抑制剂和抗肿瘤烷化剂的组合，其中所用mTOR抑制剂或抗肿瘤烷化剂中任何一种的剂量或mTOR和抗肿瘤烷化剂两者的剂量都是亚治疗有效剂量。在另一方面，本专利技术提供了mTOR抑制剂和抗肿瘤烷化剂的组合在制备治疗肿瘤的药物中的应用。在另一方面，本专利技术提供了一种用于治疗哺乳动物肿瘤的以同时、单独或相继应用的联合制剂形式包含mTOR抑制剂和抗肿瘤烷化剂的产品。还是在另一个方面，本专利技术提供了一种包含mTOR抑制剂、抗肿瘤烷化剂和可药用载体的药物组合物。本专利技术中所说的术语“治疗”指的是通过给予所说哺乳动物有效量mTOR抑制剂和抗肿瘤烷化剂来对患有瘤性疾病的哺乳动物进行处理以抑制该类哺乳动物的肿瘤生长、根除肿瘤、或减轻该哺乳动物的痛苦。正如在本专利技术中所用的这样，在涉及给予该组合时的术语“给予”指的是直接将该组合进行给药或将在体内可形成该组合的有效量的该组合的一种或两种组分的前体药物、衍生物或类似物进行给药。mTOR是雷帕霉素在哺乳动物中的靶目标，其也被称为与FKBP12-雷帕霉素相关的蛋白。对mTOR的激酶活性的抑制作用抑制了许多信号转导途径，从而抑制了细胞周期从G1向S的进行，其中所说的信号转导途径包括细胞因子-刺激的细胞增殖，mRNA对于一些调控细胞周期G1期的关键蛋白的翻译、以及IL-2-诱发的转录。mTOR控制着特定细胞周期调节蛋白的翻译中所涉及的至少两种蛋白的活性(Burnett，P.E.，PNAS 951432(1998)和Isotani，S.，J.Biol.Chem.27433493(1999))。这些蛋白p70s6激酶中的一种被mTOR在丝氨酸389以及苏氨酸412上磷酸化。通过带有磷酸丝氨酸389残基特异抗体的这些细胞的整个细胞提取物的蛋白质印迹，在生长因子处理的细胞中可以观察到这种磷酸化作用。本专利技术所用的“mTOR抑制剂”指的是可以通过阻断细胞周期从G1到S的过程从而抑制细胞复制的化合物或配体，其中所说的阻断细胞周期从G1到S的过程是通过抑制由mTOR对p70s6激酶的丝氨酸389的磷酸化作用而进行的。可以用下面的标准药理学试验方法来测定这里所定义的化合物是否是mTOR抑制剂。正如通过蛋白质印迹所证明的那样，用mTOR抑制剂如雷帕霉素对生长因子刺激的细胞进行处理可完全阻断丝氨酸389的磷酸化作用，所说的蛋白质印迹组成了一种用于mTOR抑制作用的良好试验。因此，在存在mTOR抑制剂情况下培养的来自用生长因子(例如IGF1)进行了刺激的细胞的整个细胞溶解产物在丙烯酰胺凝胶上不应该表现出一种谱带，其中所说的丙烯酰胺凝胶能用特异于p70s6K的丝氨酸389的抗体进行标记。材料NuPAGE LDS样品缓冲液(Novex Cat#NP0007)NuPAGE样品还原剂(Novex Cat#NP0004)NuPAGE 4-12％Bis-Tris凝胶(Novex Cat#NP0321)NuPAGE MOPS SDS Running缓冲液(Novex Cat#NP0001)硝酸纤维素(Novex Cat#LC2001)NuPAGE转移缓冲液(Novex Cat#NP0006)Hyperfilm ECL(Amersham Cat#RPN3114H)ECL蛋白质印迹检测试剂(Amersham Cat#RPN2134)第一抗体磷酸-p70 S6激酶(Thr389)(Cell Signaling Cat#9205)第二抗体山羊抗-兔IgG-HRP复合物(Santa Cruz Cat#sc-2004)方法A.细胞溶解产物的制备使细胞系在另外添加了10％胎牛血清和青霉素/链霉素的最理想的基础培养基中进行生长。对于本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种对需要进行治疗的哺乳动物的肿瘤进行治疗的方法，其包括给所说的哺乳动物使用有效量的包含ｍＴＯＲ抑制剂和抗肿瘤烷化剂的组合。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员：G杜卡特，JJ小吉邦斯，
申请(专利权)人：惠氏公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]