含有粒细胞集落刺激因子和肿瘤坏死因子结合蛋白的产物制造技术

本发明专利技术涉及含有Ｇ－ＣＳＦ或其药学上可接受的盐和ＴＮＦ结合蛋白或其药学上可接受的盐，并且如果需要时还含有药学上可接受之载体的作为组合制剂的产品，Ｇ－ＣＳＦ或其药学上可接受的盐用于制造预防和／或治疗接受ＴＮＦ结合蛋白或其药学上可接受的盐之病人的败血性休克的药物，ＴＮＦ结合蛋白或其药学上可接受的盐用于制造预防和治疗接受Ｇ－ＣＳＦ之病人的败血性休克的药物。本发明专利技术还涉及治疗和／或阻败血性休克的方法，该方法包含合用ＴＮＦ结合蛋白或其药学上有活性的盐和Ｇ－ＣＳＦ或其药学上有活性的盐。（*该技术在2015年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及含有粒细胞集落刺激因子(G-CSF)或其药学上可接受的盐和肿瘤坏死因子(TNF)结合蛋白(TNF-BP)或其药学上可接受的盐，特别是在败血性休克的预防和/或治疗中作为结合制剂的产物。G-CSF是粒细胞成熟和分化中的基本因子〔MetcalfD.，Blood67，257-267(1986)〕。已经表明用G-CSF治疗可导致诱导的嗜中性白细胞减少症动物模型〔CohenA.M.etal.，Proc.Natl.Acad.Sa.USA84，2484-2488(1987)〕和嗜中性白细胞减少症病人〔Gabrilove，J.L.etal.，N.Engl.J.Med.318，1414-1422(1988)〕的免疫状况迅速改善。和这一发现一致的是，已证明G-CSF能减少嗜中性白细胞减少症病人和经受细胞抑制化疗之癌症病人中的热病发作和医院内获得性感染〔Crawford，J.etal.，N.Engl.J.Med.325，164-170(1991)〕的发生率。但是，G-CSF对嗜中性白细胞的影响不只限于分化和增殖。变得日益清楚的是，它在调解成熟白细胞功能中也起着重要的作用〔Lopez，A.F.etal.，J.Immunol.131，2983(1983)〕。最近发现，G-CSF能减小动物体内脂多糖(LPS)诱导的败血性休克的致死率〔Gorgen，I.etal.，J.Immunol.149，918-024(192)〕。这一点对于可溶性的TNF受体(TNFR)片段或含这样的可溶性片段的嵌合多肽来说也是已知的〔Lesslauer，W.etal.，Eur.J.Immunol.21，2883-2886(1991)〕。LPS诱导的休克模型已被广泛地用于鉴定在人类休克的预防和治疗中有潜在作用的化合物。但是，似乎感染诱导的败血性休克模型比LPS诱导的休克模型和临床状况关系更大〔Zanetti，G.etal.，J.Immunol.148，1890-1897(1992)〕。已经在由弥漫性大肠杆菌腹膜炎引发的休克模型中，研究了G-CSF和这样的嵌合多肽。在另一方面，G-CSF和上述嵌合多肽单独并不显示出存活率的明显增加，已令人惊奇地发现，当G-CSF和嵌合多肽两者用于同一模型时，则观察到保护功能明显改善的情况。因此，本的目的是提供含有G-CSF或其药学上可接受的盐和TNF-BP或药学上可接受的盐的作为同时地、分别或相继地用于败血性休克的预防和/或治疗之结合制剂的产物。本说明书和权利要求书中的术语G-CSF就本领域技术人员所知道的生物活性来说，是以其最广的意义使用的。并且该G-CSF包含科学文献和下述许多专利文献中限定和描述的(包括它们的制备及应用)的多肽(天然的或合成的，包括重组来源的，经过修饰的或没被修饰的)DE3027105，EP159566，EP215126，EP237545，EP396158，EP22-520，EP217404，EP230980，EP231819，DE3723781，EP263490，EP344796，EP355811，EP373679，EP401384，EP456812，EP459630，EP459516，EP439795，EP243153，EP272703，EP331186，EP335423，WO93/15211。如EP237545”〔人类多潜能G-CSF(hpG-CSF)〕中公开的G-CSF，即在其N末端可含蛋氨酸的重组体G-CSF是优选的。更具体地说，优选的是有特定氨基酸序列和由EP237545中给出的DNA序列编码的G-CSF。换句话说，除了自然来源的G-CSF外，术语G-CSF还包括由DNA序列编码的任何G-CSF，该DNA序列在原核和真核宿主细胞中表达后，产生的多肽产物至少有如EP237545中所述的天然产生的hpG-CSF的至少一部分一级结构和一种或多种生物学特性，所述的DNA序列选自(a)EP237545的表Ⅶ中列出的DNA的序列或其互补链;(b)在任何适当杂交条件下，如EP237545中所描述的或Sambrook等人在“MolecularCloning”(1959，ColdSpringHarborLab.Press，ColdSpringHarbor)中所描述的条件下杂交的DNA序列，(c)除了因遗传密码简并性外的，将能与(a)和(b)中所限定的DNA序列杂交的，并编码具有相同氨基酸序列之多肽的DNA序列。和上述一种序列杂交的DNA序列，即所谓的突变DNA序列，能通过随机的或位点针对性的突变或通过化学合成或通过聚合酶链反应(PCR)技术制备，该PCR技术使用基于EP237545中给出的DNA序列限定的引物并使本领域已知的和如Sambrook等人(S.a.)描述的或lnnis等人就PCR技术所描述的〔PCRProtocolsAGuidetoMethodsandApplications，AAcademicPress，Inc.(1990)〕已知方法完成的。因此，可使用这样的突变DNA序列，按已知的和如以上所提及的专利出版物中所描述的方法制备术语“G-CCF”所包含的突变G-CSF。EP243153，WO90/12874，WO89/05824，EP272703或EP456200中对突变体G-CSF作了限定并具体描述了它们的制备方法。如上所述，术语G-CSF包含天然或重组来源的，以及被修饰形式的G-CSF，例如，当偶联到不改变G-CSF之基本生物学活性的化学实体上时，即可以一种治疗上有利的方式修饰之。对多肽例如G-CSF的一种较好的和众所周知的修饰是将其偶联到有较宽的分子量范围(如500到20，000道尔顿)的水溶性多聚物例如聚乙二醇或聚丙二醇上。这样就可产生基本上无免疫原性的被保护的G-CSF，现有技术中可利用的和如由C.F.Meares编著的“Perspec-tivesinBioconjugateChemistry”(AmericanChemicalSociety，Washington1993)中，特别是如美国专利4，179，337号中所描述的有几种通过不同的连结物将G-CSF与多聚物相偶联的方式。EP401384，EP335423和EP473268中描述了被修饰的G-CSF和它们的制备。被修饰的G-CSF也包含如表现有不同糖基化特征的G-CSF，这些糖基化特征对于如EP370205中所述的以至少有一个附加多糖链形式存在的天然或重组G-CSF来说是已知的。术语TNF结合蛋白(TNF-BP)包括任何由足够的氨基酸组成以便能形成一种允许不论从何处或怎样得到的连结人类TNF之结构的蛋白质或蛋白质片段。这样的TNF-BF可以抗TNF的抗体如单克隆抗体，也可以是如WO91/02078中所述的抗人TNF的任何类型的嵌合抗体。这种嵌合抗体是其分子的不同部分有不同的物种起源的，即人和动物的，如小鼠，大鼠或兔子来源的抗体。在这种抗体的优选具体实例中，只有互补决定区是非人类起源的，并且在需要的可变区中可含有附加的氨基酸。可依据已知的和如在EP239400或WO90/07861中所述的方法制备这些抗体。如上限定的TNF-BP也可以是任何自然发生的或重组制造的TNF受体或其一部分，更好是含有从人P55-或本文档来自技高网...

【技术保护点】
含有Ｇ－ＣＳＦ或其药学上可接受的盐和ＴＮＦ结合蛋白或其药学上接受的盐，以及如果需要的话还含有药学上可接受的载体的作为组合制剂的产品。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：G阿尔伯，P安盖恩，
申请(专利权)人：弗哈夫曼拉罗切有限公司，
类型：发明
国别省市：CH[瑞士]