杀菌/增强通透性蛋白质产物的治疗用途制造技术

本发明专利技术涉及用于症状治疗的治疗学方法，包括施用杀菌／增强通透性（ＢＰＩ）蛋白质产物来中和肝素的抗凝血活性，抑制血管形成、肿瘤和内皮细胞增生，治疗慢性发炎性疾病。（*该技术在2014年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本申请系1994年3月11日提交的申请号为94191892.0专利技术名称与本申请相同的申请的分案申请，而后者是申请日为1993年3月12日的美国专利申请08/030,644的部分继续申请。本专利技术涉及杀菌/增强通透性(BPI)蛋白质产物的治疗用途，它们用于治疗与革兰氏阴性细菌感染有关的病情及与革兰氏阴性细菌感染不直接相联系的病情，包括中和肝素的抗凝血特性，抑制血管形成，肿瘤及内皮细胞增生和治疗慢性发炎疾病状态(如关节炎)。肝素结合肝素是一组不均一的直链阴离子粘多糖，称为葡糖氨基葡聚糖，具有抗凝血特性。在肝素中出现的主要糖类有(1)α-L-艾杜糖醛酸2-硫酸盐，(2)2-脱氧-2-磺氨基-α-D-葡萄糖6-硫酸盐，(3)β-D-葡萄糖醛酸，(4)2-乙酰氨基-2-脱氧-α-D-葡萄糖，和(5)α-L-艾杜糖醛酸，尽管可能存在其他的糖类。这些糖类通常按(2)＞(1)＞(4)＞(3)＞(5)的顺序含量递减，并以糖苷键连结，形成大小不同的多聚体。肝素具有强酸性，因为它含有共价相连的硫酸和羧酸基团。肝素在肥大细胞颗粒中发现并经脱颗粒而释放。肝素的一种细胞相关性形式称为硫酸乙酰肝素。硫酸乙酰肝素是一个广义的术语，用于描述各种在哺乳动物细胞膜表面和胞外基质中发现几乎随机分布的硫酸化蛋白聚糖(HSPG′S)。HSPG含有可变百分比的五聚体肝素样序列，其功能与可溶肝素相似。HSPG′s作为抗凝血酶HI(ATIII)和肝素结合生长因子(如成纤维细胞生长因子(FGF)1-5，IL-8，GM-CSF和IL-3)的仓库。Folkman etal.，InflammationBasic Principles and Clinical Correlates ZdEd.Chapter 40，PP821-839(1992)。事实上，用遗传方法制备的HSPG′s缺乏性细胞需要外源性肝素用于生长。在外科手术过程中(如心肺旁路，心脏导管插入和血液透析程序)，为阻止该过程中的血液凝固，通常以达到400U/Kg的剂量施用肝素。肝素在血液中的抗血凝效力是肝素与ATIII相互作用的结果。肝素/ATIII复合物是凝血级联过程中的许多凝血因子的有效抑制剂。对激活的因子IXa，Xa，XIa、XIIIa和凝血酶的特异性抑制已被证实。肝素/ATIII复合物对因子Xa和凝血酶具有最高亲和力，因子Xa和凝血酶是内部和外部凝血途径共有的，作为导致纤维蛋白原转化为纤维蛋白的凝血级联的最后两步牵涉到这两个途径。当在手术过程中施用肝素以产生抗凝血效力时，手术后治疗的一个重要方面是立即中和肝素的效力以便恢复正常的凝血功能。通常用鱼精蛋白中和肝素。鱼精蛋白是一种通常从鲑鱼精子中分离出的低分子量的简单蛋白质。它们富含精氨酸残基并具有强碱性。单独用药时，鱼精蛋白(通常以鱼精蛋白硫酸盐的形式)具有抗凝血效力。当在存在肝素的条件下用药时，形成一种稳定的复合物，并且两种药物的抗凝血活性丧失。鱼精蛋白明显的降低血压和类过敏性效力限制了其临床使用。报道的其他具有肝素中和活性的化合物包括血小板因子4(PF4)和主要的碱性蛋白质，见美国专利5,086,164。主要的碱性蛋白质证实具有肝素中和活性，但也具有高毒性。血管形成血管形成与内皮细胞增生密切相关并构成新毛细血管的发育。因此，它是哺乳动物发育和生长的重要过程。在月经过程中，血管形成生长因子(如成纤维细胞生长因子1-5)的释放经一种肝素依赖性受体结合机制诱导内皮细胞的增生。见Yayon et al.，Cell，64841-848(1991)。这些肝素结合生长因子能由血管创伤(伤口愈合)，免疫刺激(自身免疫疾病)，发炎介质(前列腺素)和从肿瘤细胞释放。血管形成还与一些希望抑制该新血管发育的病理状态相关。作为一个例子，血管形成对各种肿瘤的生长，增生和转移是关键的。其他与血管形成相关的病理状态包括糖尿病的视网膜病，晶状体后的纤维组织形成，新血管青光眼，牛皮癣，血管纤维瘤，免疫和非免疫性发炎(包括类风湿性关节炎)、动脉粥样硬化斑内的毛细血管增生，血管瘤，子宫内膜异位和卡波济肉瘤。Folkman等(出处同上)公开了皮肤牛皮癣损害受上皮增生，新血管形成，和发炎细胞浸润的支配。然而，血管形成是牛皮癣的发病机理中的一步还是一种继发性现象尚不清楚。一些物质已知具有血管形成抑制剂的功能，并已报道了抑制肿瘤血管形成，防止关节炎的发作以及抑制在胶原蛋白诱导的关节炎模型中建立的关节炎，Peacock et al.J.Exp.Med.175，1135-1138(1992)。作为一个例子，鱼精蛋白已知抑制肿瘤血管形成及随后的肿瘤生长。根据Taylor et al.，Nature，297307-312(1982)，鱼精蛋白的抗血管形成活性由其结合肝素的能力所引起。已知PF4也表现出抗血管形成活性。本专利技术感兴趣的是美国专利5,112,946公开的具有抗血管形成活性但缺乏结合肝素能力的被修饰的PF4及其类似物。PF4已被证明至少具有两种功能特征。尽管肝素结合已被最广泛地研究，但PF4最初被描述为具有胶原酶抑制特性。胶原酶抑制剂是第一个发现的血管形成抑制剂。见Folkman 1973，(出处同上)。PF4肝素结合区中的突变对胶原酶抑制活性的影响检查不到。令人感兴趣的是，凝血酶敏感蛋白也是一种血管形成抑制剂并以丝氨酸/色氨酸区域代替碱性氨基酸区域与肝素结合。因此，没有明显的肝素结合或血管形成抑制的单个一致性序列。公开的PCT专利申请WO 92/01003公开了葡糖氨基葡聚糖(肝素)衍生物的用途及其用于抑制肿瘤的侵袭力。公开的肝素衍生物被描述为基本上没有抗凝血活性，并能阻止宿主中肿瘤细胞转移瘤的形成。慢性炎症慢性炎症通常伴随着血管形成。关节炎是一种慢性综合症，其特征为外周关节发炎并伴随着滑膜增厚和免疫因子及细胞(如多形核白细胞(PMN)的流入。在类风湿性关节炎中，炎症是免疫驱动的，而在反应性关节炎中，炎症与滑膜组织受化脓性细菌或其它感染物的感染相关。Folkman等(1973.出处同上)还提出许多种类的关节炎从一个关节的发炎浸润占优势的时期到后期新血管血管翳侵入关节并开始破坏软骨。但在关节炎中是否血管形成是疾病的起因而不是一种表面现象尚不清楚。在类风湿性关节炎中，有证据表明血管形成是维持滑膜炎所必需的。尽管非类固醇抗炎药物(NSAIDs)，皮质类固醇和其它疗法在减轻关节炎的治疗方面提供了改进，但在本领域仍需要对关节炎和其他发炎疾病的更有效的疗法。现在了解到炎症和血管形成是可分开的但并不互相排斥的过程。已发现特异性血管形成蛋白刺激血管形成而不引起炎症，另外血管抑制类固醇能抑制血管形成而不减轻急性炎症。见Folkman，1973出处同上。令人感兴趣的是，已鉴定内毒素通过其对巨噬细胞细胞素和生长因子的刺激作为一种最有效的外源性血管形成刺激因子。杀菌/增强通透性蛋白质杀菌/增强通透性蛋白质(BPI)是一种从哺乳动物PMNs颗粒中分离出的蛋白质，PMNs是抵抗微生物侵入所必需的血细胞。经酸提取并结合离子交换色谱〔Elsbach，J.Biol.Chem.，25411000(1979)〕或E.Coli亲和色谱〔Weiss.et al.，Blood，69652(1987)〕从多形核嗜中性本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种ＢＰＩ蛋白质产物，用作肝素结合药物。

【技术特征摘要】
US 1993-3-12 08/030644;US 1993-7-15 08/0932021.一种BPI蛋白质产物，用作肝素结合药物。2.一种用于肝素结合的BPI蛋白质产物，用于中和肝素的抗凝血效力。3.一种用于肝素结合的BPI蛋白质产物，用于抑制血管形成。4.根据权利要求3的产物，其中抑制的血管形成与视网膜病有关。5.一种用于肝素结合的BPI蛋白质产物，用于抑制内皮细胞增生。6.根据权利要求3的产物，其中的内皮细胞增生与子宫内膜异位相联系。7.一种用于肝素结合的BPI蛋白质产物，用作一种避孕药。8.一种用于肝素结合的BPI蛋白质产物，用于抑制恶性肿瘤细胞增生。9.一种根据权利要求8的产物，其中的恶性肿瘤是卡波济肉瘤。10.一种用于肝素结合的BPI蛋白质产物，用于治疗慢性发炎疾病症状。11.根据权利要求10的产物，其中的慢性发炎疾病是关节炎。12.一种根据权利要求11的产物，其中的关节炎发炎疾病是类风湿性关节炎。13.一种根据权利要求11的产物，其中的关节炎发炎疾病是反应性关节炎。14.一种根据权利要求1，2，3，5，7，8和10中任意一项的产物，它是一种23-25KD的杀菌/增强通透性蛋白质氨基末端片段。15.一种中...

【专利技术属性】
技术研发人员：RG李特尔，H伽扎奴杉图茹，JB佩仁特，
申请(专利权)人：爱克索马技术有限公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]