藁本内酯用于防治动脉粥样硬化的用途制造技术

藁本内酯及其二聚体在制备防治动脉粥样硬化药物或保健食品中的应用。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药
，是藳本内酯用于制备防治动脉粥样硬化药物或保健食品的用途。
技术介绍
动脉粥样硬化(Atherosclerosis，AS)是心脑血管疾病的主要病理基础，导致血管壁形成大小不一的斑块，妨碍相应组织器官的血流供应。AS是一种侵犯全身动脉系统的疾病，导致的各种心脑血管病是重要的致残性和致死性疾病，它严重威胁着人类的健康。因此，广泛寻找预防和治疗药物具有深远的理论和实际意义。藳本内酯(Ligustilide)是从川芎、当归等伞型科植物的根部提取的一种挥发油成分，其化学结构式如下 根据有关报道，藳本内酯一直被认为是川芎、当归等传统活血化瘀类中药的主要活性成分之一，其易挥发，能聚合为二聚体。但至今未见藳本内酯对动脉粥样硬化有防治作用的报道。
技术实现思路
本专利技术从川芎等植物中提取藳本内酯，经动物实验，证明藳本内酯及其二聚体对动脉粥样硬化有防治作用，因而可用于制备防治动脉粥样硬化的药物或保健食品。藳本内酯的制备方法通常采用超临界萃取技术，将川芎或当归等植物干燥粉碎后用液态CO2进行萃取并富集。(详见《超临界流体萃取》，化学工业出版社，2002年出版)一.藳本内酯防治动脉粥样硬化实验本专利技术采用动脉粥样硬化大鼠模型，证明藳本内酯对动脉粥样硬化病变有防治作用。方法如下雄性Wistar大鼠40只，体重300±10g，购自中科院上海实验动物中心(合格证号SCXK沪2002-0010)，饲养于清洁级动物房。正常饲料喂养后，随机分成4组，即空白对照组、模型组、藳本内酯低剂量组及藳本内酯高剂量组，每组10只。除空白对照组外，其余各组均先给大鼠腹腔注射维生素D360万单位/kg，再喂食高脂饲料8周。所述高脂饲料配方为，3％胆固醇，0.5％胆酸钠，0.2％丙基硫氧嘧啶，5％白糖，10％猪油，81.3％基础饲料，搅拌均匀后，压制成颗粒，烘干成高脂饲料。空白对照组则先腹腔注射生理盐水，再喂食正常饲料8周。藳本内酯低剂量组在喂食高脂饲料的同时，每日灌胃给予2.5mg/kg藳本内酯；藳本内酯高剂量组在喂食高脂饲料的同时，每日灌胃给予25mg/kg藳本内酯；空白对照组与模型组则每日灌胃等量生理盐水。各组于8周后处死，取主动脉、心脏进行病理观测。模型组大鼠可观测到全身性的动脉粥样硬化病理改变。说明注射维生素D360万单位/kg后再喂食高脂饲料8周，就可形成动脉粥样硬化。详见专利申请《一种动脉粥样硬化大鼠模型的制备方法》(申请号200310108363)。然而藳本内酯低剂量组和高剂量组的大鼠，其病理指标明显轻于模型组，有的甚至不发生动脉粥样硬化。详见如下指标 1.主动脉病变程度观测 沿主动脉瓣至髂动脉分支处取出主动脉，纵向剪开，在10％福尔马林溶液中固定，大体观察，结合油红O染色。通过大体观察，参照《药理学实验方法学》(人民卫生出版社，2002出版)，病变分级如下0级内膜表面光滑，无斑块，评0分；0.5级内膜有轻度奶油色变化，但无凸出于表面的斑块，评0.5分；1级有明显的奶油色斑块，面积小于3mm2，评1分；2级斑块面积大于3mm2，评2分；3级斑块融合成片，大部分斑块面积大于3mm2，评3分；4级斑块几乎覆盖整个动脉内膜，评4分。2.冠状动脉病理观测 心脏在冠状沟下方和距心尖0.5cm处横断，取其间组织块，石蜡包埋，连续切片，作HE染色。另外，每组取3只大鼠在心脏相同部位作冰冻切片，进行油红O染色。参照《药理学实验方法学》(人民卫生出版社，2002出版)，每只动物观察10个动脉断面，冠状动脉病变程度分级采用以下标准分级0级动脉内膜无脂质浸润，评0分；0.5级内膜有轻度脂质浸润，评0.5分；1级内膜斑块占血管腔面积的1/4，评1分；2级内膜斑块占血管腔面积的1/2，评2分；3级内膜斑块占血管腔面积的1/2以上，评3分；4级斑块几乎堵塞整个管腔，评4分。实验结果1.主动脉形态观察 经油红O大体染色后，空白对照组未出现阳性。模型组大鼠主动脉出现大量斑块，病变评分达2.5±1.4，斑块区域主要分布于主动脉弓、腹主动脉及髂动脉分叉处。经石蜡包埋切片后，HE染色光镜下观察，空白对照组血管细胞排列整齐而完整；模型组病变部位内膜明显增厚，血管内皮细胞排列不完整，平滑肌细胞在内膜增生显著，与大量堆积的泡沫细胞形成动脉粥样硬化斑块，呈典型的动脉粥样硬化病变。藳本内酯的低、高剂量组均可显著降低主动脉的斑块面积，病变评分分别为1.5±1.1和0.45±0.50，其中高剂量组有5只未检测到动脉粥样硬化病变。结果见表1。表1 藳本内酯对大鼠主动脉粥样硬化病变影响结果评分(x±s)组别动物数(只)病变评分(分)空白对照组 10 0模型组 102.5±1.4低剂量藳本内酯组101.3±0.67*高剂量藳本内酯组100.45±0.50**与模型组比较*P＜0.05，**P＜0.01由表1可见，藳本内酯能够显著降低主动脉粥样硬化病变程度。2.心脏病理观察 空白对照组大鼠心脏冠状动脉经油红O染色后未发现阳性区域。模型组大鼠出现典型的冠状血管AS病变，病变程度评分为1.9±0.8。病变区主要为内膜增厚，管腔严重狭窄；内皮和平滑肌层细胞排列紊乱，平滑肌增生明显。经冰冻切片、油红O染色后，AS病变区血管壁染色阳性，血管内膜堆积大量泡沫细胞。高剂量的藳本内酯可显著减轻大鼠冠状动脉病变程度，病变评分为0.95±0.50。结果见表2。表2 藳本内酯对大鼠冠状动脉粥样硬化病变影响结果评分(x±s)组别动物数(只)病变评分(分)空白对照组 10 0模型组 101.9±0.8低剂量藳本内酯组101.05±0.72高剂量藳本内酯组100.95±0.50*与模型组比较*P＜0.05由表2可见，藳本内酯能够显著降低冠状动脉粥样硬化病变程度。因此，藳本内酯可用于制备防治动脉粥样硬化的药物或保健食品。二、实施例一 制备藳本内酯从中药川芎中提取藳本内酯的提取方法(参见《超临界流体萃取》，化学工业出版社，2002年出版)1.原料将干燥的中药川芎粉碎成20目粗粉17.5kg，分两锅进料，投入萃取釜(杭州华黎泵业有限公司出品)中。2.萃取流程为CO2钢瓶-冷却系统萃取釜-解析釜1-解析釜2-储罐-循环。3.条件萃取釜压力29MPa，温度35℃；解析釜1压力7～8MPa，温度40℃；解析釜2压力6～7MPa，温度40℃；流速165~180kg/小时。提取3小时，共提两锅，第1锅进料10kg，第2锅进料7.5kg，从解析釜1收集到具有强烈川芎香气的油状物900ml。4.分离富集将该油状物分次上硅胶柱，按常规以环己烷丙酮进行梯度洗脱，收集含有藳本内酯的部分，减压浓缩即得藳本内酯。三、实施例二 制备藳本内酯软胶囊剂1.配方与配比藳本内酯 20g蜂蜡 10g叔丁基对羟基茴香醚(BHA) 0.10g大豆油加至500g共压制成1000粒囊壳配方明胶 200g甘油 60g水 305.2g2.制备工艺①取蜂蜡，加大豆油250g，80℃水浴下熔融混匀，冷却至室温(25℃)。②加入叔丁基对羟基茴香醚，充分混匀。③加入藳本内酯，再加大豆油至500g，充分混匀，待用。④取明胶，加入适量的水使明胶吸水膨胀。另将甘油及余下的水置煮胶锅中加热至70-80℃，混合均匀，加入膨胀本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨鹏远，张卫东，芮耀诚，苏娟，张川，
申请(专利权)人：中国人民解放军第二军医大学，
类型：发明
国别省市：