预防和治疗疾病的免疫原性组合物及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种预防和治疗疾病的免疫原性组合物及其制备方法，主要是由特异性抗原、抗体、抗独特型抗体、重组ＤＮＡ和药用敷料组成。本发明专利技术具有疗效确切、特异性强、决定簇广并能进行集约化大规模生产的优点，尤其是能避免ＨＡＭＡ反应和异质性问题，且无毒副作用、安全性好。适用于作为人类恶性肿瘤、传染性疾病、自身免疫病、过敏性疾病和器官移植排斥的治疗性疫苗以及食品、保健品添加剂；还适用于作为畜禽传染病的治疗性疫苗以及畜禽饲料添加剂。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，特别是涉及一种，另外还涉及该预防和治疗疾病的免疫原性组合物的用途。
技术介绍
目前针对于恶性肿瘤、传染性疾病、自身免疫病、过敏性疾病、器官移植排斥等疾病的治疗尚无特效药物，多应用抗癌药物、抗病毒药物、免疫抑制剂等对上述疾病进行对症治疗，在临床使用过程中，上述药物常产生严重的毒副作用以及过敏反应，并很容易产生耐药性，给临床有效治疗上述疾病带来了一定的困难。近年来，对上述疾病治疗药物的研究重点逐渐转移到生物技术药物领域。特异性抗体的制备对相关疾病的诊断、治疗和预防具有重要意义，因而受到国内外生物医学界的广泛关注，已开展了大量的工作并取得了较大的进展。在现有技术中多采用单克隆抗体应用于疾病的诊断和生物治疗，其中单克隆抗体的制备方法一般包括获取疾病相关抗原、免疫小鼠和融合杂交瘤三个步骤，亦即a)首先利用生化和免疫化学的方法获取携带有疾病相关信息的抗原，b)然后将该疾病相关抗原多次重复注射入小鼠体内，待小鼠发生特异性免疫反应一定时间后，取出其脾脏并分离出带有疾病相关抗原信息的致敏淋巴细胞，再将该致敏淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，再筛选出针对于疾病相关抗原的阳性杂交瘤细胞进行体外扩增或接种于小鼠腹腔内，即可从培养上清液或小鼠腹水中获得所需的单克隆抗体。单克隆抗体作为治疗剂的研究也于近年获得重要进展。单抗药物(monoclonal antibody agents)可应用于治疗肿瘤、病毒性感染、心血管病以及其它疾患，尤其是用于传染性疾病的治疗，已显示出良好的应用前景。抗体药物一般包括两类，一是抗病原体单克隆抗体(简称单抗)或多克隆抗体(简称多抗)；二是抗病原体单抗或多抗偶联物，或称免疫偶联物(immunoconjugate)。免疫偶联物分子由单抗或多抗与“弹头”药物两部分构成，故称为导向药物，又称为生物导弹或“魔弹”(magic bullets)，与之相对应的治疗方法称为导向治疗。单抗或多抗所针对的靶标通常为病原体表面的相关抗原或特定的受体。用作“弹头”的物质主要有三类，即放射性核素、药物和毒素，其与单抗或多抗连接分别构成放射免疫偶联物、化学免疫偶联物和免疫毒素。自80年代以来，对抗病原体尤其是抗肿瘤单抗药物进行了大量研究，特别是自1997年以来，Rituxan、Herceptin在美国相继获批准用于临床肿瘤治疗，单抗药物的研究与开发有了新的发展势头，成为生物技术药物的新热点(甄永苏，单克隆抗体药物治疗肿瘤的研究现状与展望，中国医学科学院学报，2000，229-12)。尽管单抗药物的临床研究结果已为其应用于治疗肿瘤展示出良好的前景，但仍有许多问题需要进一步研究解决(Nguyen DT，Amess JA，Doughty H，et al.IDEC-C2B8 anti-CD20(rituxmab)immunotherapy in patients with low-grade non-Hodgkin′s lymphoma and lymphoproli ferative disordersevaluation of response on 48 patients.Eur J Haematol，1999，6276-82)。单抗药物存在的问题主要涉及免疫学和药理学两方面。免疫学方面的问题关键是人抗鼠Ig抗体(HAMA)反应，因为多年来用于临床研究的单抗药物多数使用小鼠单抗制备，往往导致HAMA反应。此外，病原体在抗原性方面的异质性，病原体的抗原性调变等也能影响单抗药物的疗效。药理学方面的问题主要是到达病原体的药量不足。单抗药物在体内运送过程中受多种因素影响。由于它是异体蛋白，会被网状内皮系统摄取，有相当数量将积聚于肝、脾和骨髓；再者就是机体对该异体蛋白产生抗体而降低其效力。单抗药物是大分子物质，通过毛细血管内皮层以及穿透病变部位均受到限制。(甄永苏，单克隆抗体药物治疗肿瘤的研究现状与展望，中国医学科学院学报，2000，229-12)。疾病的免疫治疗是利用病原体免疫原进行主动免疫来激发、增强机体对病原体的主动特异性免疫反应。目前所研究的病原体疫苗主要是基因工程疫苗、肽疫苗、核酸疫苗、抗独特型抗体疫苗。其中a)病原体基因工程疫苗是通过基因重组技术，将目的基因导入受体细胞而制备的疫苗。b)肽疫苗是基于在免疫反应中抗原在胞浆内降解为短肽，最后形成肽-MHC-TCR复合体最终激发细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应。c)核酸疫苗是由编码能引起保护性免疫反应的抗原基因片段和载体构建而成的，包括DNA疫苗和RNA疫苗，目前研究较多的为DNA疫苗。核酸疫苗能够同时刺激机体产生体液免疫和细胞免疫反应，诱导许多亚单位疫苗不能诱导的CTL效应。d)抗独特型抗体疫苗(Ab2疫苗)是根据抗独特型抗体具有模拟抗原及免疫调节的双重作用，同时能克服机体免疫抑制，打破免疫耐受故能代替病原体抗原诱发特异性主动免疫反应(Bhattacharya CM，Mukerjee S，biddle W，et al.Murine monoclonalanti-idiotype antibldy as a potential netword antigen for human carcinoembryonic antigen.J Immumol，1990，1452758.)。在上述病原体疫苗免疫治疗方法中，由于病原体抗原的抗原性强弱不同，且病原体宿主经常处于免疫抑制状态，难以激发有效的抗病原体反应。尽管抗独特型抗体的研究已取得许多进展，但事物总是两方面的。Ab2疫苗应用存在许多困难，因为抗独特型抗体β(Ab2β)虽能模拟小分子多肽抗原，却难以精确反映大分子蛋白质抗原的决定簇，尤其是Ab2β单抗。再者由于病原体抗原极其复杂，常发生调变等，制备广谱的病原体特异性独特型疫苗难度很大。更重要的是目前使用的Ab2β主要来自鼠杂交瘤细胞，为异种蛋白，能激发人免疫系统产生人抗鼠Ig抗体(HAMA)，发生中和反应并产生毒性免疫复合物，而降低疗效，严重时可引起血清病反应。禽类尤其是鸡在系统发育上与哺乳动物有很大差异，鸡的免疫球蛋白与哺乳动物免疫球蛋白在免疫学特性上也有很大不同。鸡的免疫系统能识别更多的免疫反应位点和更多的抗原决定簇，因此鸡免疫系统对哺乳动物的蛋白或生物分子能产生具有更高效价和亲和力的特异性抗体。鸡免疫系统针对于外源性蛋白所产生的IgY不仅具有更高的免疫特异性，更重要的是这种特异性IgY主要储存在鸡蛋黄中，因此可利用下蛋母鸡作为免疫反应器来大量生产具有重要临床应用价值的抗体药物。众所周知鸡蛋作为人类的常用食品和化妆品原料，无论内服和外用均对人体无任何生物毒性和不良作用。因此，利用禽类作为免疫反应器来大量生产抗体药物，并应用于疾病的诊断和免疫治疗，将具有极广阔的应用前景。以疾病特异性蛋黄抗体IgY为原料制备的免疫药物和抗独特型抗体疫苗(Ab2疫苗)可以很好地解决上述单抗偶联物或上述病原体疫苗所存在的HAMA反应和异质性问题。授权中国专利申请号93112409.3公开了“一种新型免疫原性复合物制剂及制备方法”，本专利技术由抗原与抗体组建，抗原量多于抗体量，利用抗原抗体复合物为载体，携带抗原，改变抗原提呈形式，增强机体免疫性。本专利技术采用血源本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种预防和治疗疾病的免疫原性组合物，主要是由抗原、抗体和重组ＤＮＡ组成，其特征在于：由有效量的抗原、抗体、抗独特型抗体、重组ＤＮＡ和药用敷料组成，其中抗原、抗体、抗独特型抗体是纯化或重组的特异性抗原、抗体、抗独特型抗体；重组ＤＮＡ是能够表达所述特异性抗原、抗体和抗独特型抗体中的任一种或其多种的重组ＤＮＡ质粒；其中各组分重量比分别为：抗原０．００１～９９％抗体０．００１～９９％抗独特型抗体０．００１～９９％重组ＤＮＡ０．０１～９９ ％药用敷料０．０１～９９％。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：郭占军，赵华，郭爱芹，杨焕云，赵歧刚，关涛，吴军英，赵清秀，
申请(专利权)人：郭占军，
类型：发明
国别省市：37[中国|山东]