五味子及其提取物治疗肿瘤多药耐药的用途制造技术

本发明专利技术涉及中药五味子、五味子提取物作为多药耐药逆转剂的新用途，特别是与抗肿瘤药物合用治疗有多药耐药性的肿瘤，提高肿瘤细胞对抗癌药的敏感性以及抗肿瘤的新用途。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及五味子、五味子提取物作为多药耐药逆转剂的新用途，特别是与抗肿瘤药物合用治疗有多药耐药性的肿瘤，提高肿瘤细胞对抗癌药的敏感性的新用途。本专利技术还涉及五味子抗肿瘤的新用途。
技术介绍
肿瘤细胞经过化疗后产生的获得性耐药以及某些肿瘤细胞本身具有内在耐药性仍然是肿瘤化疗失败的重要原因之一。产生多药耐药的机制非常复杂，存在于肿瘤细胞膜上的多药耐药糖蛋白(P-gp)的过度表达为主要机制，许多化疗药物都是P-gp的底物，例如长春碱类、蒽环类、表鬼臼毒素类、紫杉烷类等。逆转肿瘤细胞的多药耐药性从而使肿瘤细胞恢复对化疗剂的敏感性具有非常重要的临床应用价值。迄今已经发现不少化合物在体外及体内动物实验中具有很强的肿瘤多药耐药逆转作用，如包括维拉帕米的钙通道阻滞剂、钙调蛋白拮抗剂、环孢菌素类、喹啉类、抗雌激素类，然而运用到临床上，除对某些血液系统的肿瘤耐药有较为肯定的逆转作用外，对实体瘤耐药的逆转作用很不理想。一般认为，这些化合物在人体可耐受剂量下在体内不能达到有效的逆转浓度，而一旦加大剂量使其血药浓度到达体外试验中具有逆转活性的浓度时，就会产生严重的毒副作用，或者逆转剂与抗肿瘤药物合用时会改变抗肿瘤药物的药代动力学参数，从而产生不可预见的毒副反应。例如，本专利技术中作为阳性对照的维拉帕米，虽然在体外有很强的肿瘤耐药逆转活性，但是应用到体内却发现在未达逆转耐药浓度时就产生了心血管毒性，因而限制了其在临床上的使用。所以，开发作用强且毒副作用小的多药耐药逆转剂仍然是研究的主要方向。五味子是民间常用的中药，具收敛固涩，益气生津，补肾宁心功效，药用价值很高，是不可多得的滋补品，其主要化学成份为五味子素、挥发油类、苯果酸等。它能调节心血管系统，改善血液循环，促进肝细胞再生，增强肝脏的解毒能力，是主治精神衰弱、泻痢、盗汗以及肝脏疾病的良药。它还对人的中枢神精系统有兴奋作用，对不正常的血压有调整作用。此外，服五味子还可以提高视力，并有助于治疗眼疾。研究发现，五味子多种成份能保护肝脏免受一些化学毒物的损害，并能拮抗氧自由基损伤，刺激肝脏的合成代谢和增强细胞色素P450的活性，五味子属中的28种成分中五味子乙素、丙素、醇乙、酯乙、酯丙、酯丁等为降转氨酶的有效成分。临床现在常用的护肝片(双鹤制药)、降酶灵胶囊(湖南亚太制药)、复方乙肝灵(双鹤药业)等均具有良好的降酶和保肝活性。近来还有研究表明，五味子能增强大脑皮层兴奋和抑制过程，使其相互平衡。五味子提取物有明显镇静作用，与戊巴比妥钠、氯丙嗪等协用能够拮抗兴奋药引起的惊厥，有安定药的特点。生脉注射液(太行制药)的主要成分也为五味子，临床主要用于气阴两亏，脉虚欲脱的心悸、气短、四肢很冷、汗出、脉欲绝及心肌梗塞、心源性休克、感染性休克等具有上述证候者。
技术实现思路
为了克服现有技术的不足之处，本专利技术的主要目的在于提供一种五味子提取物在制备肿瘤多药耐药逆转剂中的新用途。本专利技术的另一目的在于提供一种五味子提取物及和抗肿瘤药物的联用。所述的抗肿瘤药物包括为P-gp底物的抗肿瘤药物。所述的P-gp底物的抗肿瘤药物包括蒽环类、长春碱类、紫杉烷类、鬼臼类，以及米托蒽醌、放线菌素D、丝裂霉素C。所述的肿瘤包括具有P-gp过度表达的内在多药耐药性以及在化疗过程产生获得多药耐药性的实体肿瘤和血液系统肿瘤。因此，本专利技术涉及的五味子提取物可以用于预防和治疗逆转肿瘤的多药耐药性。换言之，将含有五味子的药用组合物向需要预防和/或治疗的病人给药。KBv200细胞为人口腔上皮癌KB细胞经长春新碱筛选得到的多药耐药细胞株，对长春新碱的获得耐药性是敏感KB细胞的230倍，对阿霉素和紫杉醇的交叉耐药性分别为11和148倍。五味子提取物能逆转KBv200细胞对长春新碱的获得耐药性以及对阿霉素和紫杉醇的交叉耐药性，并呈现明显的剂量依赖关系。25μg/ml的五味子提取物使KBv200细胞长春新碱的半数抑制浓度(IC50)由2479nmol/L降至4nmol/L，逆转倍数为637倍；使阿霉素的IC50由667nmol/L降至48nmol/L，逆转倍数为14倍；使紫杉醇的IC50由1243ng/ml降至逆转倍数为187。而在敏感的KB细胞，相同剂量下的五味子提取物对上述抗肿瘤药的IC50影响很小。MCF-7/Adr细胞为人乳腺癌MCF-7细胞经阿霉素筛选得到的一种多药耐药细胞株，对阿霉素的获得耐药性是MCF-7细胞的140倍。五味子提取物能逆转MCF-7/Adr细胞对阿霉素的耐药性，并呈现明显的剂量依赖关系。25μg/ml五味子提取物使MCF-7/Adr细胞阿霉素的IC50由45241nmol/L降至401nmol/L，逆转倍数为27倍。同样，对于敏感的MCF-7细胞，上述浓度的五味子提取物对阿霉素的敏感性影响较小。由此可见，五味子提取物能够逆转肿瘤细胞的获得性多药耐药性。对于内在多药耐药性的肿瘤细胞，五味子提取物也有很强的逆转作用，并且也具有明显的剂量依赖性。人肝癌Bel7402细胞株具有内在多药耐药性，五味子提取物使得Bel7402细胞对长春新碱和阿霉素的敏感性增加，其中25μg/ml五味子提取物使Bel7402细胞长春新碱的IC50由1776.8nmol/L降至1.2nmol/L，逆转倍数为1563倍，使阿霉素的IC50由761nmol/L降至82nmol/L，逆转倍数为9倍。归纳以上结果，五味子提取物逆转多种肿瘤细胞药物耐药的倍数见下表 注耐药逆转倍数＝IC50(抗肿瘤药)/IC50(抗肿瘤药+受试逆转药)裸鼠试验表明，本专利技术的五味子提取物在动物体内同样表现出良好的逆转肿瘤多药耐药活性。我们用裸鼠建立了对长春新碱耐药的移植性人类肿瘤模型(KBv200移植性实体瘤)，结果发现，单独腹腔注射长春新碱0.4mg/Kg，每两天一次，共5次，对耐药的KBv200移植性肿瘤仅有微弱的抑制作用(与空白对照组相比抑瘤率为12.7％)。五味子提取物口服，每天一次，共14次，能够显著增强长春新碱对KBv200移植性肿瘤的抑制作用，其中，100、200和300mg/Kg五味子提取物与长春新碱合用，抑瘤率分别为27.6％、25.2％和41.9％，说明五味子提取物与长春新碱合用，能显著增加耐药肿瘤对长春新碱的敏感性。测定各组裸鼠体重发现，治疗前后各组体重均没有明显下降，说明五味子提取物与长春新碱合用治疗耐药肿瘤是安全而有效的。五味子提取物在较高剂量下本身还具有抗肿瘤活性，400和600mg/Kg五味子提取物能够显著抑制H22肝癌的生长，400mg/Kg五味子提取物还能显著抑制S180肉瘤的生长。本专利技术的进一步研究表明五味子提取物逆转肿瘤细胞多药耐药性的机理，是与其抑制多药耐药糖蛋白(P-gp)的活性和表达有密切关系。抑制P-gp药物外排泵的活性，进而增加肿瘤细胞内抗癌药的蓄积量，是耐药逆转剂增加抗癌药的化疗敏感性的重要机制之一。阿霉素为蒽环类的抗癌药，能够自发荧光，因此应用荧光分光光度计可以检测阿霉素的荧光强度，从而确定阿霉素的含量。在给阿霉素的同时加入五味子提取物25μg/ml与Bel7402细胞共同作用3小时，可使细胞内阿霉素的蓄积量增加2～3倍，与20μmol/L维拉帕米作用相似，经统计分析均有极显著差异。说明五味子提取物能够增加抗本文档来自技高网...

【技术保护点】
中药五味子在制备逆转肿瘤多药耐药的药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.中药五味子在制备逆转肿瘤多药耐药的药物中的应用。2.中药五味子提取物在制备逆转肿瘤多药耐药的药物中的应用。3.根据权利要求1、2所述的应用，其特征在于所述的肿瘤包括内在多药耐药性、获得性多药耐药性的肿瘤。4.根据权利要求1、2所述的应用，其特征在于所述的肿瘤包括P-糖蛋白过度表达的肿瘤。5.根据权利要求1、2所述的应用，其特征在于所述的肿瘤包括实体肿瘤、血液系统肿瘤。6.一种治疗肿瘤多药耐药的中药组合物，其特征在于，至少含有五味子。7.一种治疗肿瘤多药耐药的中药提取物，其特征在于，至少含有五味子提取物。8.一种药物组合物，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘耕陶，黄敏，金晶，魏怀玲，孙华，
申请(专利权)人：中国医学科学院药物研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]