一种检测人血清中透明质酸含量的方法技术

本发明专利技术涉及一种用放射免疫分析方法检测人血清、体液或组织匀浆中的透明质酸的方法。本发明专利技术使用固相包被以及铕标记透明质酸结合蛋白（ＨＡＢＰ－Ｅｕ３＋）的方法，不需要第一抗体、第二抗体等试剂，加样简单，反应快速，试剂货架期长，对环境无污染，铕与ＨＡＢＰ结合稳定，存放时间可大于１２个月，无放射性污染。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种用放射免疫分析方法检测人血清、体液或组织勻浆中的透明质酸 (Hyaluronic Acid，简称 HA)的方法。
技术介绍
如文献CN 1047391A中所公开的，该文献公开了一种检测血清、体液或组织勻浆 中透明质酸(HA)含量的灵敏、准确、快速的方法。它将未知量标本中加入定量透明质酸结 合蛋白(HABP)，再加入碘标记透明质酸使之与标本反应所剩的HABP结合，再用第一抗体、 第二抗体将HABP沉淀下来，测其放射性后定标其浓渡。血清HA的检测有助于肝病的诊断 和鉴别诊断、病情判断和预后估价。该方法及其试剂盒也为HA与疾病关系的科研和临床应 用提供了必要的方法和物质基础。HABP所结合的125I-HA与标本中HA含量呈负相关。但是上述方法的存在如下不足一、使用试剂过多，加样步骤繁琐，反应时间长；二、 使用1251作为标记物，灵敏度低，试剂的货架期短，对环境产生放射性污染。
技术实现思路
本专利技术使用固相包被以及铕标记透明质酸结合蛋白(HABP-EU3+)的方法，不需要 第一抗体、第二抗体等试剂，加样简单，反应快速，试剂货架期长，对环境无污染。本专利技术预先在固相载体(本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测人血清中透明质酸含量的方法：步骤如下：１）制作包被板：与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）偶联的ＨＡ（ＨＡ－ＢＳＡ）用０．０１Ｍ磷酸盐缓冲液，ｐＨ值７．４，按一定比例稀释制成包被液，等体积加入微孔板的各孔中，４℃放置过夜，弃去包被液，加入等体积的封闭液：０．０１Ｍ磷酸盐缓冲液、５－１０％蔗糖、０．５－１％ＢＳＡｐＨ值７．４，４℃放置过夜，弃去封闭液，自然干燥后，用铝箔袋真空密封；２）检测操作步骤：ａ．向微孔板各孔中加入等体积ＨＡ校准品或待测样本；ｂ．向微孔板各孔中加入等体积ＨＡＢＰ－Ｅｕ３＋；ｃ．将微孔板放入振荡器上，室温振荡反应６０分钟；ｄ．吸出或倒出反应液，加入洗涤液洗６次，末次洗板后将板拍干...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：吕东川，
申请(专利权)人：北京北方生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]