一种适用于吡喃糖氧化酶法测定血清1,5-脱水葡糖醇的高浓度葡萄糖清除方法及试剂盒技术

技术编号:7217511 阅读:512 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了一种适用于吡喃糖氧化酶法测定血清1,5-脱水葡糖醇的高浓度葡萄糖清除方法,包括:配制pH6.0-9.0的2-玛啡琳乙基磺酸(MES)缓冲液,其中含有一定量的葡萄糖激酶(GK)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)、丙酮酸激酶(PK)、磷酸烯醇式丙酮酸盐(PEP)、ATP,加入含葡萄糖(Glu)的血清样本,并于20-50℃反应3-5分钟。在ATP存在下,GK将Glu转化为葡萄糖-6-磷酸(G6P),同时生成二磷酸腺苷(ADP);在NADP+存在下,G6PD进一步把G6P转化为6-磷酸葡萄糖内酯(G6PL);反应中生成的ADP在PEP的存在下经PK作用重新转化为ATP。依据该法构建的葡萄糖清除试剂置2-8℃保存可稳定14个月,可以应用于目前广泛使用的临床生化自动分析仪。

【技术实现步骤摘要】
,5-脱水葡糖醇的高浓度葡萄糖清除方法及试剂盒的制作方法
本专利技术涉及,5-脱水葡糖醇的高浓度葡萄糖清除方法和试剂盒。
技术介绍
1,5_脱水葡萄糖醇(1,5-AG),又名2_脱氧葡萄糖、1,5_脱水山梨醇。临床资料表明,血清1,5-AG的监测可确切地反映较短期内糖尿病的控制程度,是糖尿病监护中的良好指标。自1,5_脱水葡糖醇对糖尿病的诊断意义被临床所认识以来,已有阴离子交换层析法、高效液相色谱法(HPLC)、液相色谱质谱法(LC-MS)、吡喃糖氧化酶分析法等诸多方法应用于血清1,5-AG的测定。前三种方法需要对1,5-AG进行衍生和复杂的样品前处理,同时需特殊、昂贵仪器,不适合临床常规分析。吡喃糖氧化酶分析法虽好,但测定试剂的稳定性普遍较差,难以在临床推广应用。申请者研究发现,要开发稳定的液体型血清1,5_AG吡喃糖氧化酶法测定试剂, 应重点建立一种快速清除高浓度葡萄糖的方法,以消除葡萄糖对1,5-AG测定的干扰。 Fukumura Y (Clin Chem,1994,40 :2013_2016·)、陈国军(中华医学检验杂志,1999,22 (6) 358-361.)、第一化学药本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:商纯尔陈青松
申请(专利权)人:浙江夸克生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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