【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医学检验领域，具体涉及补体c1q的胶乳免疫比浊测定试剂盒。
技术介绍
1、补体c1q是一种由肝脏合成的具有多种生理功能的蛋白质，主要参与体内免疫调节，可以促进免疫细胞的增殖和分化，还可以促进吞噬细胞的吞噬作用。补体c1q升高多见于急性炎症、传染病早期、组织损伤、急性心肌梗死等，而补体c1q降低多见于先天性补体缺乏症、系统性红斑狼疮、急性肾小球肾炎等。
2、目前补体c1q的检测手段主要为单向免疫扩散法、火箭免疫电泳(rie)、酶联免疫法(elisa)以及免疫比浊法(tia)，但目前业界尚无公认的标准。其中，单向免疫扩散法是一种传统、陈旧的方法，因所受影响因素较多，存在操作复杂、准确度不高等缺陷，临床应用受限；酶联免疫吸附法操作步骤繁琐，检测耗时时长90min以上，结果受人为操作因素的影响较大，尤其是温度和时间因素对结果影响很大，重复性不好，难以自动化。rie对于血清中c1q的检测具有重要的指导意义，但是由于其重复性不好，耗时较长，手工操作，目前无专门商业化的设备，在临床实验室很少用到这个方法。elisa需要的手工操作、耗时较长，在临床上尚未大规模使用。
3、免疫比浊法是目前临床大多采用的方法，免疫比浊法是抗原抗体特异性结合反应，通过检测反应形成的抗原抗体免疫复合物产生的浊度变化进行定量，利用了抗原与抗体之间发生的特异性结合，具有稳定性好、操作简单方便、检测快速、重复性好、准确性高、无污染的优点，用于自动生化分析仪，目前免疫比浊法已广泛应用于载脂蛋白b、前白蛋白、纤维结合蛋白等的检测，为病患带来
4、然而，免疫比浊法中会存在各种因素影响许多生化反应的吸光度和产物颜色的变化，对采用比浊法和比色法检测的生化结果产生明显干扰，从而对检测的灵敏度、线性范围和精密度等造成影响。因此，本领域亟需提供一种线性范围宽、精密度更高、准确度更高的检测c1q含量的试剂盒。
技术实现思路
1、为了解决上述问题，本专利技术提供了一种线性范围宽、精密度更高、准确度更高的检测c1q含量的试剂盒。
2、一方面，本专利技术提供了一种测定补体c1q的试剂盒，包括试剂1和试剂2；
3、具体地，所述的试剂1是由三羟甲基氨基甲烷、氯化钠、曲拉通x-100、牛血清白蛋白、生物防腐剂和氯化锌组成；
4、所述的试剂2是由三羟甲基氨基甲烷、氯化钠、c1q抗体乳胶颗粒、牛血清白蛋和丙氨酸组成。
5、进一步具体地，所述的试剂1中三羟甲基氨基甲烷的浓度可以是100-120mm，氯化钠的浓度可以是100-140mm，曲拉通x-100的浓度可以是0.5-2ml/l，牛血清白蛋白的浓度可以是4-7g/l，生物防腐剂的浓度可以是1-2ml/l，氯化锌的浓度可以是0.2g/l-0.8g/l。
6、优选地，所述的试剂1中三羟甲基氨基甲烷的浓度为100mm，氯化钠的浓度为140mm，曲拉通x-100的浓度为2ml/l，牛血清白蛋白的浓度为4g/l，生物防腐剂的浓度为2ml/l，氯化锌的浓度为0.8g/l。
7、进一步具体地，所述的试剂2中三羟甲基氨基甲烷的浓度可以是100-120mm，氯化钠的浓度可以是100-140mm，c1q抗体乳胶颗粒的浓度可以是3-5g/l，牛血清白蛋的浓度可以是4-7g/l，丙氨酸的浓度可以是1-5g/l。
8、优选地，所述的试剂2中三羟甲基氨基甲烷的浓度为120mm，氯化钠的浓度为100mm，c1q抗体乳胶颗粒的浓度为3g/l，牛血清白蛋的浓度为7g/l，丙氨酸的浓度为5g/l。
9、具体地，所述的c1q抗体乳胶颗粒为微球偶联抗体。
10、进一步具体地，所述的微球大小可以是50-200nm。
11、优选地，所述的微球大小为100nm。
12、进一步具体地，所述的c1q抗体乳胶颗粒的制备方法为：
13、(1)微球与缓冲液混合；
14、(2)活化微球；
15、(3)加入偶联抗体获得c1q抗体乳胶颗粒。
16、优选地，步骤(1)所述的缓冲液包括但不限于：mes、mops、bes、caps、bes或bicine缓冲液中的一种或多种。
17、进一步优选地，步骤(1)所述的缓冲液为mes。
18、优选地，步骤(2)所述的活化中加入偶联剂。
19、进一步优选地，步骤(2)所述的偶联剂选自edc、nhs、edac、wls或pam中的至少一种。
20、更进一步优选地，步骤(2)所述的偶联剂可以是edc和nhs；
21、所述的edc和nhs添加质量比为1:1。
22、优选地，所述的c1q抗体乳胶颗粒为羊抗人c1q抗体乳胶颗粒、兔抗人c1q抗体乳胶颗粒或鼠抗人c1q抗体乳胶颗粒。
23、进一步优选地，所述的c1q抗体乳胶颗粒为羊抗人c1q抗体乳胶颗粒。
24、具体地，所述的试剂盒还包括校准品和质控品。
25、进一步具体地，所述的校准品和质控品包括补体c1q、牛血清白蛋白和生物防腐剂。
26、更进一步具体地，所述的生物防腐剂可以是液体防腐剂；优选为proclin300。
27、优选地，校准品的补体c1q浓度可以是10-500mg/l；
28、质控品的补体c1q浓度可以是50-300mg/l；
29、牛血清白蛋白浓度可以是4-7g/l；
30、proclin300浓度可以是1-2ml/l。
31、进一步优选地，所述的c1q浓度为100-300mg/l；
32、牛血清白蛋白浓度可以是5g/l；
33、proclin300浓度可以是2ml/l。
34、具体地，所述的前述的试剂盒测定步骤包括：
35、s1、加入试剂1和样本或校准品共同温育；
36、s2、加入试剂2，25-35s后第一次读数；
37、s3、继续反应4-5min后第二次读数。
38、具体地，步骤s1所述的样本包括但不限于：外周血、全血或末梢血。
39、具体地，步骤s2所述第一次读数时间为30s。
40、具体地，步骤s3所述第二次读数时间为4.5min。
41、本专利技术所取得的技术效果：
42、(1)具有良好的线性和更宽的线性范围，拟合方程的r2为0.9999，线性范围为10-500mg/l。
43、(2)具有更高的精密度，重复性的cv值为1.07及以下；批间精密度的cv值为2.69及以下。
44、(3)准确度高，对人体血清补体c1q测定结果符合临床诊断标准。
45、(4)检测方法简单，高效。
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1.一种测定补体C1q的试剂盒，其特征在于，包括试剂1和试剂2；
2.根跟权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂1中三羟甲基氨基甲烷的浓度为100-120mM，氯化钠的浓度为100-140mM，曲拉通X-100的浓度为0.5-2mL/L，牛血清白蛋白的浓度为4-7g/L，生物防腐剂的浓度为1-2mL/L，氯化锌的浓度为0.2g/L-0.8g/L。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂1中三羟甲基氨基甲烷的浓度为100mM，氯化钠的浓度为140mM，曲拉通X-100的浓度为2mL/L，牛血清白蛋白的浓度为4g/L，生物防腐剂的浓度为2mL/L，氯化锌的浓度为0.8g/L。
4.根跟权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂2中三羟甲基氨基甲烷的浓度为100-120mM，氯化钠的浓度为100-140mM，C1q抗体乳胶颗粒的浓度为3-5g/L，牛血清白蛋的浓度为4-7g/L，丙氨酸的浓度为1-5g/L。
5.根跟权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂2中三羟甲基氨基甲烷的浓度为120mM，氯化钠的浓
6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述的C1q抗体乳胶颗粒为羊抗人C1q抗体乳胶颗粒、兔抗人C1q抗体乳胶颗粒或鼠抗人C1q抗体乳胶颗粒。
7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒还包括校准品和质控品。
8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述的校准品和质控品包括补体C1q、牛血清白蛋白和生物防腐剂。
9.根据权利要求1-8任一项所述的试剂盒，其特征在于，测定步骤包括：
10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于，步骤S1所述的样本包括外周血、全血或末梢血。
...【技术特征摘要】
1.一种测定补体c1q的试剂盒，其特征在于，包括试剂1和试剂2；
2.根跟权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂1中三羟甲基氨基甲烷的浓度为100-120mm，氯化钠的浓度为100-140mm，曲拉通x-100的浓度为0.5-2ml/l，牛血清白蛋白的浓度为4-7g/l，生物防腐剂的浓度为1-2ml/l，氯化锌的浓度为0.2g/l-0.8g/l。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂1中三羟甲基氨基甲烷的浓度为100mm，氯化钠的浓度为140mm，曲拉通x-100的浓度为2ml/l，牛血清白蛋白的浓度为4g/l，生物防腐剂的浓度为2ml/l，氯化锌的浓度为0.8g/l。
4.根跟权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂2中三羟甲基氨基甲烷的浓度为100-120mm，氯化钠的浓度为100-140mm，c1q抗体乳胶颗粒的浓度为3-5g/l，牛血清白蛋的浓...
【专利技术属性】
技术研发人员：商忆文，汪春建，王天虹，陈钰，竺维芳，
申请(专利权)人：浙江夸克生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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