具有改进耐受性的免疫原组合物中的疏水性蛋白调配物制造技术

本发明专利技术提供一种制备引起较少疼痛的疏水性蛋白的免疫原组合物的方法，所述疏水性蛋白是在适于投与哺乳动物的医药学可接受载剂中，所述方法包含以下步骤（ａ）用两性离子去污剂溶解所述疏水性蛋白以制得第一组合物；（ｂ）改变所述第一组合物，以使得与所述第一组合物相比，所述经改变的组合物产生如在大鼠足垫模型中所测量到的疼痛减少。（*该技术在2024年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】本专利技术涉及用于诱导对于疏水性膜蛋白(例如孔蛋白(porin))之免疫反应的不引起疼痛或引起较少疼痛的免疫原性和医药组合物。这些组合物用于预防或治疗哺乳动物疾病，例如脑膜炎或淋病。
技术介绍
大部分以蛋白为主的医药品或者不含有去污剂或者含有相对温和的去污剂，例如TWEEN80(聚山梨醇酯80)或TWEEN20。然而，这些温和去污剂通常不能够溶解某些疏水性膜蛋白。当疏水性膜蛋白从膜上分离时，其所暴露的疏水性区域互相作用，引起蛋白分子聚结并且从水溶液中沉淀出。这些蛋白可以通过对疏水性基团和水均有亲合力的去污剂来溶解。离子去污剂结合膜蛋白暴露的疏水性区域，以及结合水溶性蛋白的疏水性核心。由于其电荷，因此这些去污剂通常通过破坏离子键和氢键来变性蛋白。举例来说，高浓度的十二烷基硫酸钠完全变性蛋白。相反，高浓度的非离子去污剂通过形成去污剂、磷脂和疏水性膜蛋白的混合胶束来溶解生物膜。然而，变性蛋白和混合胶束中的蛋白通常不是最适宜用作免疫原组合物。低浓度的这些去污剂可能不溶解疏水性膜蛋白。已经显示两性离子去污剂有效地溶解从天然膜中提取的疏水性膜蛋白，并且当这些蛋白重组产生时促进这些蛋白的再折叠。参本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种适于注射至人类的疏水性蛋白的不引起疼痛组合物，其包含：（ａ）疏水性蛋白；（ｂ）低于溶解所述蛋白所需量的一定量的两性离子去污剂；和（ｃ）一定量的医药学可接受的非离子去污剂，其有效维持所述蛋白在医药学可接受载剂中的溶 解性。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】US 2003-12-30 60/533,1221.一种适于注射至人类的疏水性蛋白的不引起疼痛组合物，其包含(a)疏水性蛋白；(b)低于溶解所述蛋白所需量的一定量的两性离子去污剂；和(c)一定量的医药学可接受的非离子去污剂，其有效维持所述蛋白在医药学可接受载剂中的溶解性。2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述两性离子去污剂是选自由以下各物质组成的群组正辛基-N，N-二甲基-3-铵基-1-丙烷磺酸；正癸基-N，N-二甲基-3-铵基-1-丙烷磺酸；正十二基-N，N-二甲基-3-铵基-1-丙烷磺酸；正十四基-N，N-二甲基-3-铵基-1-丙烷磺酸；3-(N，N-正十六基-N，N-二甲基-3-铵基-1-丙烷磺酸；3-[(3-胆酰胺基丙基)二甲基铵基]-1-丙烷磺酸；3-[(3-胆酰胺基丙基)二甲基铵基]-2-羟基-1-丙烷磺酸；和正十二基-N，N-二甲基甘氨酸。3.根据权利要求2所述的组合物，其中所述两性离子去污剂是正十四基-N，N-二甲基-3-铵基-1-丙烷磺酸。4.根据权利要求1所述的组合物，其中所述非离子去污剂是选自由以下各物质组成的群组α-[4-(1，1，3，3-四甲基丁基)苯基]-ω-羟基聚(氧基-1，2-乙烷二基)、聚氧乙烯(20)山梨聚糖单月桂酸酯、聚氧乙烯(20)山梨聚糖单油酸酯和聚氧乙烯(35)月桂基醚。5.根据权利要求4所述的组合物，其中所述非离子去污剂是α-[4-(1，1，3，3-四甲基丁基)苯基]-ω-羟基聚(氧基-1，2-乙烷二基)。6.根据权利要求1所述的组合物，其中所述两性离子去污剂是终浓度低于其临界胶束浓度(CMC)的正十四基-N，N-二甲基-3-铵基-1-丙烷磺酸且所述非离子去污剂是终浓度高于其CMC的α-[4-(1，1，3，3-四甲基丁基)苯基]-ω-羟基聚(氧基-1，2-乙烷二基)。7.根据权利要求1所述的组合物，其中所述疏水性蛋白是膜内在蛋白(integralmembrane protein)。8.根据权利要求7所述的组合物，其中所述膜内在蛋白源自选自由以下各物质组成群组的传染媒介物细菌、病毒、寄生虫和朊病毒(prion)。9.根据权利要求8所述的组合物，其中所述传染媒介物是细菌。10.根据权利要求9所述的组合物，其中所述膜内在蛋白是孔蛋白。11.根据权利要求9所述的组合物，其中所述膜内在蛋白是淋球菌孔蛋白。12.根据权利要求9所述的组合物，其中所述膜内在蛋白是脑膜炎球菌孔蛋白。13.一种对人类进行免疫的方法，所述方法包含非经肠投与根据权利要求8所述的组合物，其中所述传染媒介物是人类病原体。14.一种用于制备适于投与哺乳动物的医药学可接受载剂中的疏水性蛋白的引起较少疼痛的免疫原组合物的方法，所述方法包含以下步骤(a)用两性离子去污剂溶解所述疏水性蛋白以制得第一组合物；(b)改变所述第一组合物，以使得与所述第一组合物相比，所述经改变的组合物引起较少疼痛。15.根据权利要求14所述的方法，其中所述改变步骤(b)是选自由以下操作组成的群组(i)稀释所述两性离子去污剂，(ii)用不引发疼痛的非离子去污剂替换所述两性离子去污剂，和(iii)加入不引发疼痛的非离子去污剂但保持所述两性离子去污剂的浓度恒定。16.根据权利要求15所述的方法，其中所述改变步骤(b)是用不引发疼痛的非离子去污剂稀释所述两性离子去污剂。17.根据权利要求15所述的方法，其中所述改变步骤(b)是用不引发疼痛的非离子去污剂替换所述两性离子去污剂。18.根据权利要求15所述的方法，其中所述改变步骤(b)是加入不引发疼痛的非离子去污剂但保持所述两性离子去污剂的浓度恒定。19.根据权利要求16、17或18中任一权利要求所述的方法，其中所述两性离子去污剂是选自由以下各物质组成的群组正辛基-N，N-二甲基-3-铵基-1-丙烷磺酸；正癸基-N，N-二甲基-3-铵基-1-丙烷磺酸；正十二基-N，N-二甲基-3-铵基-1-丙烷磺酸；正十四基-N，N-二甲基-3-铵基-1-丙烷磺酸；3-(N，N-正十六基-N，N-二甲基-3-铵基-1-丙烷磺酸；3-[(3-胆酰胺基丙基)二甲基铵基]-1-丙烷磺酸；3-[(3-胆酰胺基丙基)二甲基铵基]-2-羟基-1-丙烷磺酸；和正十二基-N，N-二甲基甘氨酸。20.根据权利要求16、17或18中任一权利要求所述的方法，其中所述两性离子去污剂是正十四基-N，N-二甲基-3-铵基-1-丙烷磺酸。21.根据权利要求16、17或18中任一权利要求所述的方法，其中所述非离子去污剂是选自由以下各物质组成的群组α-[4-(1，1，3，3-四甲基丁基)苯基]-ω-羟基聚(氧基-1，2-乙烷二基)，聚氧乙烯(20)山梨聚糖单月桂酸酯，聚氧乙烯(20)山梨聚糖单油酸酯和聚氧乙烯(35)月桂基醚。22.根据权利要求16、17或18中任一权利要求所述的方法，其中所述非离子去污剂是α-[4-(1，1，3，3-四甲基丁基)苯基]-ω-羟基聚(氧基-1，2-乙烷二基)。23.根据权利要求16、17或18中任一权利要求所述的方法，其中所述两性离子去污剂是终浓度低于其CMC的正十四基-N，N-二甲基-3-铵基-1-丙烷磺酸且所述非离子去污剂是终浓度高于其CMC的α-[4-(1，1，3，3-四甲基丁基)苯基]-ω-羟基聚(氧基-1，2-乙烷二基)。24.根据权利要求14所述的方法，其中所述改变步骤(b)是稀释所述两性离子去污剂，并且其中所述疏水性蛋白是沉淀形式。25.根据权利要求16、17或18中任一权利要求所述的方法，其中所述疏水性蛋白是膜内在蛋白，所述膜蛋白源自选自由以下各物质组成群组的传染媒介物细菌、病毒、寄生虫和朊病毒。26.根据权利要求16、17或18中任一权利要求所述的方法，其中所述传染媒介物是细菌。27.根据权利要求16、17或18中任一权利要求所述的方法，其中所述膜内在蛋白是孔蛋白。28.根据权利要求16、17或18中任一权利要求所述的方法，其中所述两性离子去污剂被稀释至低于临界胶束浓度。29.根据权利要求16、17或18中任一权利要求所述的方法，其中所述膜内在蛋白是淋球菌孔蛋白。30.根据权利要求16、17或18中任一权利要求所述的方法，其中所述膜内在蛋白是脑膜炎球菌孔蛋白。31.根据权利要求16、17或18中任一权利要求所述的方法，其中如在大鼠足垫模型中所测量，所述疼痛减少至少约50％。32.一种减少与向哺乳动物投与包含疏水性蛋白和两性离子去污剂的免疫原组合物相关疼痛的方法，所述方法包含(a)改变所述组合物，以使得与未经改变组合物相比，所述经改变的组合物引起较少疼痛；和(b)投与所述免疫原组合物。33.根据权利要求32所述的方法，其中所述改变步骤(a)是选自由以下操作组成的群组(i)稀释所述两性离子去污剂，(ii)用不引发疼痛的非离子去污剂替换所述两性离子去污剂，和(iii)加入不引发疼痛的非离子去污剂但保持所述两性离子去污剂的浓度恒定。34.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：苏珊凯霍塞思，托马斯纽厄尔梅特卡夫三世，尤里弗拉基米罗维奇马茨卡，迈克尔哈根，
申请(专利权)人：惠氏公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]