本发明专利技术公开了一种具有抑制脂肪酸合酶活性的寡聚物及其应用。该寡聚物的化学结构式如式Ⅰ－１或式Ⅰ－２所示，其中，ｎ＝２－６，Ｒ为Ｈ或ＯＨ。本发明专利技术还提供了以所述寡聚物为活性成分的脂肪酸合酶抑制剂及其制备方法。该脂肪酸合酶抑制剂的制备方法具有操作简便、合理，成本低廉，产率高的优点，可应用于工业化生产。此外，本发明专利技术的寡聚物及脂肪酸合酶抑制剂还具有较高的细菌酮酰还原酶抑制活性。因而，可以所述寡聚物为活性成分制备抗癌、减肥和／或抗菌药物。若将本发明专利技术应用于工业化生产，可极大地满足市场对脂肪酸合酶抑制剂的需求，同时也为相关产品的开发提供了便利。综上所述，本发明专利技术具有较高的实际应用价值，市场前景广阔。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及寡聚物与应用，特别是涉及一种具有脂肪酸合酶抑制活性的寡聚物与以该寡聚物为活性成分的脂肪酸合酶抑制剂，以及该脂肪酸合酶抑制剂的制备方法。技术背景脂肪酸合酶广泛存在于生物细胞内，是催化体内合成脂肪酸的关键酶。该酶分为以复合酶形式存在的i型和以多个独立酶混合系统形式存在的n型。动物脂肪酸合酶(Fatty acid synthase, EC. 2. 3. 1. 85，縮写为脂肪酸合酶)属于 I型脂肪酸合酶。90年代中期，田维熙等对家禽的脂肪酸合酶活性和腹腔脂肪水平进 行了研究，发现它们之间有很高的正相关性(田维熙等，中国生物化学杂志，1996, 12, 234-236)。从动物体内的能量代谢着手分析，田维熙提出控制动物脂肪酸合酶活性可 能是控制动物体脂水平的有效方法。2000年，美国科学家Loftus等发现抑制脂肪酸合 酶将会导致动物摄食下降和体重减轻(Loftus T. M. ， Jaworsky D. E. ， Frehywot G. L. ， a丄Scie庶2000， 288， 2379-2381)。脂肪酸合酶受到抑制将导致底物丙 二酸单酰辅酶A积累，进而降低下丘脑前噬信号肽Y(—种进食激素)的表达水平，最终 导致摄食下降和体重减轻，这种作用不依赖l印tin(痩素)。该发现预示着脂肪酸合酶 极有可能成为一个控制体重和食欲的新靶点。因此，脂肪酸合酶的抑制剂的开发很可 能成为研制减肥用品的新途径。1994年，美国科学家Kuhajda等证实人类乳腺癌中呈现高水平的脂肪酸合酶表达 和活性，并提出脂肪酸合酶可能是一个新的抗肿瘤靶点(Kuhajda F.P.， Jenner K.， Wood F. D， a丄尸roc^ca^ 5ci 〃a， 1994， 91, 6379-6383)。随后又陆续 报道在许多癌细胞中都有大大高于正常细胞的脂肪酸合酶的高水平表达，脂肪酸合酶 抑制剂还对癌细胞具有选择性杀伤作用。由此，Kuhajda提出脂肪酸合酶是一个新的 癌症化疗的可能途径的耙点(Kuhajda F.P. vV^2'o， 2000， 16， 202 - 208)。目前为止，已报道的脂肪酸合酶抑制剂较少，只有合成的C75(Kuhajda F.P.， PizerE.S, ， Li J. N., et a丄y°roc 7Vat/ ^ca^Z 6ci 〃a, 2000, 97, 3450—3454)， 以及较早发现的天然产物浅蓝菌素(cerulenin) (Vance D., Goldberg I. ， Mitsuhashi 0. et 3丄Aoc力柳5iop力/s 6b鹏朋.1972, 48， 649-656)、绿茶中的酯型儿茶 素表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG) (WangX., Tian W. X. 历'o/ 力j^ ^fes Commun， 2001， 288， 1200—1206)禾口ECG (Wang X. ， Song K. S. ， Guo Q. X., a丄A'oc力柳 尸力anz aco7， 2003, 66, 2039-2047)。这些抑制剂的共同缺点是抑制活性不够高，应 用价值受到局限，因此，提高脂肪酸合酶抑制剂的抑制活性具有重要的实际应用价值。细菌脂肪酸合酶属于II型脂肪酸合酶。其中的酮酰还原酶没有其它同工酶，在结 构上和动物酮酰还原酶又有较大区别，因而，近期人们提出其可以作为研制新的抗菌 抑菌产品的耙酶，其抑制剂具有开发成为新的抗菌抑菌产品的前景。高速逆流色谱(High Speed Counter-Current Chromatography, HSCCC)技术是根据被分离物质在互不相溶的两相溶剂中的分配系数的不同而达到分离的方法。由于在 整个分离过程中不使用固体支撑介质，因而避免了样品的不可逆吸附和样品组分的化 学变性等，使样品的完全回收成为可能。此外，高速逆流色谱是利用螺旋管的高速行 星式运动产生的不对称离心力场，实现两相溶剂体系的充分保留和有效混合及分配， 从而实现物质在两相溶剂中的高效分离。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种能较强地抑制动物脂肪酸合酶和细菌酮酰还原酶的活 性的寡聚物。本专利技术提供的寡聚物，其化学结构式如式I-1和/或式1-2所示式I-l 式1-2其中，n = 2-6， R为H或OH。上述具有式I-l或式I-2化学结构式的寡聚物的单体是酚基羟基丙烯酸。聚合度n 为3时，该寡聚物对动物脂肪酸合酶的抑制能力最高，半抑制浓度(ICJ不大于 0. 4|ig/mL。本专利技术的第二个目的是提供一种脂肪酸合酶抑制剂(也是细菌酮酰还原酶抑制 剂)。本专利技术所提供的脂肪酸合酶抑制剂，其活性成分为上述具有式I-1或/和式1-2所示化学结构式的寡聚物。本专利技术的第三个目的是提供一种制备上述脂肪酸合酶抑制剂的方法。 本专利技术所提供的脂肪酸合酶抑制剂的制备方法，是将儿茶素类化合物与酸的水溶液混合后在60-12(TC下反应0.5-12小时，得到脂肪酸合酶抑制剂；所述混合液中儿茶素类化合物的浓度为1. 5-25mg/ml。在上述制备方法中，所述儿茶素类化合物包括单体儿茶素和酯型儿茶素，如儿茶 素、没食子儿茶素、表儿茶素或表没食子儿茶素等，以及它们的没食子酸酯。用于处理儿茶素类化合物的酸为酸性较强的无机酸或有机酸。其中，无机酸可为 硫酸、盐酸或其它强酸或中强酸；有机酸可为P,a小于4的有机酸，如草酸、酒石酸、 拧檬酸或苹果酸等。酸性越强，酸浓度越高，制备的脂肪酸合酶抑制剂对脂肪酸合酶 的抑制活性越高，抑制活性提高的速度也越快。 一般情况下，所述酸溶液的浓度为 0. l-2mol/L,优选为lmol/L。所述儿茶素类化合物与酸的水溶液可按3-50mg/ml: 0.2-4mol/L以体积比l: l混合。此外，提高温度也可使上述方法制备的脂肪酸合酶抑制剂对脂肪酸合酶的抑制活 性提高的速度加快。具体所需的反应时间可根据反应条件和被处理的儿茶素种类进行 调整。根据实际需要，还可对本专利技术制备的脂肪酸合酶抑制剂进一步分离提取。该纯化 步骤包括以下步骤1) 乙酸乙酯萃取将上述反应完毕的含脂肪酸合酶抑制剂的溶液与乙酸乙酯按 体积比l: l混合，搅拌混匀后静置分层，取出乙酸乙酯层，重复萃取2-4次，合并萃 取出的乙酸乙酯层，然后除去溶剂乙酸乙酯，得到本专利技术所述脂肪酸合酶抑制剂的粗 提物；2) 用高速逆流色谱方法对步骤l)的粗提物进行进一步的分离和纯化所述溶剂 体系由体系I、体系II和体系III组成，其中，体系I为乙酸乙酯正丁醇水=4: 0.6: 5，体系II为正丁醇叔丁基甲醚乙腈0. 1%三氟乙酸=2: 4: 3: 8，体 系III为叔丁基甲醚乙腈0. 1%三氟乙酸=2: 2: 3;洗脱方式为双向洗脱，第 一步反向洗脱，第二步正向洗脱；转速为700-1000rpm;流速为1. 5-2. 5mL/min，具 体方法为先将步骤l)获得的粗提物悬蒸干燥后用体系I进行初步分离，得到中间分离物，再将中间分离物分别用体系n和ni进行分离，得到经纯化的具有较高脂肪酸合酶抑制活性的所述寡聚物。在上述分离方法中，步骤l)中用乙酸乙酯重复萃取的次数优选为3次；可用真空挥发等方法除去溶剂乙酸乙酯。步骤2)中的转速本文档来自技高网...
【技术保护点】
具有抑制脂肪酸合酶活性的寡聚物，是化学结构式如式Ⅰ－１和／或式Ⅰ－２所示的酚基羟基丙烯酸寡聚物：＊＊＊其中，ｎ＝２－６，Ｒ为Ｈ或ＯＨ。
【技术特征摘要】
1、具有抑制脂肪酸合酶活性的寡聚物，是化学结构式如式I-1和/或式I-2所示的酚基羟基丙烯酸寡聚物其中，n＝2-6，R为H或OH。2、 一种脂肪酸合酶抑制剂，其活性成分为权利要求1所述的式I-1或/和式I-2 所示的化合物。3、 一种制备权利要求2所述的脂肪酸合酶抑制剂的方法，是将儿茶素类化合物 与酸的水溶液混合后在60-12(TC下反应0.5-12小时，得到脂肪酸合酶抑制剂；所述 混合液中儿茶素类化合物的浓度为1.5-25mg/ml。4、 根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述得到的脂肪酸合酶抑制剂用包 括以下步骤的方法纯化1) 乙酸乙酯萃取将脂肪酸合酶抑制剂与乙酸乙酯按体积比l: l混合，搅拌混 匀后静置分层，取出乙酸乙酯层，重复萃取2-4次，合并萃取出的乙酸乙酯层，然后 除去溶剂乙酸乙酯，得到活性成分的粗提物；2) 用高速逆流色谱方法对步骤1)获得的粗提物进行进一步的分离和纯化溶剂 体系由体系I、体系II和体系III组成，其中，体系I为乙酸乙酯正丁醇水=4: 0.6: 5，体系II为正丁醇叔丁基甲醚乙腈0....
【专利技术属性】
技术研发人员：田维熙，张淑妍，王燕，孙颖慧，
申请(专利权)人：田维熙，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。