从黄精中提取增强免疫功能作用的黄精低聚糖制造技术

本发明专利技术涉及一种从黄精中提取增强免疫功能作用的黄精低聚糖，其解决的技术方案是，取黄精炮制品，粉碎后加质量浓度为５０－９５％乙醇超声或回流提取两次，过滤，滤液减压浓缩至无醇味，蒸馏水定容至相当于１ｇ／ｍｌ体积，水溶液上大孔吸附树脂，水洗，收集水洗液，浓缩至稠膏状，得棕褐色低聚糖浸膏，收率为９．０％～１３．６％，经ＨＰＬＣ检识，该浸膏主要含有果糖、葡萄糖、蔗糖、棉籽糖等小分子糖，该浸膏干燥后得粉末状黄精低聚糖，黄精低聚糖可有效用于制备增强免疫功能的药物和保健食品，开辟了黄精新的应用前景，造福于人类，具有巨大的社会和经济效益。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及医药领域，特别是一种从黄精中提取增强免疫功能作用的黄精 低聚糖。二、
技术介绍
黄精的医用价值是众所周知，其功能在于补肾益精、滋阴润燥，主要用于 阴虚肺燥，干咳少痰，肺肾阴虚的劳嗽久咳，脾胃虚弱，肾虚精亏等。黄精中 含有皂苷、烟酸、糖类、醌类、氨基酸及微量元素等多种成分。随着科学技术 的发展及对中药综合研究的深入，中医药有了新的开发前景， 一些药物的新用 途被发现，尤其是为了增加疗效、降低毒副作用，原生药中的成分被分别提取 出来，用于制备治疗某种疾病的药物，产生了药物的新用法，为中医学发展提 供了新的生机，如何研制开发新的有效药物成分，开拓新的应用领域己是人们 所关心的问题。黄精的药用价值是被公认的，目前关于黄精有效成分的应用主 要是其中的多糖、皂苷等成分，但从黄精中提取低聚糖部分并用于增强免疫功 能的作用未见相关的报道。三、
技术实现思路
基于上述情况，针对黄精的药用价值，本专利技术的目的就在于提供一种从黄 精中提取增强免疫功能作用的黄精低聚糖，其解决的技术方案是，取黄精炮制品，粉碎后加质量浓度为50—95%乙醇超声或回流提取两次，过滤，滤液减压浓 縮至无醇味，蒸馏水定容至相当于lg/ml体积，水溶液上大孔吸附树脂，水洗， 收集水洗液，浓縮至稠膏状，得棕褐色低聚糖浸膏，收率为9.0% 13.6%， 经HPLC检识，该浸膏主要含有果糖、葡萄糖、蔗糖、棉籽糖等小分子糖，该 浸膏干燥后得粉末状黄精低聚糖，黄精低聚糖可有效用于制备增强免疫功能 的药物和保健食品，开辟了黄精新的应用前景，造福于人类，具有巨大的社 会和经济效益。四具体实施方式 以下结合具体情况对本专利技术的具体实施方式作详细说明。 本专利技术在具体实施时，取黄精炮制品，粉碎后加质量浓度为50—95%的乙醇，超声30min-60min或用质量浓度为50_95%的乙醇回流lh-2h两次，第一次加黄 精炮制品体积重量的IO倍量的质量浓度为50—95%的乙醇、第二次加黄精炮制品体积重量的7倍量的质量浓度为50—95%的乙醇(体积重量是指固体用g、液 体用ml计，如黄精炮制品100g，乙醇则用100ml，加黄精炮制品体积重量的7 倍量的质量浓度为50 — 95%的乙醇，即100g黄精炮制品加700ml的质量浓度为 50—95%的乙醇，以下同)，过滤，合并两次滤液(主要含低聚糖、氨基酸、黄 酮等成分)，滤液减压浓縮至无醇味，蒸馏水定容至相当于lg/ml体积，得低 聚糖、氨基酸、苷类等大极性成分的水溶液，水溶液上大孔吸附树脂以除去苷 类等成分，用大孔吸附树脂3倍体积的水洗，收集水洗液，浓縮，得棕褐色 黄精低聚糖浸膏，经HPLC检识，该浸膏中主要含有果糖、葡萄糖、蔗糖、棉 籽糖等多种小分子糖，该浸膏干燥后得粉末状黄精低聚糖。所说的黄精炮制品是，取黄精，用水洗净，晾干，取净黄精，将黄精用 黄酒浸泡，每100g黄精加黄酒30g，闷润12 - 18小时，至黄酒完全浸入黄 精体内，炖透或蒸透，稍晾，切片，干燥即得黄精炮制品。所说的大孔吸附树脂为市售Dun型大孔吸附树脂，用乙醇加热回流洗脱， 洗至洗脱液蒸干后无残留物，再湿法装柱，然后用蒸馏水一1.5mol/L盐酸一 2mol/L氢氧化钠一1.5mol/L盐酸一蒸馏水洗脱，即得所需的大孔吸附树脂 (常规处理方法，是公知技术)。黄精低聚糖具有增强免疫的作用，已经为动物实验充分证明，具体实验 情况如下一. 试验材料1. 试验动物18 22g昆明种小鼠，雌雄各半。由郑州大学医学院动物 实验中心提供。2. 实验药物黄精低聚糖，黄酒(濮阳亚光制药厂，酒精度》12%)， 瑞士染液，香菇多糖(湖北迪晨药业有限公司)，环磷酰胺(江苏恒瑞医药股 份有限公司)，枸橼酸钠，硫酸铜，次甲基蓝，氢氧化钠，酒石酸钾钠，亚铁 氰化钾，盐酸等。二. 试验方法l.黄精低聚糖对正常小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响 取小鼠50只，体重18 22g，雌雄各半，随机均匀分为5组。分别灌服大、 中、小剂量的黄精低聚糖水溶液(45mg/ml， 30mg/ml， 15mg/ml， 0.2ml/10g)、香菇 多糖混悬液(0. lg/ml， 0.2ml/10g)及同体积的生理盐水(0.2ml/10g)。每天给药1次，连续给药12天。于12天早上各组小鼠均腹腔注射5%鸡红细胞生理盐水混悬液0. 5ml，于第12天灌胃给药后2h，给鸡红细胞后4h，脱颈椎处死小鼠。腹腔注入汉氏液2.5ml，轻揉小鼠腹部，然后剪开小鼠腹部皮肤，在腹膜上剪一小孔，用吸管吸取腹腔液2ml置于试管中，混匀，吸取少许腹腔液滴于载玻片上，液点大小约为1. 5cmX2cm。将载玻片放在辅有湿纱布的糖瓷盘中，37°C孵育30min，生理盐水冲去附着的细胞，瑞氏染液染色，自来水冲洗晾干，显微镜下观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬情况，并计算吞噬百分率和吞噬指数。 吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数吞噬百分率％=吞噬指数=ioo个巨噬细胞(吞及未吞的) 被吞噬的鸡红细胞总数x 100%2IOO个巨噬细胞 表l腹腔巨噬细胞吞噬功能结果(；±S)组别动物数 (只)剂量 (g/kg)吞噬百分率 (%)吞噬指数空白对照组1061.4±9.50.69±0.08香菇多糖片组100.178.2±6.00.98士0.10大剂量低聚糖组100.987.9±6.2**2.37±0.11**中剂量低聚糖组100.683.7士4.91.19±0.14**小剂量低聚糖组100.378.4±5.4**1.06±0.07****表示与空白组比P<0.01从表l可以看出，与空白对照组比，大、中、小剂量低聚糖组能显著提高小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬百分率(P〈0.01)，可显著提高腹腔巨 噬细胞的吞噬指数(P〈0.01)。以大剂量黄精低聚糖组作用为强。 2.黄精低聚糖对正常小鼠溶血素形成的影响取小鼠50只，体重18 22g，雌雄各半，随机均匀分为5组。分别灌服大、 中、小剂量的黄精低聚糖水溶液(45mg/ml， 30mg/ml， 15mg/ml， 0.2ml/10g)、香菇 多糖混悬液(0. lg/ml， 0.2ml/10g)及同体积的生理盐水(0.2ml/10g)。每天 给药1次，连续给药12天。于给药第5天各组小鼠均腹腔注射5%鸡红细胞生 理盐水混悬液0.2ml/只，进行免疫，于最后l次给药后2h，小鼠眼眶取血， 离心，分离血清。用生理盐水1 : 100稀释后，取lml稀释液与5%鸡红细胞混 悬液0.5ml、 109&补体0.5ml (豚鼠血清，用鸡红细胞预先饱和6h)混匀，37°C 孵育30min，冰水中终止反应。另设不加补体的空白管作对照，吸取各管上清液于UV-2000型分光光度计540mn处比色，测定各组溶血素形成情况。 3.黄精低聚糖对正常小鼠溶血空斑形成的影响取小鼠50只，体重18 22g，雌雄各半，随机均匀分为5组。分别灌服大、 中、小剂量的黄精低聚糖水溶液(45mg/ml， 30mg/ml， 15mg/ml， 0.2ml/10g)、香菇 多糖混悬液(0. lg/ml， 0.2ml/10g)及同体积的生理盐水(0.2ml/10g)。每天 给药1次，连续给药12天。于给药第5天各组小鼠均腹腔注射5%鸡红细胞生 理盐水混悬液0.本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从黄精中提取的黄精低聚糖，其特征在于，由黄精炮制品粉碎后，加质量浓度为５０－９５％的乙醇，超声３０ｍｉｎ－６０ｍｉｎ或用质量浓度为５０－９５％的乙醇回流１ｈ－２ｈ两次，第一次加黄精炮制品体积重量的１０倍量的乙醇、第二次加黄精炮制品体积重量的７倍量的乙醇，过滤，合并两次滤液，滤液减压浓缩至无醇味，蒸馏水定容至相当于１ｇ／ｍｌ体积，得低聚糖、氨基酸、苷类极性成分的水溶液，水溶液上大孔吸附树脂以除去苷类成分，用大孔吸附树脂３倍体积的水洗，收集水洗液，浓缩，得棕褐色黄精低聚糖浸膏，经ＨＰＬＣ检识，该浸膏中主要含有果糖、葡萄糖、蔗糖、棉籽糖小分子糖，该浸膏干燥后得粉末状黄精低聚糖。

【技术特征摘要】
1、一种从黄精中提取的黄精低聚糖，其特征在于，由黄精炮制品粉碎后，加质量浓度为50-95％的乙醇，超声30min-60min或用质量浓度为50-95％的乙醇回流1h-2h两次，第一次加黄精炮制品体积重量的10倍量的乙醇、第二次加黄精炮制品体积重量的7倍量的乙醇，过滤，合并两次滤液，滤液减压浓缩至无醇味，蒸馏水定容至相当于1g/ml体积，得低聚糖、氨基酸、苷类极性成分的水溶液，水溶液上大孔吸附树脂以除去苷类成分，用大孔吸附树脂3倍体积的水洗，收集水洗液，浓缩...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨云，冯卫生，冯云霞，肖功胜，王爽，
申请(专利权)人：河南中医学院，
类型：发明
国别省市：41[中国|河南]