一种从马铃果中提取柳叶水甘草碱的方法技术

本发明专利技术公开了一种从马铃果中提取柳叶水甘草碱的方法，包括预处理、超声波提取、浓缩酸化、超滤过滤、上柱纯化、碱化、萃取等步骤，采用超声波提取和超滤过滤技术，可以有效的缩短提取时间，提高提取效率，具有产品纯度高、收率大等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种植物提取方法，特别是涉及一种柳叶水甘草碱的提取方法。
技术介绍
柳叶水甘草碱(Tabersonine，CAS NO. 4429-63-4 )是从夹竹桃植物柳叶水 甘草叶、长春花种子、椭圆叶水甘草种子或者非洲加纳沃坎加树种子马铃果中提取的， 其化学名禾尔为 Aspidospernidine-3-carboxylic acid, 2, 3, 6, 7-tetradehydro- (5 α， 12 β, 19 α) -methylseter,分子式为C21H24N2O2，分子量为336. 42。柳叶水甘草碱目前主要用 于合成一种抗癌药物长春西汀；同时经动物毒理实验验证，柳叶水甘草碱具有明显的降 血压作用。美国专利US3758478，公开了一种从非洲马铃果种提取柳叶水甘草碱的工艺，包括 多次溶剂提取、萃取、结晶等步骤，该方案存在的问题是步骤繁琐、需要使用大量的有苯、 氯仿等有毒溶剂，且提取率低。申请号为200810017789. 6的中国专利技术专利申请，张小燕等 公开了一种柳叶水甘草碱的制备工艺，主要包括原料预处理、加热回流处理、酸化、上柱纯 化、碱化、萃取、然后用水洗正烷层，除溶剂得产物等步骤。该工艺具有化学步骤简单、生产 周期短等优点，但是该工艺也存在以下缺点1)采用正已烷或石油醚提取，安全性较差、提 取效率偏低，提取时间长；2)提取液中含有的可溶性大分子杂质含量高，直接上柱纯化，纯 化效果差，且树脂使用时间短，再生频繁。
技术实现思路
针对现有技术中柳叶水甘草碱提取方法，提取率低、提取时间长，纯化效果差等缺 点，本专利技术的目的是提供一种工艺简单、生产成本低、产品纯度高的从马铃果中提取柳叶水 甘草碱的方法。为达到上述目的，本专利技术提供的技术方案为，一种从马铃果中提取柳叶水甘草碱 的方法，包括如下步骤1)预处理将马铃果粉碎后，备用；2)超声波提取采用5-8倍马铃果粉末体积、质量比为80%-99.5%的乙醇溶液，在超声 波作用下，进行提取2次，合并提取液，过滤提取液，得滤液；3)浓缩酸化减压浓缩滤液，回收乙醇，浓缩液采用5-6倍体积、PH值为4-5的酸水溶 液溶解，酸水液备用；4)超滤过滤酸水液进行超滤过滤，除去可溶性大分子杂质，得到超滤透析液；5)上柱纯化超滤透析液过大孔树脂吸附，用水洗杂，再用质量比为70%-80%的乙醇水 溶液洗脱产品，洗脱液浓缩备用，回收乙醇；6)碱化、萃取调节洗脱浓缩液的浓度，用浓氨水调节PH值至10-11，采用正己烷数次 萃取，溶液用水洗涤正己烷层，回收正己烷，得到目标产物柳叶水甘草碱。步骤2)中所述的超声波提取，采用超声波功率为200-250瓦，工作时间20_40分钟，工作温度为50-60°C，工作方式为工作5秒，间歇5秒。步骤4)中所述的超滤过滤，采用的超滤膜的特征为截留分子量为3000-8000道尔 顿，优选5000道尔顿，超滤膜的材质为聚砜、聚醚砜、复合超滤膜，其工作条件为温度25 35 0C，工作压力0. 5 2. 5 Mpa0步骤5)中所述的大孔树脂优选HPD-100大孔吸附树脂，HPD-100大孔吸附树脂属 于非极性树脂，由苯乙烯和二乙烯苯缩合而成，故又称芳香族吸附树脂，市面上即可购得。 HPD-100大孔吸附树脂适用范围比较广谱，适用于皂苷类、黄酮类、萜类等天然产物及中草 药植物的提取分离。本专利技术的优点是1)步骤1中采用超声波提取，具有提取温度低、提取率高、提取时间短等优点，可以提 高柳叶水甘草碱的提取率和缩短提取时间；2)步骤1中采用乙醇提取，安全可靠；3)步骤4中酸水液采用超滤过滤，可以有效除去溶液中的可溶性大分子杂质，如色素 等，减轻了后续的大孔树脂吸附负担，提高了目标产物的吸附率，以及产品纯度，特别是在 超滤膜截留分子量为5000道尔顿时，具有纯化效果好，杂质去除率高，目标产物损失小、过 滤速度快等优点；4)步骤4采用HPD100大孔吸附树脂吸附，对目标产物柳叶水甘草碱的吸附效果好、且 树脂寿命长、再生容易。具体实施例方式下面结合具体实施例对专利技术做进一步说明。实施例11)预处理将马铃果果实干燥、粉碎过20目筛后，备用；2)超声波提取取500克粉末，采用6倍体积，质量比为90%的乙醇溶液，温度为 50-60°C，在200瓦超声波作用下，超声波工作5秒，间歇5秒，提取40分钟，提取2次，合并 提取液，过滤，得滤液；3)浓缩酸化浓缩滤液，回收乙醇，得浓缩液，加入6倍体积，PH值为4-5的盐酸水溶液 洗涤浓缩液，得酸水液备用；4)超滤过滤采用的超滤膜的特征为截留分子量为5000道尔顿的复合超滤膜，其工作 条件为温度25 35°C，工作压力2. 0 2. 5 Mpa,酸水液直接进行超滤过滤，除去可溶性大 分子杂质，得到超滤透析液；5)上柱纯化采用HDP-100大孔树脂吸附，超滤透析液直接上样，水洗杂，再用质量比 为80%的乙醇水溶液洗脱产品，洗脱液浓缩备用，回收乙醇；6)碱化、萃取浓缩液中加入500ml水调节浓度，用浓氨水调节PH值至10-11，采用 500ml正己烷数次萃取，溶液用200ml水洗涤正己烷层，回收正己烷，得到纯度大于98%的目 标产物柳叶水甘草碱9. lg，得率1. 82%。实施例21)预处理将马铃果果实干燥、粉碎过20目筛后，备用；2)超声波提取取500克粉末，采用5倍体积，质量比为80%的乙醇溶液，温度为450-60°C，在250瓦超声波作用下，超声波工作5秒，间歇5秒，提取20分钟，提取2次，合并 提取液，过滤，得滤液；3)浓缩酸化浓缩滤液，回收乙醇，得浓缩液，加入5倍体积，PH值为4-5的盐酸水溶液 洗涤浓缩液，得酸水液备用；4)超滤过滤采用的超滤膜的特征为截留分子量为3000道尔顿的聚砜超滤膜，其工作 条件为温度25 35°C，工作压力1. 0 1. 8Mpa，酸水液直接进行超滤过滤，除去可溶性大 分子杂质，得到超滤透析液；5)上柱纯化超滤透析液过大孔树脂吸附，用水洗杂，再用质量比为80%的乙醇水溶液 洗脱产品，洗脱液浓缩备用，回收乙醇；6)碱化、萃取浓缩液中加入500ml水调节浓度，用浓氨水调节PH值至10-11，采用 500ml正己烷数次萃取，溶液用200ml水洗涤正己烷层，回收正己烷，得到纯度大于98%的目 标产物柳叶水甘草碱8. 9g，得率1. 82%。实施例31)预处理将马铃果果实干燥、粉碎过20目筛后，备用；2)超声波提取取500克粉末，采用6倍体积，质量比为99%的乙醇溶液，温度为 50-60°C，在220瓦超声波作用下，超声波工作5秒，间歇5秒，提取30分钟，提取2次，合并 提取液，过滤，得滤液；3)浓缩酸化浓缩滤液，回收乙醇，得浓缩液，加入5倍体积，PH值为4-5的盐酸水溶液 洗涤浓缩液，得酸水液备用；4)超滤过滤采用的超滤膜的特征为截留分子量为5000道尔顿的聚醚砜超滤膜，其工 作条件为温度25 35°C，工作压力5. 0 1. 5 Mpa,酸水液直接进行超滤过滤，除去可溶性 大分子杂质，得到超滤透析液；5)上柱纯化超滤透析液过大孔树脂吸附，用水洗杂，再用质量比为70%的乙醇水溶液 洗脱产品，洗脱液浓缩备用，回收乙醇；6)碱化、萃取浓缩液中加入500ml水调节浓度，用浓氨水调节PH值至10-11，采本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从马铃果中提取柳叶水甘草碱的方法，包括如下步骤：１）　预处理：将马铃果粉碎后，备用；２）　超声波提取：采用５－８倍马铃果粉末体积、质量比为８０％－９９．５％的乙醇溶液，在超声波作用下，进行超声波提取２次，合并提取液，过滤提取液，得滤液；３）　浓缩酸化：减压浓缩滤液，回收乙醇，浓缩液采用ＰＨ值为４－５的酸水溶液溶解，酸水液备用；４）　超滤过滤：酸水液进行超滤过滤，除去可溶性大分子杂质，得到超滤透析液；５）　上柱纯化：超滤透析液过大孔树脂吸附，用水洗杂，再用质量比为７０％－８０％的乙醇水溶液洗脱产品，洗脱液浓缩备用，回收乙醇；６）　碱化、萃取：调节洗脱浓缩液的浓度，用浓氨水调节ＰＨ值至１０－１１，采用正己烷数次萃取，溶液用水洗涤正己烷层，回收正己烷，得到目标产物柳叶水甘草碱。

【技术特征摘要】
1.一种从马铃果中提取柳叶水甘草碱的方法，包括如下步骤1)预处理将马铃果粉碎后，备用；2)超声波提取采用5-8倍马铃果粉末体积、质量比为80%-99. 5%的乙醇溶液，在超 声波作用下，进行超声波提取2次，合并提取液，过滤提取液，得滤液；3)浓缩酸化减压浓缩滤液，回收乙醇，浓缩液采用PH值为4-5的酸水溶液溶解，酸 水液备用；4)超滤过滤酸水液进行超滤过滤，除去可溶性大分子杂质，得到超滤透析液；5)上柱纯化超滤透析液过大孔树脂吸附，用水洗杂，再用质量比为70%-80%的乙 醇水溶液洗脱产品，洗脱液浓缩备用，回收乙醇；6)碱化、萃取调节洗脱浓缩液的浓度，用浓氨水调节PH值至10-11，采用正己烷数 次萃取，溶液用水洗涤正己烷层，回收正己烷，得到目标产物柳叶水甘草碱。2.如权利要求1所述的一种从马铃果中提取柳叶水甘草碱的方法，其特征在于步骤2) 采用6倍马铃果粉末体积、质量比为80%-99. 5%的乙醇溶液。3.如权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑志忠，蒋荔馨，陈义，甘全明，林志华，
申请(专利权)人：英杰华纳厦门生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：92[中国|厦门]