白介素-13结合蛋白制造技术

本发明专利技术包括IL-13结合蛋白。具体而言，本发明专利技术涉及嵌合抗体、 CDR移植抗体和人源化抗体。优选的抗体对hIL-13具有高亲和力并且 在体外和体内中和hIL-13活性。本发明专利技术的抗体可为全长抗体或其抗原 结合部分。还提供了本发明专利技术抗体的制备方法和使用方法。本发明专利技术的抗 体或抗体部分适用于例如在患有其中hIL-13活性起有害作用的病症的 人类个体中检测hIL-13和抑制hIL-13活性。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及IL-13结合蛋白，且具体而言涉及其在预防和/或治疗 包括哮喘、过敏、COPD、纤维化和癌症在内的各种疾病的用途。共同研究协议介绍本申i青的内容月良乂人Protein Design Labs, Inc.与Abbott Laboratories 于2005年12月14日签订的共同研究协议，且涉及IL-13的重组工程 化抗体。
技术介绍
人类IL-13是从活化T细胞克隆的17-kDa糖蛋白(Zurawski与de Vries 1994 Immunol Today 15 19-26),且由Th2谱系的活化T细胞产生， 尽管ThO和Thl CD4+T细胞、CD8+T细胞和几个例如肥大细胞的非-T 细胞群体也产生IL-13 (Zurawski和de Vries 1994 Immunol Today 15 19-26)。IL-13的功能包括在人类B细胞中转变成IgE (Punnonen, Aversa 等人1993 Proc Natl Acad Sci U S A 90 3730-4)且抑制人和小鼠炎性细 胞因子产生(de Waal Malefyt， Figdor等人，1993 J Immunol 151 6370-81; Doherty, Kastelein等人，1993 J Immunol 151 7151-60)的免疫球蛋白同 种型。IL-13与其细胞表面受体IL-13Ral和IL-13Ra2结合。IL画13Ral 以低亲和力(KD约10nM)与IL-13相互作用，接着募集IL-4Ra以形成 高亲和力(KD约0.4 nM)信号传导异二聚受体复合体(Aman, Tayebi等 人，1996 J Biol Chem 271 29265-70; Hilton, Zhang等人，1996 Proc Natl Acad Sci U S A 93 497-501)。 IL-4R/IL-13Ral复合体在例如B细胞、单 核细胞/巨噬细胞、树状细胞、嗜伊红性粒细胞、嗜碱性细胞、成纤维 细胞、内皮细胞、气管上皮细胞和气管平滑肌细胞的许多细胞类型上28表达(Graber, Gretener等人，1998 Eur J Immunol 28 4286-98; Murata， Husain等人，1998 Int Immunol 10 1103-10; Akaiwa, Yu等人,2001 Cytokine 13 75-84)。 IL-13Ral/IL-4R受体复合体的结扎使得包括信号转 导蛋白和转录活化因子(STAT6)和胰岛素受体底物-2(IRS-2)途径的各种 信号转导途径活化(Wang, Michieli等人，1995 Blood 86 421-27; Takeda, Kamanaka等人，1996 J Immunol 157 3220-2)。单独的IL-13Ra2链对 IL-13具有高亲和力(KD约0.25-0.4 nM),且起反向调节IL-13结合的 诱辨受体的作用(Donaldson, Whitters等人，1998 JImmunol 161 2317-24) 和诱导巨噬细胞和可能地其它细胞类型中TGF-b经由AP-1途径合成和 纤维化的信号传导受体的作用(Fichtner-Feigl, Strober等人，2006 Nat Med 12 99-106)。临床前。孝喘动物模型中进行的几个研究指示IL-13在哮喘中起重 要作用。这些数据包括IL-13基因剔除小鼠的哮喘抗性以及各种小鼠模 型中IL-13拮抗剂(可溶性IL-13受体、抗IL-13 mAbs等)的哮喘表型抑 制作用(Sela 1999 Harefuah 137 317-9; Wills-Karp和Chiaramonte 2003 Curr Opin Pulm Med 9 21-7; Wills-Karp 2004 Immunol Rev 202 175-90)。 多个研究已证明向小鼠和豚鼠的肺部药理学施用重组IL-13诱导气管 粘液高度分泌、嗜酸粒细胞增多和AHR(Grimig, Warnock等人，1998 Science 282 2261-3; Wills-Karp, Luyimbazi等人，1998 Science 282 2258-61; Kibe, Inoue等人，2003 Am J Respir Crit Care Med 167 50-6; Vargaftig和Singer 2003 Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol 284 L260-9; Vargaftig和Singer 2003 Am J Respir Cell Mol Biol 28 410-9)。 IL-13的这些效应在构成型或诱导型表达IL-13的转基因小鼠系统中重 新产生(Zhu, Homer等人，1999 J Clin Investl03 779-88; Zhu, Lee等 人，2001 Am J Respir Crit Care Med 164 S67-70; La匪e, Zheng等人， 2002 J Clin Invest 110 463-74)。 IL-13的慢性转基因过度表达也谤导上 皮下纤维化和气肿。缺乏IL-13 (和IL-14)信号传导分子STAT6的小鼠 未能发展过敏原诱导的AHR和粘液过度产生(Kuperman, Huang等人， 2002 Nat Med 8 885-9)。使用可溶性IL-13受体融合蛋白(sIL-13Ra2Fc) 的研究已证明此细胞因子在实验性过敏原卵白蛋白(OVA)诱导的气管 疾病中的关键作用(Grunig, Warnock等人,1998 Science 282 2261-3; Wills國Karp， Luyimbazi等人，1998 Science 282 2258-61; Taube, Duez等人，2002 J Immunol 169 6482-9)。也在鼠类哮喘慢性才莫型中证明了抗 IL-13治疗的效力。除表现出粘液高度分泌和AHR的特征外，慢性哮 喘的此模型证明了更急性模型中缺乏的几个人类疾病的特点。这些包 括位于上皮间空间的肺组织嗜酸粒细胞增多以及如由胶原沉积增加所 测定的平滑肌纤维化。用OVA在OVA敏化小鼠中每周1次重复气溶 胶攻击，历时总计4周诱导慢性译喘模型。最后2周OVA攻击中施用 抗IL-13抗体(自第36天开始，在研究的第53天评估效力读出值)显著 地抑制了 AHR,肺炎、杯状细胞增生、粘液高度分泌和气管纤维化 (Yang， Li等人,2005 J Pharmacol Exp Ther)。此外，在灵长类哮喘模 型中也证明IL-13拮抗剂的治疗作用抑制AHR[摘要，American Thoracic Society 2005]。由于已在哮喘患者的肺检测到升高含量的IL-13 mRNA和蛋白，其 与疾病的严重程度相互有关，因此IL-13牵涉于人类译喘的发病机制中 (Huang, Xiao等人，1995 J Immunol 155 2688-94)。另外，已鉴定出导 致升高的IL-13水平的人类IL-13遗传多态性，且其与哮喘和特异反应 性皮炎相关(Heinz本文档来自技高网...

【技术保护点】
包含抗原结合域的结合蛋白，所述结合蛋白能够结合ＩＬ－１３，所述抗原结合域包含至少一个ＣＤＲ，该ＣＤＲ包含选自以下的氨基酸序列：　ＣＤＲ－Ｈ１．　Ｘ↓［１］－Ｘ↓［２］－Ｘ↓［３］－Ｘ↓［４］－Ｘ↓［５］－Ｘ↓［６］－Ｘ↓［７］（ＳＥ Ｑ　ＩＤ　ＮＯ：６４），其中：　Ｘ↓［１］为Ｔ、Ｄ、Ｇ或Ｓ；　Ｘ↓［２］为Ｓ；　Ｘ↓［３］为Ｄ；　Ｘ↓［４］为Ｍ、Ｓ、Ｙ、Ｌ或Ｈ；　Ｘ↓［５］为Ｇ、Ｗ、Ｙ、Ａ、Ｓ或Ｎ；　Ｘ↓［６］为Ｖ、Ｉ或Ｍ；且　 Ｘ↓［７］为Ｄ、Ｈ、Ｓ、Ｙ、Ｎ或Ｇ；　ＣＤＲ－Ｈ２．　Ｘ↓［１］－Ｘ↓［２］－Ｘ↓［３］－Ｘ↓［４］－Ｘ↓［５］－Ｘ↓［６］－Ｘ↓［７］－Ｘ↓［８］－Ｘ↓［９］－Ｘ↓［１０］－Ｘ↓［１１］－Ｘ↓［１２］－Ｘ↓［１３］－Ｘ↓［１４］－ Ｘ↓［１５］－Ｘ↓［１６］－Ｘ↓［１７］（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６５），其中：　Ｘ↓［１］为Ｍ、Ｅ、Ｈ、Ｒ、Ｓ、Ｇ或Ｌ；　Ｘ↓［２］为Ｉ或不存在；　Ｘ↓［３］为Ｈ、Ｙ、Ａ、Ｄ、Ｓ或Ｗ；　Ｘ↓［４］为Ｐ、Ｓ、Ｗ或Ｇ；　 　Ｘ↓［５］为Ｓ、Ｇ、Ｅ或Ｄ；　Ｘ↓［６］为Ｄ、Ｇ、Ｓ、Ｅ或Ｎ；　Ｘ↓［７］为Ｓ、Ｙ或Ｇ；　Ｘ↓［８］为Ｅ、Ｎ、Ｙ、Ｖ或Ｒ；　Ｘ↓［９］为Ｔ、Ｉ或Ｋ；　Ｘ↓［１０］为Ｒ、Ｙ、Ｉ、Ｄ或Ａ；　Ｘ↓［１１］为 Ｌ、Ｙ、Ｄ或Ｆ；　Ｘ↓［１２］为Ｎ、Ｐ、Ｓ或Ｄ；　Ｘ↓［１３］为Ｑ、Ｅ、Ｄ、Ｐ或Ｓ；　Ｘ↓［１４］为Ｋ、Ｍ、Ｓ、Ｔ、Ａ或Ｖ；　Ｘ↓［１５］为Ｆ、Ｌ、Ｖ或Ｍ；　Ｘ↓［１６］为Ｋ、Ｒ或Ｑ；且　Ｘ↓［１７］为Ｄ 、Ｇ或Ｓ；　ＣＤＲ－Ｈ３．　Ｘ↓［１］－Ｘ↓［２］－Ｘ↓［３］－Ｘ↓［４］－Ｘ↓［５］－Ｘ↓［６］－Ｘ↓［７］－Ｘ↓［８］－Ｘ↓［９］－Ｘ↓［１０］－Ｘ↓［１１］－Ｘ↓［１２］－Ｘ↓［１３］－Ｘ↓［１４］（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６６ ），其中：　Ｘ↓［１］为Ｗ、Ｔ、Ｇ、Ｙ、Ｄ或Ｉ；　Ｘ↓［２］为Ｒ、Ａ、Ｓ、Ｇ或Ｖ；　Ｘ↓［３］为Ｔ、Ｆ、Ｙ或Ｓ；　Ｘ↓［４］为Ｓ、Ｔ或Ｙ；　Ｘ↓［５］为Ｙ、Ｆ或Ｇ；　Ｘ↓［６］为Ｆ或Ｙ；　Ｘ↓［７］ 为Ｓ、Ｙ、Ｉ或Ｆ；　Ｘ↓［８］为Ｄ、Ｌ、Ｙ或Ｐ；　Ｘ↓［９］为Ｙ；　Ｘ↓［１０］为Ｇ；　Ｘ↓［１１］为Ｙ、Ａ、Ｐ或Ｅ；　Ｘ↓［１２］为Ｆ、Ｍ、Ｓ、Ｌ或Ｉ；　Ｘ↓［１３］为Ｄ、Ｖ、Ｎ或Ｋ；且　Ｘ↓［１ ４］为Ｙ或Ｆ；　ＣＤＲ－Ｌ１．　Ｘ↓［１］－Ｘ↓［２］－Ｘ↓［３］－Ｘ↓［４］－Ｘ↓［５］－Ｘ↓［６］－Ｘ↓［７］－Ｘ↓［８］－Ｘ↓［９］－Ｘ↓［１０］－Ｘ↓［１１］－Ｘ↓［１２］－Ｘ↓［１３］－Ｘ↓［１４］－Ｘ↓［１５］－Ｘ↓［１ ６］－Ｘ↓［１７］（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６７），其中：　Ｘ↓［１］为Ｋ或Ｒ；　Ｘ↓［２］为Ｓ或Ａ；　Ｘ↓［３］为Ｓ或Ｔ；　Ｘ↓［４］为Ｑ、Ｋ或Ｌ；　Ｘ↓［５］为Ｎ、Ｓ、Ｔ、Ｇ或Ｅ；　Ｘ↓［６］为Ｌ、Ｔ或Ｓ ；　Ｘ↓［７］为Ｌ、Ｑ或Ｖ；　Ｘ↓［８］为Ｙ、Ｎ、Ｈ、Ｄ或Ｔ；　Ｘ↓［９］为Ｓ、Ｉ或Ｔ；　Ｘ↓［１０］为Ｓ、Ｄ、Ｎ、Ｈ或Ｙ；　Ｘ↓［１１］为Ｎ或Ｇ；　Ｘ↓［１２］为Ｑ；　Ｘ↓［１３］为Ｋ、Ｆ、Ｎ、Ｅ 或Ｓ；　Ｘ↓［１４］为Ｎ、Ｔ或Ｓ；　Ｘ↓［１５］为Ｙ或Ｆ；　Ｘ↓［１６］为Ｌ、Ａ或Ｍ；且　Ｘ↓［１７］为Ａ、Ｄ、Ｅ、Ｈ或Ｎ；　ＣＤＲ－Ｌ２．　Ｘ↓［１］－Ｘ↓［２］－Ｘ↓［３］－Ｘ↓［４］－Ｘ↓［５］－Ｘ↓［ ６］－Ｘ↓［７］（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６８），其中：　Ｘ↓［１］为Ｌ、Ｓ、Ｋ、Ｔ、Ｗ或Ｙ；　Ｘ↓［２］为Ｖ、Ｔ或Ａ；　Ｘ↓［３］为Ｓ或Ｎ；　Ｘ↓［４］为Ｎ、Ｋ、Ｔ、Ｍ或Ｒ；　Ｘ↓［５］为Ｒ、Ｋ或Ｌ；　Ｘ↓ ［６］为Ｆ、Ｄ、Ｅ、Ｈ、Ｐ或Ａ；且　Ｘ↓［７］为Ｓ、Ｒ或Ｐ；　和　ＣＤＲ－Ｌ３．　Ｘ↓［１］－Ｘ↓［２］－Ｘ↓［３］－Ｘ↓［４］－Ｘ↓［５］－Ｘ↓［６］－Ｘ↓［７］－Ｘ↓［８］－Ｘ↓［９］（ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：６９），其 ...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2006.9.8 US 60/843,2491. 包含抗原结合域的结合蛋白，所述结合蛋白能够结合IL-13，所述抗原结合域包含至少一个CDR，该CDR包含选自以下的氨基酸序列CDR-H1. X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7(SEQ ID NO64)，其中X1为T、D、G或S；X2为S；X3为D；X4为M、S、Y、L或H；X5为G、W、Y、A、S或N；X6为V、I或M；且X7为D、H、S、Y、N或G；CDR-H2. X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X12-X13-X14-X15-X16-X17(SEQ ID NO65)，其中X1为M、E、H、R、S、G或L；X2为I或不存在；X3为H、Y、A、D、S或W；X4为P、S、W或G；X5为S、G、E或D；X6为D、G、S、E或N；X7为S、Y或G；X8为E、N、Y、V或R；X9为T、I或K；X10为R、Y、I、D或A；X11为L、Y、D或F；X12为N、P、S或D；X13为Q、E、D、P或S；X14为K、M、S、T、A或V；X15为F、L、V或M；X16为K、R或Q；且X17为D、G或S；CDR-H3. X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X12-X13-X14(SEQ IDNO66)，其中X1为W、T、G、Y、D或I；X2为R、A、S、G或V；X3为T、F、Y或S；X4为S、T或Y；X5为Y、F或G；X6为F或Y；X7为S、Y、I或F；X8为D、L、Y或P；X9为Y；X10为G；X11为Y、A、P或E；X12为F、M、S、L或I；X13为D、V、N或K；且X14为Y或F；CDR-L1. X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X12-X13-X14-X15-X16-X17(SEQ ID NO67)，其中X1为K或R；X2为S或A；X3为S或T；X4为Q、K或L；X5为N、S、T、G或E；X6为L、T或S；X7为L、Q或V；X8为Y、N、H、D或T；X9为S、I或T；X10为S、D、N、H或Y；X11为N或G；X12为Q；X13为K、F、N、E或S；X14为N、T或S；X15为Y或F；X16为L、A或M；且X17为A、D、E、H或N；CDR-L2. X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7(SEQ ID NO68)，其中X1为L、S、K、T、W或Y；X2为V、T或A；X3为S或N；X4为N、K、T、M或R；X5为R、K或L；X6为F、D、E、H、P或A；且X7为S、R或P；和CDR-L3. X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9(SEQ ID NO69)，其中X1为F、W、Q或A；X2为Q或L；X3为H、G、Y、W或N；X4为N、S、T、L或Y；X5为Y、T、S、E或H；X6为L、V、F、Y、N、G、P或D；X7为P或H；X8为L、F、Y、W或R；且X9为T或V。2. 根据权利要求1的结合蛋白，其中所述至少一个CDR包含选自下列的氨基酸序列SEQ ID NOSEq ID NOSEQ ID NOSEQ ID NOSEQ ID NOSEQ ID NOSEQ ID NOSEq ID NOSEQ ID NO32的残基31-35;32的残基50-66;32的残基99-105;33的残基24-39;33的残基55-61;33的残基94-102;34的残基31-35;34的残基50-66;34的残基99-105;SE(5 ID NOSEQ ID NOSEQ ID NOSEQ ID NOSEQ ID NOSEQ ID NOSEQ ID NOSEQ ID NOSEq ID NO47的残基24-34;47的残基50-56;47的残基89-97;48的残基31-37;48的残基52-67;48的残基100-112;49的残基24-34;49的残基50-56;49的残基89-97;SEQ ID NO: 35的残基24-39;SEQ ID NO: 35的残基55-61;SEQ ID NO: 35的残基94-102;SEQ ID NO: 36的残基31-35;SEQ ID NO: 36的残基50-66;SEQ ID NO: 36的残基99-109;SEQ ID NO: 37的残基24-39;SEQ ID NO: 37的残基55-61;SEQ ID NO: 37的残基94-102;SEQ ID NO: 38的残基31-35;SEQ ID NO: 38的残基50画66;SEQ ID NO: 38的残基99-109;SEQ ID NO: 39的残基31-35;SEQ ID NO: 39的残基50-66;SEQ ID NO: 39的残基99-112;SEQ ID NO: 40的残基24-39;SEQ ID NO: 40的残基55-61;SEQ ID NO: 40的残基94-102;SEQIDNO: 41的残基31國35;SEQIDNO: 41的残基50-66;SEQIDNO: 41的残基99-112;SEQIDNO: 42的残基31-35;SEQ ID NO: 42的残基50-66;SEQ ID NO: 42的残基99-100;SEQ ID NO: 43的残基24-39;SEQIDNO: 43的残基55-61;SEQIDNO: 43的残基94-102;SEQIDNO: 44的残基31-35;SEQIDNO: 44的残基50-65;SEQIDNO: 44的残基98-106;SEQ ID NO: 45的残基24-40;SEQ ID NO: 45的残基56-62;SEQIDNO: 50的残基31-37;SEQ ID NO: 50的残基52-67;SEQIDNO: 50的残基100-112;SEQIDNO: 51的残基24-34;SEQIDNO: 51的残基60-66;SEQ ID NO: 51的残基89-97;SEQIDNO: 52的残基31-35;SEQ ID NO: 52的残基50-66;SEQIDNO: 52的残基99-107;SEQ ID NO: 53的残基23-36;SEQ ID NO: 53的残基52-58;SEQIDNO: 53的残基91-99;SEQIDNO: 54的残基31-35;SEQ ID NO: 54的残基50-65;SEQIDNO: 54的残基98-107;SEQ ID NO: 55的残基24-38;SEQ ID NO: 55的残基54-60;SEQIDNO: 55的残基93-101;SEQIDNO: 56的残基31-35;SEQIDNO: 56的残基50-65;SEQIDNO: 56的残基98-107;SEQ ID NO: 57的残基24-38;SEQ ID NO: 57的残基54-60;SEQIDNO: 57的残基93-101;SEQIDNO: 58的残基31-35;SEQ ID NO: 58的残基50-65;SEQIDNO: 58的残基98-107;SEQ ID NO: 59的残基24-38;SEQ ID NO: 59的残基54-60;SEQIDNO: 59的残基93-101;SEQIDNO: 60的残基31-35;SEQIDNO: 60的残基50-65;SEQ ID NO: 45的残基95-103;SEQ ID NO: 46的残基32-38;SEQ ID NO: 46的残基52-67;SEQ ID NO: 46的残基100-112SEQ ID NO: 62的残基31-35;SEQ ID NO: 62的残基50-65;SEQ ID NO: 62的残基98-107;SEQ ID NO: 63的残基24-38;SEQ ID NO: 63的残基54-60;和SEQ ID NO: 63的残基93-101。3. 根据权利要求1的结合蛋白，其中所述结合蛋白包含至少3个CDR。4. 据权利要求3的结合蛋白，其中所迷至少3个CDR选自下列可变域CDR组<table>table see original document page 6</column></row><table><table>table see original document page 7</column></row><table><table>table see original document page 8</column></row><table>VL 29G5 CDR國L2SEQ ID NO: 49的残基50-56VL 29G5 CDR-L3SEQ ID NO: 49的残基89-97VH 33C3 CDR组VH 33C3 CDR-H1SEQ ID NO50的残基31-37VH 33C3 CDR-H2SEQ ID NO50的残基52-67VH 33C3 CDR画H3SEQ ID NO50的残基100-112VL 33C3 CDR组VL33C3 CDR-L1SEQ ID NO51的残基24-34VL 33C3 CDR-L2SEQ ID NO51的残基60-66VL 33C3 CDR-L3SEQ ID NO51的残基89-97VH 4A8 CDR组VH 4A8 CDR-H1SEG ID NO52的残基31-35VH 4A8 CDR-H2SEQ ID NO52的残基50-66VH 4A8 CDR-H3SEQ ID NO52的残基99-1074A8 CDR组VL 4A8 CDR-L1SEQ ID NO53的残基23-36VL 4A8 CDR-L2SEQ ID NO53的残基52-58VL 4A8 CDR-L3SEQ ID NO53的残基91-99VH1B6 CDR组VH1B6CDR-H1SEQ ID NO54的残基31-35VH 1B6CDR-H2SEQ ID NO54的残基50-65VH 1B6 CDR-H3SEQ ID NO54的残基98-107VL1B6 CDR组VL 1B6 CDR-L1SE(^ ID NO,55的残基24-38VL 1B6 CDR-L2SEQ ID NO55的残基54-60VL 1B6 CDR-L3SEQ ID NO.55的残基93-101VH 3E5 CDR组VH 3E5 CDR-H1SEQ ID NO:56的残基31-35VH 3E5 CDR画H2SEQ ID NO.56的残基50-65VH 3E5 CDR-H3SEQ ID NO 56的残基98-107VL 3E5 CDR组9<table>table see original document page 10</column></row><table>。5. 根据权利要求4的结合蛋白，其包含至少2个可变域CDR组。6. 根据权利要求5的结合蛋白，其中所述至少2个可变域CDR 组选自VH 25C8 CDR组& VL 25C8 CDR组；VH 9C11 CDR组&VL 9C11 CDR组； VH 21D9 CDR组&VL 21D9 CDR组； VH 22D10 CDR组&VL 22D10 CDR组； VH 5F1 CDR组&VL 5F1 CDR组； VH 5G1 CDR组&VL 5G1 CDR组； VH 3H7 CDR组&VL 3H7 CDR组； VH 14B2 CDR組&VL 14B2 CDR组； VH 13C5 CDR组&VL 13C5 CDR组； VH 29G5 CDR组&VL 29G5 CDR组； VH 33C3 CDR组&VL 33C3 CDR组； VH 4A8 CDR组&VL 4A8 CDR组； VH 1B6 CDR组&VL 1B6 CDR组； VH 3E5CDR组&VL 3E5 CDR组； VH 6C8 CDR组&VL 6C8 CDR组； VH5D3CDR组&VL5D3CDR组；和 VH 8B6 CDR组&VL犯6 CDR组。7. 根据权利要求6的结合蛋白，其还包含人类接纳体框架。8. 根据权利要求7的结合蛋白，其中所述人类接纳体框架包含 选自下列的氨基酸序列SEQ ID NO.6SEQ ID NO.16SEQ ID NO.26SEQ ID NO.7SEQ ID NO.17SEQ ID NO.27SEQ ID NO.8SEQ ID NO.18SEQ ID NO.28SE(5 ID NO.9SEQ ID NO.19SEQ ID NO.29SEQ ID NO.10SEQ ID NO.20SEQ ID NO.30SEQ ID NO.11SEQ ID NO.21和SEQ ID NO.12SEQ ID NO.22SEq ID NO.,31SEQ ID NO.13SEQ ID NO.23SEQ ID NO.14SEQ ID NO.24SEQ ID NO.15SEQ ID NO.259. 根据权利要求7(或9)的结合蛋白，其中所述人类接纳体框架 包含至少一个框架区域氨基酸取代，其中该框架的氨基酸序列与所述 人类接纳体框架的序列至少65%相同且包含至少70个与所述人类接纳体框架相同的氨基酸残基。10. 根据权利要求8的结合蛋白，其中所述人类接纳体框架在关键残基处包含至少 一 个框架区域氨基酸取代，所述关键残基选自邻近于CDR的残基；糖基化位点残基；稀有残基；能够与人类IL-13相互作用的残基； 能够与CDR相互作用的残基； 规范残基；重链可变区与轻链可变区之间的接触残基； Vernier区中的残基；和在Chothia定义的可变重链CDRl与Kabat定义的第 一重链框架之间重 叠的区域中的残基。11. 根据权利要求9的结合蛋白，其中关键残基选自2L、 15L、 22L、 41L、 42L、 44L、 49L、 50L、 51L、 62L、 71L、 73L、丽、術、 46H、 48H、 67H、 68H、 70H、 72H、 74H、 76H、 83H、 84H、 86H、 87H 和97H。12. 根据权利要求11的结合蛋白，其中所述结合蛋白为共有人类 可变域。13. 根据权利要求1的结合蛋白，其中所述结合蛋白包含至少一 个具有选自以下的氨基酸序列的可变域SEQ ID NO.70SEQ ID NO.81SEQ ID NO.71SEQ ID NO.82SEG ID NO.72SEQ ID NO.83SEQ ID NO.73SEQ ID NO.84SEQ ID NO.74SEQ ID NO.85SEQ ID NO.75SEQ ID NO.92SEQ ID NO.76SEQ ID NO.93SEQ ID NO.77和SEQ ID NO.78SEQ ID NO.:94SEG ID NO.79SEQ ID NO.8014. 根据权利要求13的结合蛋白，其中所述结合蛋白包含2个可 变域，其中该2个可变域具有选自下列的氨基酸序列SEq ID NO70 & SEQ ID NO71;SEQ ID NO72 & SEQ ID NO73;SEQ ID NO74 & SEQ ID NO75;SEQ ID NO76 & SEQ ID NO77;SEQ ID NO78 & SEQ ID NO79;SEQ ID NO80 & SEQ ID NO81;SEQ ID NO82 & SEG ID NO83;SEQ ID NO84 & SEQ ID NO85;SEQ ID NO80 & SEQ ID NO92;SEQ ID NO80 & SEQ ID NO93;SEQ ID NO80 & SEQ ID NO94。15. 根据权利要求11的结合蛋白，其中所述结合蛋白包含至少一 个具有选自下列的氨基酸序列的可变域SEQ ID NO.70SEQ ID NO.78SEQ ID NO.: 92SEQ ID NO.71SEQ ID NO.79SEQ ID NO.: 93SEQ ID NO.72SEQ ID NO.80和SEQ ID NO.73SE(5 ID NO.81SEQ ID NO.: 94SE(5 ID NO.74SEQ ID NO.82SEQ ID NO.75SEQ ID NO.83SEQ ID NO.76SEG ID NO.84SE(5 ID NO.77SEQ ID NO.8516. 根据权利要求1的结合蛋白，其中所述结合蛋白结合IL-13。17. 根据权利要求14的结合蛋白，其中所述结合蛋白结合IL-13。18. 根据权利要求17的结合蛋白，其中该结合蛋白能够调节 IL-13的生物学功能。19. 根据权利要求17的结合蛋白，其中所述结合蛋白能够中和 IL曙13。20. 根据权利要求17的结合蛋白，其中如通过表面等离子体共振 所测定，所述结合蛋白对所述标靶具有选自下列的结合速率常数(k。n): 至少约10W;至少约lOW1;至少约ltyVV1;至少约Wm-V1;和至少约1()6m-V1。21. 根据权利要求17的结合蛋白，其中如通过表面等离子体共振 所测定，所述结合蛋白对所述标靶具有选自下列的分解速率常数(k。ff): 至多约10—Y、至多约1(TV、至多约10'5s;和至多约10、。22. 根据权利要求17的结合蛋白，其中所述结合蛋白对所述标靶 具有选自下列的解离常数(KD):至多约10^M;至多约1(^M;至多约 1(T9M;至多约10—1C)M;至多约1(TM;至多约10^M;和至多10—13 M。23. 抗体构建体，其包含根据权利要求1的结合蛋白，所述抗体 构建体还包含接头多肽或免疫球蛋白恒定区。24. 根据权利要求23的抗体构建体，其中所述结合蛋白选自 免疫球蛋白分子， 二硫化物连接的Fv, 单克隆抗体， scFv，嵌合抗体， 单域抗体， CDR移植抗体， 双功能抗体，人源化抗体， 多特异性抗体，Fab, 双重特异抗体，和Fab', 双特异性抗体。 F(ab，)2, Fv，25. 根据权利要求23的抗体构建体，其中所述结合蛋白包含选自 下列的重链免疫球蛋白恒定域人类IgM恒定域， 人类IgGl恒定域， 人类IgG2恒定域， 人类IgG3恒定域，人类IgG4恒定域， 人类IgE恒定域， 和人类IgA恒定域。26. 根据权利要求23的抗体构建体，其包含具有选自下列的氨基 酸序列的免疫球蛋白恒定域 SEQIDNO.: 2 SEQIDNO.: 3 SEQIDNO.: 4和 SEQIDNO.: 5。27. 抗体缀合物，其包含根据权利要求24的抗体构建体，所述抗体缀合物还包含选自免疫粘附分子、造影剂、治疗剂和细胞毒性剂的 试剂。28. 根据权利要求27的抗体缀合物，其中所述试剂为选自放射性 标记、酶、荧光标记、发光标记、生物发光标记、磁性标记和生物素 的造影剂。29. 根据权利要求27的抗体缀合物，其中所述造影剂为选自3H、 14C、 35S、 9。Y、 Tc、 mln、 125I、 131I、 177Lu、 166Ho和153Sm的放射性 才示t己。30. 根据权利要求27的抗体缀合物，其中所述试剂为选自抗代谢 物、烷基化剂、抗生素、生长因子、细胞因子、抗血管生成剂、抗有 丝分裂剂、蒽环霉素、毒素和细胞凋亡剂的治疗剂或细胞毒性剂。31. 根据权利要求24的抗体构建体，其中所述结合蛋白具有人类 糖基化模式。32. 根据权利要求1的结合蛋白，其中所述结合蛋白为结晶结合 蛋白。33. 根据权利要求23的抗体构建体，其中所述抗体构建体为结晶 抗体构建体。34. 根据权利要求33的抗体构建体，其中所述结晶抗体构建体为 不含载体的药物控释结晶抗体构建体。35. 根据权利要求34的抗体构建体，其中所述抗体构建体比所述 抗体构建体的可溶性对应物具有更大体内半衰期。36. 根据权利要求34的抗体构建体，其中所述抗体构建体保留生 物学活性。37. 分离的核酸，其编码根据权利要求1的结合蛋白氨基酸序列。38. 分离的核酸，其编码根据权利要求23的抗体构建体氨基酸序列。39. 载体，其包含根据权利要求38的分离的核酸。40. #4居权利要求39的载体，其中所述载体选自pcDNA、 pTT、 pTT3、 pEFBOS、 pBV、 pJV和pBJ。41. 宿主细胞，其包含根据权利要求39的载体。42. 根据权利要求41的宿主细胞，其中所述宿主细胞为原核细胞。43. 根据权利要求42的宿主细胞，其中所述宿主细胞为大肠杆菌。44. 根据权利要求41的宿主细胞，其中所述宿主细胞为真核细胞。45. 根据权利要求44的宿主细胞，其中所述真核细胞选自原生生 物细胞、动物细胞、植物细胞和真菌细胞。46. 才艮据权利要求44的宿主细胞，其中所述真核细胞为选自哺乳 动物细胞、鸟类细胞和昆虫细胞的动物细胞。47. 根据权利要求44的宿主细胞，其中所述宿主细胞为CHO细胞。48. 根据权利要求44的宿主细胞，其中所述宿主细胞为COS。49. 根据权利要求44的宿主细胞，其中所述宿主细胞为酵母细胞。50. 根据权利要求49的宿主细胞，其中所述酵母细胞为酿酒酵母。51. 根据权利要求44的宿主细胞，其中所述宿主细胞为昆虫Sf9 细胞。52. 产生能够结合IL-13的蛋白的方法，所述方法包括在培养基 中在足以产生能够结合IL-13的结合蛋白的条件下，培养根据权利要求 41的宿主细;9包。53. 根据权利要求52的方法产生的蛋白。54. 用于释放结合蛋白的组合物，所述组合物包含(a) 制剂，其中所述制剂包含根据权利要求33的结晶结合蛋白和组 分；和(b) 至少一种聚合载体。55. 根据权利要求54的组合物，其中所述聚合载体为选自下列的 一种或多种聚合物聚(丙烯酸)、聚(氰基丙烯酸酯)、聚(氨基酸)、聚(酸 酐)、聚(缩肽)、聚(酯)、聚(乳酸)、聚(乳酸-共-乙醇酸)或PLGA、聚(p-羟基丁酸酯)、聚(己内酯)、聚(二氧杂环己酮)；聚(乙二醇)、聚((羟丙 基)曱基丙烯酰胺)、聚[(有机)磷腈]、聚(原酸酯)、聚(乙烯醇)、聚(乙烯 吡咯烷酮)、顺丁烯二酸酐-烷基乙烯基醚共聚物、复合多元醇、白蛋白、海藻酸盐、纤维素和纤维素衍生物、胶原、血纤蛋白、明胶、透明质 酸、寡糖、葡糖胺聚糖、硫酸化多糖、其混合物和共聚物。56. 根据权利要求54的组合物，其中所述组分选自白蛋白、蔗糖、 海藻糖、乳糖醇、明胶、羟丙基-P-环糊精、甲氧基聚乙二醇和聚乙二醇。57. 用于治疗哺乳动物的方法，所述方法包括向所述哺乳动物施 用有效量的根据权利要求54的组合物的步骤。58. 药物组合物，其包含根据权利要求1的结合蛋白和药物学上 可接受的载体。59. 根据权利要求58的药物组合物，其中所述药物学上可接受的 载体起用于增加所述结合蛋白的吸收或分散的辅助剂的作用。60. 根据权利要求59的药物组合物，其中所述辅助剂为透明质酸酶。61. 根据权利要求58的药物组合物，其还包含至少一种用于治疗 其中IL-13活性起有害作用的病症的其它治疗剂。62. 根据权利要求61的药物组合物，其中所述其它治疗剂选自 治疗剂、造影剂、细胞毒性剂、血管生成抑制剂；激酶抑制剂；协同 刺激分子阻断剂；粘着分子阻断剂；抗细胞因子抗体或其功能片段； 曱胺蝶呤；环孢菌素；雷帕霉素；FK506;可检测标记或报道基因；TNF 拮抗剂；抗风湿剂；肌肉松弛剂、麻醉药、非甾类消炎药物(NSAID)、 止痛药、麻醉剂、镇静剂、局部麻醉剂、神经肌肉阻断剂、抗菌剂、 牛皮癣治疗剂、皮质类固醇、合成代谢类固醇、红血球生成素、免疫、 免疫球蛋白、免疫抑制剂、生长激素、激素替代药物、放射性药物、 抗抑郁剂、抗精神病剂、刺激剂、哮喘药剂、卩激动剂、经吸入甾类药 物、口服甾类药物、肾上腺素或类似物、细胞因子和细胞因子拮抗剂。63. 降低人类IL-13活性的方法，所述方法包括使人类IL-13与根 据权利要求1的结合蛋白接触而使得人类IL-13活性降低。64. 降低患有其中IL-13活性起有害作用的病症的人类个体中的 人类IL-13活性的方法，所述方法包括向所述人类个体施用根据权利要 求1的结合蛋白，以使得所述人类个体中的人类IL-13活性降低。65. 通过向个体施用根据权利要求1的结合蛋白来治疗所述个体 的其中IL-13活性起有害作用的疾病或病症的方法。66. 根据权利要求65的方法，其中所述病症选自呼吸病症；哮 喘；过敏性和非过敏性哮喘；因感染所致的哞喘；因呼吸道合胞病毒 (RSV)感染所致的哮喘；慢性阻塞性肺病(COPD);其它涉及气管炎症 的病症；嗜酸粒细胞增多；纤维化和粘液过量产生；嚢性纤维化；肺 纤维化；特异反应性病症；特异反应性皮炎；荨麻渗...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴辰斌，R·W·迪克松，J·P·贝尔克，银华，M·A·阿吉里亚迪，C·A·卡夫，P·R·欣顿，S·库马，T·L·梅林，陈炎，
申请(专利权)人：吴辰斌，R·W·迪克松，J·P·贝尔克，银华，M·A·阿吉里亚迪，C·A·卡夫，P·R·欣顿，S·库马，T·L·梅林，陈炎，
类型：发明
国别省市：US