一种通过ＢＭＰ１５基因高效快速检测绵羊高繁殖性状的方法技术

本发明专利技术提供的一种通过ＢＭＰ１５基因高效快速检测绵羊高繁殖性状的方法，包括１）在策勒黑羊ＢＭＰ１５基因编码序列中新发现的一个ＳＮＰ位点，位点位于Ｇｅｎｅｂａｎｋ序列，从ＢＭＰ１５基因序列的起始密码子ＡＴＧ开始＋７５５位点，发生Ｔ－Ｃ突变（简称Ｔ７５５Ｃ）；２）合成一对核苷酸序列作为检测Ｔ７５５Ｃ位点的引物，其正向引物：５′－ｇａａｇａｃｃａａａｃｃｔｃｔｃｃｃｔａａｇｇ－３′；反向引物：５′－ｔａｃｔｔｔｃａｇｇｃｃｃａｔｃａｔｇｃｔｃｃ－３′；上下游引物长度均为２３ｂｐ，将其结合到绵羊ＢＭＰ１５基因相应的模板链上，并扩增到含有Ｅ＋７５５位点的核酸序列；３）提取ＤＮＡ，利用引物扩增ＰＣＲ，将产物用２％琼脂糖凝胶电泳检测，用溴化乙锭染色，以凝胶成像确定已扩增的目的条带；４）利用限制性内切酶ＡｐａＩ对ＰＣＲ产物进行消化，酶切消化产物为１２０ｂｐ和１４０ｂｐ两条带时，表示个体具有高繁殖性能。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及策勒黑羊BMP15基因编码序列上的一个单核苷酸多态性(简称SNP) 位点，可作为绵羊高繁殖性状的一个分子标记，建立了判定该SNP位点基因型的检测方法。
技术介绍
绵羊属单胎哺乳类动物，但某些绵羊品种却具有稳定的多胎性能。研究认为， BMPR-IB基因，⑶F9基因和BMP15基因对控制绵羊多胎性能有重要价值，尤其发现在以上 三个基因序列中的碱基改变，可以显著影响绵羊的繁殖性状。！^ecB基因是在绵羊上发现的 第一个多胎主效基因，该基因是BMPR-IB基因上的一个碱基发生突变产生，同样在⑶F9和 BMP15上也发现能够影响绵羊产羔性能的基因。在我国的多胎绵羊中，均发现了 !^ecB基因存在并显著影响产羔数，该基因已经作 为分子标记在生产实践中广泛应用；但其他多胎主效基因研究还没有明确的结论。本专利技术 研究绵羊多胎主效基因，有助于了解哺乳动物繁殖性状的作用机制，同时可以把多胎主效 基因作为分子标记，迅速提高绵羊的繁殖性能。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供的通过BMP15基因高效快速检测绵羊高繁殖性状的方 法，对甄别绵羊的繁殖率具有着重要的科学价值，并已得到实践的验证。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种通过ＢＭＰ１５基因高效快速检测绵羊高繁殖性状的方法，其特征在于：包括１）在策勒黑羊ＢＭＰ１５基因编码序列中新发现的一个ＳＮＰ位点，其位点位于Ｇｅｎｅｂａｎｋ序列（序列号为：ＮＭ＿００１１１４７６７．１）从ＢＭＰ１５基因序列的起始密码子ＡＴＧ开始＋７５５位点，发生了Ｔ→Ｃ突变（简称Ｔ７５５Ｃ）；２）人工合成一对核苷酸序列作为检测Ｔ７５５Ｃ位点的引物，其正向引物：５′－ｇａａｇａｃｃａａａｃｃｔｃｔｃｃｃｔａａｇｇ－３′；反向引物：５′－ｔａｃｔｔｔｃａｇｇｃｃｃａｔｃａｔｇｃｔｃｃ－３′；上下游引物长度均为２３ｂｐ，将其结合到绵羊ＢＭＰ１５基因相应的模板链上，并扩增到含有Ｅ＋７５５位点的核酸...

【技术特征摘要】
1.一种通过BMP15基因高效快速检测绵羊高繁殖性状的方法，其特征在于包括1)在 策勒黑羊BMP15基因编码序列中新发现的一个SNP位点，其位点位于Genebank序列(序列 号为NM_001114767. 1)从BMP15基因序列的起始密码子ATG开始+755位点，发生了 T — C 突变(简称T755C) ；2)人工合成一对核苷酸序列作为检测T755C位点的引物，其正向引物 5‘ -gaagaccaaacctctccctaagg-3‘；反向弓丨物5‘ _tactttcaggcccatcatgctcc_3‘；上下 游引物长度均为23bp，将其结合到绵羊BMP15基因相应的模板链上，并扩增到含有E+755位 点的核酸序列；3)提取DNA，利用引物扩增PCR，将产物用2%琼脂糖凝胶电泳检测，用溴化 乙锭染色，以凝胶成像确定已扩增的目的条带；4)利用限制性内切酶ApaI对PCR产物进行 消化，消化后用...

【专利技术属性】
技术研发人员：史洪才，白杰，冯利君，牛志刚，梁庆玲，杨丹，
申请(专利权)人：新疆维吾尔自治区畜牧科学院中国—澳大利亚绵羊育种研究中心，
类型：发明
国别省市：65[中国|新疆]